摘要:目的 建立特异灵敏的牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)荧光定量PCR 检测方法,并对牛源性样本进行筛查?方法 根据Genbank 中登录的BCV 的N 基因序列设计TaqMan 引物探针,建立基于TaqMan 探针法的BCV PCR 检测方法,对收集到的牛源样本进行BCV 筛查,并对部分阳性样本的PCR 产物进行测序鉴定?结果 建立了能够特异检测BCV 的TaqMan 探针法荧光定量PCR 检测方法,其标准曲线相关系数Slope 为-3. 417,相关系数r2 为0. 999,,扩增效率Eff 为96. 195%?该方法检测BCV 的敏感度为40 copies?使用该方法检测64 份牛肛拭子样本检出率为1. 5%,检测33 份牛源生物制品检出率为6%,部分阳性样本的PCR 产物经测序比对为BCV 核酸序列,说明BCV 在国内牛群中流行,牛源相关生物制品中有感染BCV 的潜在风险?结论 经测序验证,建立的方法能够灵敏的检测样本中的BCV 核酸,应加强牛源相关生物制品中BCV 的监测,避免人感染BCV 的潜在风险?