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    2024年第34卷第3期
    • 刘茂林,王晓堂,宋晓娜,马云辉,常潇琪,宋国华

      2024,34(3):1-9, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.001

      Abstract:

      目的 本研究通过在细胞水平检测 Gli2 对口腔癌细胞 Tca8113 增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确 Gli2 调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。 方法 本研究利用 siRNA 抑制 Tca8113 细胞中 Gli2 的表达,通过CCK-8、平板克隆以及 transwell 小室实验分别检测 Gli2 对 Tca8113 细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。 进一步利用 qRT-PCR 与 Western blot 实验探究 Gli2 调控 Tca8113 细胞恶性增殖和转移机制。 结果 口腔癌细胞 Tca8113 中Gli2 的 mRNA 和蛋白表达升高。 干扰 Gli2 表达可抑制 Tca8113 细胞增殖、生长、迁移及侵袭。 进一步研究发现干扰 Gli2 表达可抑制 Hedgehog(Hh)通路关键因子的 mRNA 与蛋白表达。 此外,干扰 Gli2 表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的 mRNA 与蛋白表达。 结论 口腔癌病变过程中 Gli2 被异常激活,干扰 Gli2 表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。 Gli2 通过调控 Hh 通路与 EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。 本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。

    • 李彦红,修晶辉,周 澧,郭建国

      2024,34(3):10-17, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.002

      Abstract:

      目的 研究刹车制动来源颗粒物对机体的潜在危害。 方法 研磨刹车片颗粒、硫化锑颗粒,小鼠通过气管灌注暴露 1 个月后,观察肺、心脏、肝等内脏器官病理改变,同时用流式细胞术分析外周血巨噬细胞和自然调节 T 淋巴细胞(regulatory T cell,Treg)的变化。 结果 刹车片颗粒及硫化锑颗粒暴露小鼠肺泡壁外源物质沉积,血管周围出现明显的炎症细胞浸润并随着暴露浓度的增加而加重,同时可出现心脏血管炎症和微血栓以及肝细胞肿胀等病理改变;Treg 细胞减少,硫化锑组和低剂量刹车片组巨噬细胞增加,同时 M2 型巨噬细胞比例下调。 结论刹车片颗粒及其成分硫化锑颗粒暴露对小鼠肺、心脏、肝等脏器具有不同程度的毒性作用,并对免疫系统造成了影响,提示刹车来源的空气污染存在潜在健康危害。

    • 陆 杰,李群生,周 磊,李东润,申振南,李凝华,陈 冬,唐文平,朱璠宇,杨文涛

      2024,34(3):18-26, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.003

      Abstract:

      目的 通过手术诱导 SD 大鼠精索静脉曲张(VC),阿扑吗啡试验(APO 试验)筛选 VC 后勃起功能障碍(ED)的大鼠,探讨建立 VC 合并 ED 模型的方法。 方法 将 60 只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组,每组 20 只;参照 Turner 法,部分结扎左侧肾静脉,诱导左侧 VC;并进行 3 次 APO 试验,筛选诱导 VC 后出现 ED 的大鼠,观察并记录勃起次数、生殖器梳理次数、打哈欠次数;测量双侧精索静脉直径;对双侧睾丸和肾称重;HE 染色观察阴茎和左睾的病理改变;统计模型组大鼠的成模率。 结果 模型组 20 只大鼠中有 15 只成功进行 VC 合并 ED 造模,成模率 75%;造模后,模型组左侧精索静脉直径显著增加(P<0. 01),且显著高于造模前(P<0. 01),模型组右侧精索静脉直径增加(P<0. 05),且高于造模前(P<0. 05);模型组左侧睾丸与右侧睾丸相比,重量显著降低(P<0.01);各组双侧肾重量相比,组间及组内无明显差异(P<0. 05);模型组勃起次数、打哈欠次数、生殖器梳理次数显著减少(P<0. 01),且随造模时间递减;模型组左侧睾丸和阴茎病理改变显著。 结论 Turner 法可以诱导大鼠精索静脉直径增加,引起睾丸损伤和重量下降,APO 试验可以筛选诱导 VC 后出现 ED 的大鼠,二者相结合适用于构建与人类 VC 合并 ED 状态较相似的动物模型。

    • 马立威,姚宏玉,陈 哲,倪世宇,陈 颂,李 京,刘吉成

      2024,34(3):27-35, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.004

      Abstract:

      目的 探讨 PI3k / Akt 通路在大戟大枣汤( decoction of Euphorbia fischeriana Steud. and jujuba,DEFSJ)抗雌激素受体(ER)阴性(-)和 ER 阳性(+)乳腺癌中的调控作用,为乳腺癌的针对性治疗提供参考。 方法制备 DEFSJ 提取液,采用 UHPLC-Triple Quad 仪进行质控分析。 DEFSJ 含药血清(containing serum,CS)依照体外血清药理学方法进行获取,乳腺癌(ER-)MDA-MB-453 和(ER+)MCF-7 细胞分别用不同浓度 DEFSJ-CS 干预 48 h。流式细胞术检测细胞周期分布,DNA ladder 实验评估细胞凋亡程度,Western blot 法检测 PI3k / Akt 通路相关蛋白表达,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测 FoxO3a、FoxO1a 及 Bim mRNA 表达;激光共聚焦显微镜观察 FoxO3a蛋白核转位。 结果 UPLC 对 5 批 DEFSJ 提取物进行了分析,结果表明制备工艺可行,质量可控,保证了药理学实验结果的准确性。 体外实验中发现,DEFSJ-CS 能阻断细胞在 G2 / M 期(P<0. 05,P<0. 01);DNA ladder 实验中呈现典型的细胞凋亡梯带;与阴性对照组比较,DEFSJ-CS 能使 p-PI3k、p-Akt、p-FoxO3a 及 p-FoxO1a 蛋白表达降低(P<0. 05,P<0. 01),Bim 蛋白表达升高(P<0. 05);使 FoxO3a、FoxO1a mRNA 表达降低(P<0. 05,P<0. 01),Bim mRNA 表达升高(P<0. 05,P<0. 01);并能使细胞中 FoxO3a 蛋白呈现显著的核转位变化;且各数据结果均显示 DEFSJ-CS 对(ER-)MDA-MB-453 细胞比对(ER+)MCF-7 细胞作用效果更好。 结论 PI3k / Akt 通路参与了大戟大枣汤抗乳腺癌作用的调控,作用效果因乳腺癌表型差异而不同。

    • 刘 燕,彭梦薇,刘高源,杨铁柱,张文娴,吴耀松,陈玉龙

      2024,34(3):36-44,50, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.005

      Abstract:

      目的 研究 4T1 乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激方法构建乳腺癌合并抑郁症小鼠模型核心行为症状、生物学指标、病理学等改变。 方法 BABL/ c 小鼠随机分为正常( Control) 组、束缚( Stress) 组、移植瘤(Tumor)组和束缚移植瘤(Stress+Tumor,S+T)组,将 4T1 细胞株接种于 Tumor 和 S+T 组小鼠腋下,待成瘤后,给予Stress 和 S+T 组小鼠束缚应激 21 d。 造模期间监测各组小鼠体重、摄食量。 实验结束后,采用糖水偏好、旷场、高架十字迷宫、强迫游泳等试验评价各组小鼠抑郁样行为。 小鼠处死后,测量小鼠瘤体重量和体积;采用 ELISA 方法检测各组小鼠血清肿瘤标志物糖类抗原(CA199)、癌胚抗原(CEA)、血管内皮生长因子(VEGF)以及相关神经递质 5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、皮质酮(CORT)的含量;运用 HE 染色法观察小鼠肿瘤和海马组织病理学改变。 结果 S+T 组小鼠体重、摄食量显著降低,瘤体重量和体积明显增大,血清肿瘤标志物(CA199、CEA、VEGF)水平显著升高,快感和对新环境的探索欲望减弱,紧张和绝望行为显著增强,血清神经递质 5-HT 和 NE 水平显著降低,CORT 水平显著升高;另外肿瘤组织细胞排列松散,间质减少,病理性核分裂象增多,海马 CA3 区神经元细胞排列和形态紊乱,核内空泡化样改变明显。 结论 4T1 乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激诱导的乳腺癌合并抑郁小鼠模型出现了乳腺癌和抑郁症双重典型症状和生物学指标改变,可为乳腺癌合并抑郁实验研究提供较好的模型参考。

    • 余 奎,梁晓强,韩 冕,张静喆

      2024,34(3):45-50, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.006

      Abstract:

      目的 建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型,检测其病理生理指标,为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。 方法 选用 SPF 级雄性 SD 大鼠,采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建,评估大鼠造模前后的体重变化、死亡情况、肝功能主要指标变化及肝组织病理改变情况。 结果 造模后模型组大鼠体重明显降低;假手术组大鼠无死亡,肝功能无异常;模型组大鼠死亡 3只,模型组死亡率 12%,肝功能主要指标及肝病理呈现出明显的胆汁淤积及肝功能损伤性改变。 结论 本研究成功建立了大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型,该模型具有操作简便、损伤小、死亡率低、造模成功率高等优势,可为多种常见疾病的机制研究和药物研发提供标准化的实验动物模型。

    • 黄储涵,杨顶权,钟施怡,吴瑞英,杨知山,方慧娟,刘青武

      2024,34(3):51-56, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.007

      Abstract:

      目的 探讨散结祛瘢方对瘢痕疙瘩裸鼠模型的作用及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)的影响。 方法 将人手术切除后瘢痕疙瘩组织移植至 6 ~ 8 周龄健康 SPF 级 BALB/ C 雌性裸鼠背部皮下,建立瘢痕疙瘩裸鼠模型,随机分成散结祛瘢方组、积雪苷片组和对照组,每组 5 只,分别用散结祛瘢方、积雪草苷片及无菌纯水进行干预,连续灌胃 28 d 后剥取瘢痕疙瘩组织,进行称重、苏木精伊红( hematoxylin eosin, HE)染色、Masson 染色和免疫组化(TGF-β1)染色。 比较 3 组间治疗前后的瘢痕疙瘩重量差值的差异,比较 3 组间治疗后的胶原纤维、成纤维细胞数量及 TGF-β1 表达的差异。 结果 积雪草苷片组的瘢痕疙瘩重量差值大于对照组,且散结祛瘢方组与积雪草苷片组、对照组相比,散结祛瘢方组瘢痕疙瘩治疗前后重量差值最大(P<0. 01);散结祛瘢方组较对照组胶原纤维疏松、数量减少,成纤维细胞数量减少;散结祛瘢方组较对照组 TGF-β1 表达减少( P<0. 01)。 结论 散结祛瘢方对瘢痕疙瘩具有一定的治疗作用,其机制可能是通过减少瘢痕疙瘩组织中 TGF-β1 的表达,从而减少成纤维细胞的增殖与细胞外基质的合成。 该研究为临床用中药治疗瘢痕疙瘩提供了实验基础与理论依据。

    • 沈婷婷,李素云,李 亚,轩银霜,李景梅,李高峰,韩冰洋

      2024,34(3):57-67, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.008

      Abstract:

      目的 探究补肺健脾方(Bufei Jianpi formula,BJF)通过调控 IRS-1/ PI3K 信号轴对 COPD 大鼠骨骼肌线粒体损伤的影响。 方法 将 60 只 SPF 级 SD 大鼠随机分为空白(Control)组、COPD 稳定期模型(Model)组、氨茶碱(Am)组、补肺健脾方(BJF)组、吡格列酮(PIO)组以及补肺健脾方+吡格列酮(BJF+PIO)组,10 只/ 组。 采用烟熏加鼻腔滴菌(肺炎克雷伯杆菌)的方法建立 COPD 稳定期大鼠模型,自第 9 周开始给药至 20 周结束后取材,每周给予大鼠体重测量。 分别对肺组织和骨骼肌组织进行常规切片与 HE 染色,并于光镜下观察其相应的病理学改变。分别于第 0、8、20 周采用非束缚全身体积描记系统观察大鼠肺功能,包括 VT、PEF、EF50。 采用 qPCR 技术检测大鼠骨骼肌组织中 IRS-1、PI3K、PGC-1α 以及 Leptin mRNA 的表达。 采用 Western blot 技术检测大鼠骨骼肌组织中IRS-1、PI3K、AKT、p-AKT、PGC-1α、TFAM 和 Leptin 蛋白的表达。 结果 光镜观察显示与 Control 组比,Model 组肺病理可见肺泡间质以及肺支气管存有大量的炎性细胞浸润,部分肺泡壁出现断裂并融合形成气腔、纤维网被破坏等;与 Model 组比,用药治疗后各组肺泡壁的断裂以及纤维网的破坏均得到改善,支气管中炎性细胞浸润减轻,其中以BJF 组与 Am 组尤为明显。 用药治疗后各组骨骼肌病理与 Model 组比,可不同程度改善肌纤维之间排列间隙、萎缩与断裂,肌细胞胞质染色不均一等,其中以 BJF 组疗效较为显著。 与 Control 组比,Model 组 PEF、VT 和 EF50 第 8 周起显著降低(P<0. 01),BJF 组、BJF+PIO 组和 Am 组可以显著提高 PEF、EF50(P<0. 01)。 与 Control 组比,Model 组中 IRS-1、PGC-1α 和 PI3K mRNA 与蛋白表达水平显著降低(P<0. 05,P<0. 01),Leptin mRNA 与蛋白表达水平显著增高(P<0. 01);与 Model 组比,BJF 组 IRS-1、PGC-1α、PI3K mRNA 与蛋白表达水平显著增高(P<0. 05,P<0. 01);PIO 组 IRS-1 mRNA 表达水平显著增高(P<0. 01);BJF+PIO 组 PGC-1α mRNA 水平显著增高(P<0. 01),IRS-1、PI3K mRNA 与蛋白水平显著升高(P<0. 05,P<0. 01);Am 组中 PI3K mRNA 与蛋白表达水平显著增高(P<0. 01);4 个用药组中 Leptin mRNA 的表达水平均显著降低(P<0. 01), 除 Am 组外,其余 3 个用药组 Leptin 蛋白表达显著降低(P<0. 01);与 Control 组比,Model 组股四头肌组织中 TFAM、p-AKT 蛋白表达有明显的下降趋势,各治疗组的 TFAM、pAKT 蛋白表达均有升高趋势,但无显著性差异(P>0. 05)。 结论 补肺健脾方可通过调控 IRS-1/ PI3K 信号轴,改善骨骼肌线粒体的损伤,同时提高 PGC-1α 与线粒体转录因子 TFAM 的表达,增强线粒体的生物合成,从而减轻肺与骨骼肌组织的病理性损伤。

    • 倪建宇,白宁宁,刘贤莉,龚丽红,寿旗扬

      2024,34(3):68-74, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.009

      Abstract:

      目的 探讨三联造模法(氧嗪酸钾、次黄嘌呤以及 30%酵母膏饲料联用)能否在 ICR 背景小鼠上建立稳定可靠的高尿酸血症模型,并采用阳性药非布司他对该造模方法进行评价。 方法 采用氧嗪酸钾、次黄嘌呤和 30%酵母膏饲料,分别单用、两药或三药联用建立 ICR 小鼠高尿酸血症模型,检测血清尿酸、肌酐含量、黄嘌呤氧化酶(XOD)、尿酸氧化酶(UOX)活性,尿酸转运蛋白(URAT) 1、葡萄糖转运蛋白(Glut) 9、阴离子转运蛋白(OAT) 1、ATP 结合盒亚家族 G 成员(ABCG)2 mRNA 水平等指标评价高尿酸血症模型成功与否。 结果 氧嗪酸钾单用对ICR 小鼠血清尿酸水平没有明显改变,与 30%酵母膏饲料和次黄嘌呤分别联用组血尿酸有升高趋势但无显著差异,而三联给药组在 7 d 时显著提高(P<0. 01);同时,三联给药组 XOD 酶活性提升(P<0. 001),UOX 酶活性降低(P<0. 001);URAT1、Glut9 表达水平升高(P<0. 05,P<0. 001),OAT1、ABCG2 表达水平降低(P<0. 001);14 d 的动态监测发现三联给药诱导的 ICR 小鼠血尿酸水平在 7 d 时达到峰值。 此外,三联给药诱导的 ICR 小鼠高尿酸血症模型对阳性药物非布司他反应敏感,血尿酸水平显著下降(P<0. 001)。 结论 通过三联给药的方法<可以在 7 d 时稳定诱导 ICR 小鼠的高尿酸血症模型。

    • 马 娴,高 萍,刘真一,辛紫媛,靳晓飞,周晓红,高维娟

      2024,34(3):75-84,101, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.010

      Abstract:

      目的 探究补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)降低氧化应激水平保护脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia / reperfusion injury,CIRI)大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的机制。 方法 采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞再灌注(middle cerebral artery occlusion / reperfusion,MCAO/ R)模型,应用 PeriCam PSI 激光散斑血流成像系统检测脑血流量判定模型建立是否成功。 通过 Zea Longa 评分评价大鼠神经功能缺损情况;HE染色观察大鼠脑组织病理学改变;干湿重法检测脑水肿程度;伊文思蓝(Evans blue,EB)染色检测 BBB 通透性;透射电镜观察 BBB 超微结构改变;试剂盒检测氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)的含量及总超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫组织化学染色及 Western blot 检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平;免疫荧光双染及 Western blot 检测紧密连接蛋白( tight junction protein,TJP)中 Occludin、ZO-1、Claudin-5 蛋白的表达水平。 结果BYHWD 能够降低 MCAO/ R 大鼠神经功能缺损评分,减轻脑组织病理学损伤,减轻血脑屏障结构破坏,延长紧密连接结构致密区,减轻缺血侧大脑脑水肿情况,降低 BBB 通透性。 BYHWD 可以降低 ROS 与 MDA 水平,提高 SOD 活性,降低 MMP-9 表达水平,提高 Occludin、Claudin-5、ZO-1 蛋白表达水平。 结论 BYHWD 可以升高 BBB 紧密连接蛋白的表达水平,降低血脑屏障通透性,保护血脑屏障超微结构,减轻脑水肿,其机制可能与 BYHWD 抗氧化应激,抑制 MMP-9 的激活相关。

    • 宋艳梅,孙宁鑫,刘 晨,宋宜芬,李洪利,尹崇高

      2024,34(3):85-92, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.011

      Abstract:

      目的 通过研究 miR-379-5p 对小鼠乳腺癌 4T1 细胞增殖、侵袭和迁移的影响,为临床抑制乳腺癌增殖、侵袭和转移提供新的治疗靶点。 方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应( real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测 miR-379-5p 在质粒转染后 4T1 细胞中的表达情况;采用 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)细胞增殖实验与 Transwell 实验检测各组 4T1 细胞增殖能力与侵袭能力;然后通过伤口愈合实验来检测过表达以及敲低 miR-379-5p 对 4T1 细胞迁移能力的影响;利用 BABL/ c 小鼠建立乳腺癌小鼠移植瘤模型,观察 miR-379-5p 过表达后对体内肿瘤生长状况,肺转移灶数量及大小的影响。 结果EdU 结果显示,与对照组相比,敲低 miR-379-5p 能增强乳腺癌细胞的增殖能力,过表达 miR-379-5p 能够抑制乳腺癌细胞的增殖能力(P<0. 05);Transwell 与伤口愈合实验 结果显示,敲低 miR-379-5p 能够增强乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,过表达 miR-379-5p 显著抑制细胞的侵袭和迁移能力(P<0. 01)。 BABL/ c 小鼠体内成瘤实验显示,过表达 miR-379-5p 可显著减缓肿瘤的生长速度(P<0. 05),对肺转移有抑制作用(P<0. 01)。 结论 miR-379-5p 在乳腺癌中起到抑癌基因的作用,抑制小鼠乳腺癌 4T1 细胞的增殖、侵袭和迁移。

    • 刘 艺,李小雷,梁新培,王 娜,马 姗,张新平,贾汝福,张 素,李 贤

      2024,34(3):93-101, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.012

      Abstract:

      目的 通过比较两种不同的压力性损伤大鼠模型的建立方法,探索更合适的压力性损伤动物模型制备方法。 方法 将 18 只雄性 SD 大鼠随机分为对照组(n= 6)、模型 A 组(n= 6)和模型 B 组(n= 6)。 对照组对模拟造模部位脱毛后进行碘伏处理。 模型 A 组采用单纯深部组织异物植入法进行纵向加压;模型 B 组使用磁铁加压法进行横向加压,记录制备各组大鼠产生压力性损伤模型的全程时间及各分期时间,观察大鼠的一般情况,并进行成模率、死亡率、感染率的比较。 结果 肉眼观察到模型 A 组和模型 B 组均逐渐出现受压部位红肿、溃烂,出现渗血、渗液并伴有坏死现象。 模型 A 组与模型 B 组产生压力性损伤全程时间比较:两组之间差异有统计学意义(P<0. 05)。 模型 A 组与模型 B 组产生压力性损伤各期时间比较:Ⅰ期两组之间差异无统计学意义(P>0. 05);Ⅱ期两组之间差异有统计学意义(P<0. 05);Ⅲ期两组之间差异有统计学意义(P<0. 05);Ⅳ期两组之间差异有统计学意义(P<0. 05)。 对照组大鼠精神、运动评分与模型 A 组、模型 B 组比较有显著性差异(P<0. 05)。 模型 A 组大鼠与模型 B 组大鼠一般状态有明显区别,均出现毛色黯淡、活跃度下降的现象。 模型 A 组大鼠与模型 B 组成模率为100%。 模型 A 组死亡率、感染率高于模型 B 组,分别为 33. 34%、16. 70%。 结论 两种方式均可成功制备压力性损伤Ⅳ期模型,二者既有共性也有各自特点,磁铁加压法用时短,大鼠一般状态良好,死亡率和感染率低,适合短时间内干预性研究;单纯深部组织异物植入法用时长,需要大鼠有一定耐受性,感染率高,死亡率高,可运用于长期的观察类压力性损伤大鼠的研究。

    • 陈昱君,苏美洋伊,王清玄,高 苒

      2024,34(3):102-110, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.013

      Abstract:

      目的 应急科技攻关项目凸显“应急”和“攻关”两个关键,即如何高效地取得目标成果。 承接此类项目的机构需要制定合理的项目管理机制,为应急科技攻关项目的成功落实保驾护航。 本文旨在通过调查研究,调研目前医学领域应急科技攻关项目管理存在的问题,分析可改进的措施,提高科研管理的效率和质量。 方法本文结合作者实践经验,调查相关单位的科研管理运行现状,并就科管和科研人员最关心的管理环节开展问卷调研。 基于调查反映出来的问题,再组织专家座谈进行论证。 结果 调研发现(1)目前针对应急科技攻关项目的管理规范鲜有制定;(2)科研人员最关注的是行政审批和项目经费的问题;(3)科管人员最关注的是如何在合法合规的前提下,同时满足上级单位的管理以及科研人员的需求。 结论 应急科技攻关项目与常规科技项目相比有其特殊之处,在立项审批、经费使用、资源分配和安全等方面可以进行管理优化,本研究针对应急科技攻关项目管理提供创新方案,为各科研单位对此类项目的管理提供有益的经验和借鉴。

    • 梁钰莹,黄 泳,刘俊升,欧毅琳,李逸文,张 睿,李 政,张治楠

      2024,34(3):111-119, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.014

      Abstract:

      自噬是细胞内异常聚集蛋白和受损细胞器主要的降解和循环途径,维持着细胞正常的代谢平衡及物质更新。 自噬具有神经保护作用,可通过调节神经元和胶质细胞的稳态、发育和凋亡等生理过程影响神经系统的功能状态。 近年来大量研究表明,神经系统疾病与异常自噬密切相关,自噬的抑制或过度激活均能影响抑郁症、神经退行性疾病和精神分裂症的发生发展。 了解自噬在神经系统疾病中的作用机制对于预防与治疗相关疾病具有重要意义。 该文主要对当前自噬与上述神经系统疾病的研究进展进行综述,为以上疾病的进一步研究提供参考。

    • 张千遥,程 浩,黄依桢,腾喊信,张 越,张瑞林

      2024,34(3):120-126, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.015

      Abstract:

      大麻素的精神活性是众所周知的,关于大麻素在全世界是否可以用于治疗也一直存在争议。 而 Δ9-四氢大麻酚(Δ9-tetrahydrocannabinol,THC)作为大麻中最主要的精神活性物质,它的神经作用机制直到最近才被发现,但其作用机理仍未完全明确。 血脑屏障( blood-brain barrier,BBB)是保护大脑的关键屏障结构,也是外来物质入脑的第一道防线,THC 的亲脂性及与内源性大麻素系统的相互作用使其更加容易对 BBB 产生作用。 本文综述了 THC 的神经毒理作用,聚焦于 THC 对 BBB 的作用与机制,为阐明 THC 的神经作用机制提供理论依据。

    • 朱美萍,张世忠

      2024,34(3):127-132, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.016

      Abstract:

      瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道是一类非选择性阳离子通道。 近年来研究发现TRP 通道与多种疾病有关,其中关于 TRP 通道通过线粒体功能调控参与相关心血管疾病机制的研究,正成为心血管疾病机制研究的热点之一。 目前相关的文献主要集中在 TRPV、TRPM 和 TRPC。 本文主要就上述 3 种 TRP 通道在线粒体功能调节中的作用及其与心血管疾病的关系研究进展进行综述。

    • 李 超,李继安,高振安,申明宇,蒲菁菁,王 萌

      2024,34(3):133-141, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.017

      Abstract:

      谷氨酸是中枢神经系统中主要的兴奋性神经递质,也是潜在的神经毒素。 在抑郁症发生发展过程中存在海马区谷氨酸浓度升高的现象,谷氨酸发生堆积时,将对神经元和脑组织造成严重损伤,加重抑郁状态。 因此谷氨酸堆积可能是造成抑郁症的重要机制。 星形胶质细胞、谷氨酸转运体及谷氨酸受体对谷氨酸的浓度起着重要的调控作用。 本文综述了中医药疗法通过调控星形胶质细胞、谷氨酸转运体、谷氨酸受体影响谷氨酸,进而治疗抑郁症的作用机制,为探究中医药治疗抑郁症提供新的思路。

    • 张 帆,田春雨,王景存,喇孝瑾,付茜茹,李 洁,付文浩

      2024,34(3):142-148, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.018

      Abstract:

      巨噬细胞凋亡抑制因子(apoptosis inhibitor of macrophage,AIM),是清道夫受体富含半胱氨酸残基超家族(scavenger receptor cysteine rich-super family,SRCR-SF)B 组的成员之一。 AIM 为巨噬细胞分泌的一种可溶性蛋白,该蛋白的表达受肝 X 受体(liver X receptor,LXR)控制,且在机体的免疫反应中起重要作用。 AIM 作为巨噬细胞的一种分泌蛋白,发挥着广泛的作用,不仅对巨噬细胞的凋亡具有抑制作用,并且可参与调控巨噬细胞极化。 还有相关研究发现,AIM 参与炎症、肥胖、动脉粥样硬化和癌症等多种生理、病理过程;可以作为结核病和肝硬化等疾病的生物诊断标志物;可以通过抑制脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性从而促进脂肪细胞的脂解,在调节脂质内稳态平衡、脂质代谢与自身免疫疾病中发挥着重要的作用。 该文论述了 AIM 的分子特征及其在炎症反应和脂质代谢等相关疾病方面的作用,展示 AIM 的多种功能特点,为相关的医学研究提供依据。

    • 杨智惠,胡 扬,宗 政,孙向明,宋 辉,陈鹰翔,徐蓓蕾,张文君,陈鲁宁,李文兰

      2024,34(3):149-160, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.019

      Abstract:

      卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)又称“卵巢功能低下”,其发病率高达 1% ~ 5%,近年来还呈现不断上升的趋势,已经严重影响女性的身心健康及生活质量。 目前,关于 POI 的发病原因及机制尚不明确,模型构建方法与应用也较混乱,且绝大多数模型在针对性、稳定性等方面存在一定不足,这也极大的限制了 POI 的相关研究及其临床诊断和治疗。 因此本文对 POI 的病因病机与 POI 动物模型的构建进行综述和讨论,以期为 POI 的病因病机研究及模型的选择和构建提供更多参考。

    • 孙可心,肖雨倩,万 俊,陈淑颖,陈丽敏,王 岩,白艳杰

      2024,34(3):161-171, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.020

      Abstract:

      脑卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)是脑卒中后常见并发症之一,对卒中患者的生活质量影响较大,但发病机制尚未能完全解释清楚。 越来越多的证据表明,程序性细胞死亡( programmed cell death,PCD)机制与 PSCI 有关,包括细胞凋亡、坏死性凋亡、细胞焦亡、泛凋亡、PARP-1 依赖性细胞死亡和铁死亡等。 因此,清楚了解各种 PCD 机制及其与 PSCI 的关系,阐明 PCD 在疾病发病机制中的作用至关重要。 文章综述了与 PSCI 相关的 6 种 PCD 途径,总结其在 PSCI 中的作用机制,并阐述了不同途径之间可能存在的串扰,以期为临床靶向 PCD 途径的调节因子来治疗 PSCI 提供资料依据。

    • 孙豪杰,朱俊雷,李 伟,王锁刚

      2024,34(3):172-178, DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.03.021

      Abstract:

      细胞焦亡是半胱氨酸蛋白酶介导的以线粒体参与、炎性小体组装、质膜穿孔、炎性释放为特征的细胞程序性死亡。 作为介导机体炎症反应的重要机制,细胞焦亡在肾缺血再灌注损伤( renal ischemia-reperfusion injury, RIRI)中发挥了关键作用。 本文就近年来细胞焦亡的分子机制、细胞焦亡在 RIRI 中的作用机制和治疗药物的研究进展进行综述,旨在为 RIRI 的早期治疗提供理论参考

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    2024年第34卷第3期
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    • 铁死亡在脓毒症急性肺损伤中的研究进展

      史阳琳, 杨建雅, 常晴晴, 王倩倩, 王明航, 李素云

      Abstract:

      脓毒症是由于宿主对感染的反应失调而导致的危及生命的器官功能障碍,死亡率极高,其是导致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的主要危险因素,然而脓毒症ALI的病理生理学和发病机制尚不完全清楚,有效药物极为有限。因此,当务之急是挖掘脓毒症ALI的发病机制,并试图发现有效的干预措施,以改善脓毒症ALI患者的预后。近年来,铁死亡被认为与脓毒症ALI的病理生理过程密切相关,抑制相关细胞铁死亡可有效缓疾病的发生发展。本文对靶向相关细胞铁死亡的治疗策略进行综述,以期为脓毒症ALI铁死亡相关研究提供借鉴并为脓毒症ALI的治疗提供新的视角。

      • 1
    • 海马ICAM5对小鼠饮酒行为的影响及机制研究

      胡佳佳, 杨转芳, 孙喜喆, 袁娟娟, 程燕, 张宇, 殷丽天

      Abstract:

      【摘要】 目的 分析小鼠海马组织中ICAM5对小鼠饮酒偏好、运动能力等行为的影响,并分析其可能的作用机制。 方法 选取8周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机将小鼠分为对照组和饮酒组,建立双瓶饮酒模型。检测ICAM5在小鼠内侧前额叶皮层、海马及杏仁核脑区的表达改变。构建ICAM5过表达腺相关病毒,通过脑立体定位方法注射至海马脑区。通过免疫荧光技术和Western blot检测海马组织ICAM5的蛋白表达水平。通过旷场实验、条件位置偏爱实验和翻正反射实验,观察小鼠对酒精的偏好性以及ICAM5对小鼠行为的影响。通过Western blot检测分析树突棘F-actin/G-actin比值,高尔基染色方法检测树突棘形态。 结果 在双瓶饮酒模型中,与对照饮水组相比,酒精组小鼠海马脑区ICAM5的表达显著下降。结果显示,通过荧光显微镜观察到ICAM5在小鼠海马脑区特异性表达。在旷场实验中,AAV-ICAM5组小鼠较对照组小鼠在旷场中心位置停留时间(P < 0.01)和运动距离明显增加(P < 0.001)。在CPP实验中,测试期AAV-ICAM5小鼠在伴药箱的停留时间较对照组小鼠明显降低(P < 0.001)。在LORR实验中,过表达ICAM5可以明显降低小鼠镇静潜伏期(P < 0.01),但同时显著缩短镇静作用的持续时间(P < 0.001)。与对照组相比,饮酒后小鼠海马F-actin/G-actin比值显著升高(P < 0.01),而ICAM5过表达后这一比值显著降低(P < 0.001)。与对照组相比,饮酒后小鼠海马CA1区树突棘密度增加(P < 0.001),但是AAV-ICAM5+EtOH(ethanol)组树突棘密度显著降低(P < 0.01)。 结论 海马ICAM5可能通过调节细胞骨架蛋白的表达,形成树突棘结构可塑性改变,最终引起小鼠饮酒和运动行为的改变。

      • 1
    • 结合系统药理学与代谢组学探究黄芩素治疗高尿酸血症的作用机制

      梁景珍, 高映杰, 叶文倩, 卫兵艳, 陈朝阳, 杨帆

      Abstract:

      目的 探究黄芩素治疗高尿酸血症的作用及机制。方法 采用酵母膏联合氧嗪酸钾的方法构建高尿酸血症小鼠模型。通过生化指标、病理改变、非靶代谢组学及网络药理学技术深入研究黄芩素治疗高尿酸血症的作用及潜在机制。结果 黄芩素能降低尿酸、肌酐和尿素氮的含量,减轻肾组织炎性损伤,上调尿酸排泄蛋白表达水平,下调尿酸重吸收蛋白表达水平。网络药理学筛选出BCL2、SIRT1和XDH等9个药物疾病相关靶点。代谢组学分析筛选出烟酸和烟酰胺代谢、咖啡因代谢和嘌呤代谢等6条关键代谢通路。结论 黄芩素可治疗高尿酸血症,减轻肾损伤,其作用机制可能与SIRT1和喹啉酸共调控的烟酸和烟酰胺代谢等代谢途径有关。

      • 1
    • 基因编辑技术在免疫缺陷动物模型研究中的应用进展

      马云辉, 王晓堂, 高继萍, 宋国华

      Abstract:

      免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领域的发展。基因编辑技术主要包括HEs、ZFNs、TALENs与CRISPR/Cas9系统。目前,研究者已利用该技术建立了多种类型的免疫缺陷动物模型,各有其优势和局限性。近年来,大量研究证实人源化免疫缺陷动物模型能够精准模拟癌细胞、药物以及免疫系统在人体内的作用,可以更好地模拟人类疾病,广泛用于研究人类免疫生物学及人类复杂疾病的潜在机制。本文对利用基因编辑技术构建免疫缺陷动物模型的研究应用进展进行综述,对基因编辑技术在免疫缺陷动物模型制备中存在的问题及优化策略深入探讨,并对其未来发展前景进行了展望,以期为研究者选用和建立免疫缺陷动物模型提供参考。

      • 1
    • 极端动物保护主义与实验动物福利伦理

      田雪梅, 久保幸子, 吴英杰, 苏涛

      Abstract:

      实验动物作为“活的试剂”,推动了生命科学和医学的飞速发展,其福利伦理问题日益受到社会各界的关注。实验动物福利伦理不仅是动物保护主义的重要组成部分,也对于保障实验动物的权益、促进科学研究的合理性与道德性具有重要意义。然而,在动物保护主义的演变过程中,极端动物保护主义作为一种偏激的观点和理论逐渐浮现。本文旨在从实验动物福利伦理的视角出发,总结动物保护主义的主要理论和实验动物福利伦理的发展历程;分析极端动物保护主义的主要问题;并针对我国实验动物福利伦理的现状提出建议,以期为我国的实验动物福利伦理实践和制度建设提供参考。

      • 1
    • 两种肝毒性化学物诱导的肝纤维化小鼠模型转录组学的比较研究

      闫阮玉, 吴洪雨, 黄恺, 孙鑫, 薛静波, 陶艳艳, 刘成海, 彭渊

      Abstract:

      目的 比较四氯化碳(CCl4)和3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢可力丁(DDC)两种肝毒性化学物诱导的肝纤维化小鼠模型的转录组学差异,为使用肝纤维化小鼠模型的研究提供参考依据。 方法 分别采用10%CCl4腹腔注射和0.1%DDC饮食喂养诱导小鼠肝纤维化模型。造模4周后,检测血清ALT、AST、TBil水平;HE染色观察肝内炎症浸润情况;天狼猩红染色观察肝脏胶原沉积情况;Jamall's法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;Elisa检测肝组织上清TNF-α、IL-6和IL-1β含量。提取小鼠总RNA进行测序(RNA-Seq),使用R软件分析2种肝纤维化模型的差异基因,并进行GO和KEGG富集分析,并验证差异显著的基因。结果 与正常小鼠相比,CCl4染毒小鼠和 DDC饮食小鼠血清ALT、AST、TBil水平和均肝组织TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著升高,血清Alb水平下降。病理染色提示CCl4染毒小鼠肝组织结构破坏,中央静脉周围大量肝细胞玻璃样变及坏死;DDC饮食小鼠肝内卟啉沉积,大量炎症细胞在汇管区和胆管周围浸润;两种模型小鼠肝内均有不同程度胶原沉积。通过筛选条件(|logFC|>2倍且P<0.05)获得CCl4染毒模型、DDC饮食模型的差异基因分别为1820、2373个,其中上调基因分别为1302、1978个,下调基因分别为518、395个。GO注释发现2种模型在分子功能(MF)、生物学过程(BP)、细胞成分(CC)等方面具有重要功能,KEGG分析发现CCl4染毒模型、DDC饮食模型分别激活22、29条信号通路,其中细胞外基质受体的相互作用、细胞周期、蛋白的消化与吸收、焦点粘附、PI3K-Akt 等16条信号通路在2种模型中均显著富集(P<0.05)。聚类分析发现在2种模型中均明显下调基因包括Mup11、Mup15、Mup17、Mup1等,采用RT-qPCR得以证实(P<0.05)。结论 本研究报道了CCl4染毒和DDC饮食两种肝纤维化模型的RNA-Seq转录组学特点并进行比较,观察基因表达的场所、基因表达所调节的通路等方面,为后续肝纤维化的发病机制和治疗研究的动物模型的选择提供参考依据。

      • 1
    • 蠲哮汤调节三型固有淋巴样细胞治疗肥胖哮喘小鼠机制

      田敏萍, 张清源, 向双娣, 陈玲玲, 孙朋, 薛汉荣

      Abstract:

      摘要:目的:探讨蠲哮汤调节三型固有淋巴样细胞(ILC3)治疗肥胖型哮喘的可能作用机制。方法:60只BALB/C小鼠随机分为正常组、模型组(60%高脂饲料+OVA)、蠲哮汤组(低、中、高剂量分别为8.5、17、34 g?kg-1),醋酸地塞米松组(1 mg?kg-1),每组10只。除空白组,其余组高脂饲料喂养12周后,OVA致敏及雾化激发建立肥胖哮喘模型。首次雾化起,蠲哮汤低、中、高剂量组及地塞米松组给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,持续7d。观察分析小鼠的一般状态及肥胖哮喘典型症状改变,HE染色观察肺部病理改变,全自动生化仪检测血脂四项和肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞分类计数,ELISA检测BALF和血清IgE水平,肺组织中IL-1β、IL-13、CCL17水平,流式细胞术分析肺和外周血中IL-17A+ILC3、IL-22+ILC3水平,Western blot 检测肺组织中P-STAT3蛋白表达水平。结果:蠲哮汤中、高剂量组小鼠的一般状态和典型肥胖哮喘症状较模型组得到明显改善。模型组小鼠气道炎性细胞浸润,气道壁增厚,经地塞米松和蠲哮汤中、高剂量干预后小鼠肺部炎症情况明显改善,其中高剂量效果更明显。模型组小鼠肺组织中IL-1β、IL-17A+ILC3、IL-13、CCL17水平高于正常组(p<0.05),IL-22+ILC3比例和P-STAT3表达水平明显低于正常组(p <0.01,p<0.05),经蠲哮汤中、高剂量干预后IL-1β、IL-17A+ILC3、IL-13、CCL17水平显著下降(p<0.05, p<0.01,p<0.001),IL-22+ILC3比例和P-STAT3表达明显增加(p<0.05,p<0.01,p<0.001)。结论:蠲哮汤减轻肥胖哮喘小鼠肺部炎症和过敏反应,改善机体炎症环境,其机制可能与调节ILC3分泌细胞因子功能有关。

      • 1
    • Adra1a调节LPS诱导的Lbp-/-小鼠原代肝细胞炎症反应

      米传靓, 付彬, 李思迪, 陈志达, 郭中坤, 王可洲

      Abstract:

      目的 探究Adra1a调节LPS诱导的LBP敲除小鼠(Lbp-/-)原代肝细胞炎症反应。方法 利用二步灌流法提取WT型、Lbp-/-型小鼠原代肝细胞,构建LPS诱发的原代肝细胞炎症模型;采用加入抑制剂哌唑嗪、转染siRNA来抑制Lbp-/-小鼠原代肝细胞Adra1a的表达;抑制剂法将原代肝细胞分为对照组(空白对照)、LPS组(LPS刺激12 h)、抑制剂哌唑嗪组(哌唑嗪干预1 h后加入LPS刺激12 h),转染siRNA的方法将原代肝细胞分为四组分别是对照组(空白对照)、LPS组(LPS刺激12 h)、阴性对照组(si-NC干扰12 h后再加入LPS刺激12 h)、干扰组(si-adra1a干扰12 h后再加入LPS刺激12 h);WT型小鼠原代肝细胞则分为两组分别为对照组(空白对照)、LPS组(LPS刺激12 h)。本研究以WT型、Lbp-/-型小鼠原代肝细胞为研究对象利用Western blot方法验证Adra1a在LPS刺激下的变化情况,采用CCK8,qPCR、Western blot等实验方法验证哌唑嗪及si-adra1a对Lbp-/-小鼠的原代肝细胞的炎症及存活率的改善情况。结果 在LPS刺激下Lbp-/-小鼠的原代肝细胞Adra1a蛋白表达显著升高(P < 0.01),而野生型没有显著变化;抑制剂哌唑嗪组及干扰组的细胞存活率显著升高(P < 0.01;P < 0.05);抑制剂哌唑嗪组及干扰组的TNF-α、IL-1β炎症因子表达情况显著降低(P < 0.01),与细胞损伤及炎症相关的蛋白p-p38、p-ERK、p-JNK的表达量也显著降低(P < 0.01)。结论 LPS刺激Lbp-/-小鼠原代肝细胞后Adra1a表达上调、炎症信号因子上调,使用哌唑嗪和si-adra1a特异性下调Adra1a表达后显著性降低LPS诱导的Lbp-/-小鼠原代肝细胞炎症因子,表明LBP敲除后Adra1a参与LPS诱导炎症的调节。

      • 1
    • 基于NLRP3研究放射对小鼠涎腺组织损伤的影响

      吴玉琪, 黄桂林, 肖丽君, 张敏, 张霓霓

      Abstract:

      目的:研究放射对小鼠涎腺组织形态、功能及NLRP3表达的影响,为修复放射性涎腺组织损伤提供新思路。方法:建立小鼠放射性下颌下腺损伤模型,记录饮水情况,于放射后1、3、7、14天进行唾液流率检测,HE染色观察下颌下腺损伤情况,免疫组织化学法及real-time PCR检测NLRP3及Caspase-1在小鼠放射性下颌下腺损伤中的表达情况。结果:随着时间的累积,放射组小鼠饮水量逐渐增多,唾液流率减少,下颌下腺中炎症细胞不断增多,腺泡细胞逐渐出现核固缩及空泡化等病变;在放射后的7和14天,放射组NLRP3和Caspase-1蛋白及基因表达水平均明显高于正常组(P<0.05)。结论:辐射可诱导小鼠下颌下腺组织损伤,并激活NLRP3炎症体促使其表达量增加。

      • 1
    • 1470nm半导体激光治疗仪对犬前列腺切除术的有效性研究

      黄恒, 潘永明, 黄俊杰, 张辉, 郁晨, 陈民利, 徐庆丰, 郑国

      Abstract:

      目的 评估1470 nm半导体激光治疗仪(简称:科瑞达治疗仪)对犬前列腺切除术的有效性。方法 选取成年雄性Beagle犬28只,随机分为3组,即假手术组3只、试验组15只和同类对照组10只;其中试验组又分为120 W/50 W、150 W/50 W、160 W/50 W的汽化切割/凝固止血3个小组;同类对照组又分为120 W/50 W、150 W/50 W的汽化切割/凝固止血2个小组;每小组各5只。试验组和同类对照组均在电切镜下经膀胱颈入口行犬前列腺切除术。术中观察产品的操作适配性和有效性;术后观察犬的一般体征,以及在术前、术后即刻、3 d、7 d、28 d时取血测定血液生化和血液学指标;分别在术后1 h、4周时,行超声和电切镜下观察尿道前列腺部情况,并取前列腺组织进行H&E染色分析术后1 h的凝固层厚度和4周尿道上皮修复情况。结果 术中,试验品和同类对照品进行犬前列腺切除术的操作性能良好,具有较好的汽化切割和凝固止血性能;术后对犬的一般体征、血液学和血液生化指标均未见明显影响;且超声显示术后即刻均可见尿道扩张,尿道上皮回声略有增强;4周时,可见前列腺组织实质为略低回声,内部为均匀分布细小点状回声,包膜呈线状高回声,与假手术组一致。测量分析显示,试验组和同类对照组汽化切割前列腺组织重量约为0.91~1.33 g,切除比例达17.11~20.27 %;且随汽化切割功率的增加,激光发射时间逐渐减少,而汽化切割速度和效能均有所增加;但试验组与同类对照组比较均未见明显差异(P>0.05)。电切镜下可见试验组和同类对照组在术后1h时前列腺尿道部创面呈烧灼样改变,创面和正常尿路上皮分界明显;4周时,前列腺部尿路上皮已修复平整,和周围正常尿路上皮分界较模糊。同样,病理观察也显示,术后1 h时试验组和同类对照组均可见前列腺尿道口损伤明显,创面表面有少量碳化和凝固性坏死,少量炎性细胞聚集,凝固层厚度约在0.4 mm左右;术后4周时,假手术组前列腺尿道部形态未见异常,试验组和同类对照组均可见新生上皮基本覆盖创面,厚度较均匀,无凝固性坏死组织附在创面上,周围仍有轻度炎性反应,成纤维细胞增生明显,周围前列腺可见间质和上皮细胞增生,部分可见鳞状化生;前列腺包膜完好,周围神经血管形态未见异常。结论 科瑞达治疗仪对Beagle犬前列腺切除术是有效的,具有较好的汽化切割和凝固止血性能,且术后的各项生理指标较假手术组无显著差异。

      • 1
    • 中医药院校实验动物学的特色创新教育

      章敏, 刘雁云, 顾欣, 田代志, 杨阳

      Abstract:

      实验动物学在医学生教育及培养过程中有着举足轻重的地位。中医药院校实验动物学教学除紧跟实验动物学学科发展,还应加强中医特色教育、特色创新教育,根植于提高中医传统文化素养,着眼于培养学生创新和拓展思维。通过传承教育、伦理教育、迁移教育、探讨教育、启发教育及延展教育等在日常教学中的体现,结合实验动物学的中医渊源、中医药研究的动物福利、动物实验中的中医理论、动物模型的中医考量、实验动物的种属选择以及新发展方向的指导引领等具体内容,旨在培养学生的科研创新能力和实践动手能力。着力于更优质的中医特色创新教育,为祖国医学的发展提供坚实保障,为传统医学的传承培养新型人才。

      • 1
    • 不同时间急性睡眠剥夺对大鼠行为学及突触生物标志物表达的影响

      张士滨, 王璐, 王储, 郭鹏程, 闫旭升, 霍东升, 杨占君, 王艳国, 贾建新

      Abstract:

      目的:探究不同时间急性睡眠剥夺对大鼠行为学及突触蛋白表达的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠70只随机分为7组,即空白对照组(Control)、睡眠剥夺24 h组、48 h组、72 h组、96 h组、120 h组、144 h组,采用改良多平台水环境睡眠剥夺法建立大鼠睡眠剥夺模型,通过Morris水迷宫检测空间学习记忆能力,旷场实验检测大鼠焦虑状况,Nissl染色观察大鼠海马神经元形态、数量的改变,蛋白免疫印迹、Real-time PCR实验分别测定大鼠突触相关分子标志物:突触素(synaptophysin,SYN)、突触后膜致密物质95(post-synaptic density protein-95,PSD-95)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达。结果:与Control组比较,随着睡眠剥夺时间的延长,大鼠的站立次数和修饰行为次数均显著增加(P<0.05);120 h、144 h组大鼠的逃避潜伏期与上台前路程均显著增加(P<0.05),而穿越平台次数和目标象限时间百分比均显著下降(P<0.01),且与睡眠剥夺时间呈负相关;BDNF、SYN及PSD-95蛋白/基因的表达量均随睡眠剥夺时间的延长呈明显下降趋势(P<0.01),且与睡眠剥夺时间呈负相关。结论:随着睡眠剥夺时间的增加,模型大鼠空间学习记忆损害与焦虑情绪逐渐加重,其可能与突触相关分子标志物表达减少有关。

      • 1
    • 基于蛋白质组学技术探讨桦褐孔菌提取物治疗克罗恩病的作用机制

      韩立华, 赵晓茹, 彭莉莉, 郝渺, 原红霞

      Abstract:

      目的 采用蛋白质组学技术研究桦褐孔菌提取物治疗克罗恩病的作用机制。 方法 采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导建立克罗恩病(CD)模型。48只SD雄性大鼠,随机分为对照组、模型组、桦褐孔菌提取物低(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、高(800 mg/kg)剂量组、美沙拉嗪组(225 mg/kg)。药物干预一周后,进行疾病活动指数(DAI)评分和结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化;ELISA检测大鼠血液中IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子水平。取对照组、模型组及桦褐孔菌提取物高剂量组的结肠组织,采用非标记蛋白质组学分析鉴定各组大鼠结肠组织中的蛋白,并对其进行生物信息学分析。最后采用WB和RT-PCR对关键蛋白进行验证。 结果 与模型组相比,桦褐孔菌提取物中、高剂量组的DAI、CMDI及HE染色评分显著降低,其血液中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量也显著降低。蛋白质组学显示,桦褐孔菌提取物高剂量组与模型组间有199个差异蛋白(DEPs),其中63个DEPs与CD相关,生物信息学结果显示63个DEPs要涉及NOD样受体信号通路、钙信号通路和坏死性凋亡等多条通路。WB和RT-PCR检测各组大鼠结肠组织中Vdac1和Trpv2的蛋白和mRNA水平,与蛋白质组学结果一致。 结论 桦褐孔菌提取物可能通过干预Vdac1、Trpv2的表达,调节NOD样受体信号通路、钙信号通路和坏死性凋亡,从而达到治疗CD的效果。

      • 1
    • 中医药治疗乳腺癌相关抑郁发展的机制研究进展

      彭梦薇, 吴耀松, 刘高源, 匡洛逸, 罗紫龙, 陈玉龙, 刘燕

      Abstract:

      乳腺癌诊断与治疗过程中出现以抑郁为主的病理性情绪变化,临床上称之为乳腺癌相关抑郁。大量的流行病学和临床研究已证实乳腺癌相关抑郁病情复杂且治疗难度大、预后差。现有临床治法大多是乳腺癌术后化疗服用抗抑郁药物,将乳腺癌和抑郁症作为两个独立的疾病进行治疗,存在效率低、不良反应强等诸多缺陷。而中医药凭借其多成分同时调控多通路,多靶点显著优势,在防治乳腺癌相关抑郁的方面具有独特价值。本文主要是从神经系统紊乱、炎症免疫反应、肠道菌群失调等方面对乳腺癌相关抑郁机制,以及中医药的治疗机制进行综述,以期对中医药治疗乳腺癌相关抑郁临床应用和研究提供一定的参考。

      • 1
    • 基于免疫炎症-肠道微生态探讨清热解毒方对痛风小鼠治疗作用的研究

      何宪顺, 林锟, 韦雨柔, 田佳庆, 江禹来, 魏腾飞, 林天烨, 何敏聪, 魏秋实

      Abstract:

      目的 探究清热解毒方对痛风小鼠抗炎作用及对肠道菌群的影响。方法 将40只7-8周龄、体质量20-22 g的SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组(CON组)、模型组(MOD组)、别嘌醇组(ALLO组)、清热解毒方组(QRJD组),第1-28天每日早上CON组ig 10 g/0.1 ml羧甲基纤维素,其余各组均ig氧嗪酸钾(500 mg/kg)+酵母膏(10 g/kg)混悬液制备高尿酸血症小鼠模型;第29天在异氟烷麻醉下,往CON组小鼠左踝关节注射200 ul无菌羧甲基纤维素,其余各组小鼠左踝关节注射等量尿酸钠溶液制备痛风性关节炎模型,同时各组每日灌服相应药物进行治疗;第35天取材,取材小鼠禁食不禁水6 h,检测血尿酸、血肌酐、尿素氮等血液指标,踝关节苏木精-伊红染色、踝关节番红固绿染色;踝关节免疫组化检测白细胞介素-10(Interleukin 10,IL-10)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)抗炎指标;收集小鼠盲肠内容物,采用16S rDNA 高通量测序法检测肠道菌群变化。结果 ①用药治疗7天后,与MOD组相比,QRJD组能有效降低疾病模型小鼠血尿酸(P<0.001)、肌酐(P<0.001)、尿素氮(P<0.05)浓度,有效的保护肾功能。②病理结果提示,与MOD组相比,苏木精-伊红染色发现QRJD组治疗后,关节滑膜增生有所减少,炎症细胞浸润得到减轻;番红-固绿发现中药复方软骨排列较前有序,软骨破坏较模型组减轻,基质未见失染。③踝关节免疫组化结果提示:CON组、MOD组IL-10、TGF-β1未见明显升高;与MOD组相比,QRJD组的IL-10、TGF-β1表达升高(P<0.05)。④肠道菌群交互关系、多样性上,与CON组相比,MOD组特有的OTUs数目增加75个,而QRJD能减少MOD特有的OTUs数量,更接近CON组;四组间的 α多样性未见明显差异(P>0.05),而在β多样性发现QRJD组的菌群组成更趋向于CON组水平(P=0.001)。⑤肠道菌群差异分析结果显示:与CON组相比,MOD组Ruminococcaceae spp.、Dubosiella sp.、Tyzzerella sp.、Ileibacterium sp.和Bacteroidales_spp.菌等丰度增高(P<0.05);与MOD组对比,QRJD组Lactobacillus sp.、Ligilactobacillus sp.和Bacteroides sp.等丰度上升(P<0.05),且肠道菌群相互作用图上显示菌与菌之间存在相互作用。⑥肠道菌群与肾功能、抗炎因子相关性分析中,Dubosiella sp.、Tyzzerella sp.、Bacteroidales spp.菌群的相对丰度与SUA、SCR呈显著正相关(P < 0.05);而Lactobacillus sp.、Ligilactobacillus sp.、Mitochondria spp.与IL-10、TGF-β1抗炎因子呈正相关,其中与TGF-β1较为显著(P < 0.05)。⑦COG功能预测提示QRJD组功能集中于无机离子转运和代谢、碳水化合物运输与代谢等。结论 QRJD能有效调节免疫炎症-肠道微生态紊乱从而治疗痛风疾病,推测其防治痛风的机制是调节肠道菌群多样性以及调控Ruminococcaceae spp.、Dubosiella sp、Lactobacillus sp.等差异菌群丰度实现治疗痛风的目的。

      • 1
    • NF-κB信号通路介导巨噬细胞参与心肌缺血再灌注损伤的研究进展

      李世龙, 王贺

      Abstract:

      心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)已经成为影响心血管疾病患者临床转归的最严重并发症之一,巨噬细胞的免疫炎症反应与MIRI的发生发展密切相关。目前已有多项研究表明,通过影响巨噬细胞的极化和炎症状态、焦亡、浸润等功能,NF-κB信号通路可参与MIRI调节,是MIRI治疗的潜在靶点。因此,本文将对巨噬细胞功能与MIRI调节作用之间的NF-κB信号通路研究进展进行综述。

      • 1
    • 神经母细胞瘤肝及肾上腺移植模型比较

      陈红霞, 谭志刚, 林惠然, 冯露平, 郑楚雅, 廖文峰, 曾如凤, 刘锦信, 卓振建

      Abstract:

      【摘要】目的 建立神经母细胞瘤( Neuroblastoma,NB )肝脏移植模型,并与肾上腺原位移植模型进行比较,探索模型的特征。方法 采用微量注射针将含有5×105(SK-N-SH)细胞溶液沿肝叶长轴种植于小鼠肝左叶,造模结束后检测肿瘤的生长、转移情况、相关基因表达及肿瘤组织病理学变化。结果 小鼠接种肿瘤细胞21 d后成瘤率达100%,肿瘤的生长、转移、相关基因表达及病理特征明显。结论 本文通过更为简单的手术造模方法,成功构建了一种神经母细胞瘤肝脏移植模型,为NB研究者今后科学实验提供了更多理想的模型选择。

      • 1
    • 两种方法清除大鼠子宫内膜巨噬细胞的比较研究

      夏良君, 崔础婷, 李军威, 程洁, 夏有兵

      Abstract:

      目的 通过比较氯膦酸二钠脂质体不同给药途径的作用差异,探索更有效的大鼠子宫内膜巨噬细胞清除方法。方法 雌性8周龄SD大鼠随机分为单侧对照组(左侧宫腔注射磷酸缓冲盐脂质体100 μL)、单侧清除组(右侧宫腔注射氯膦酸二钠脂质体100 μL)、双侧对照组(双侧宫腔注射磷酸缓冲盐脂质体100 μL)、双侧清除组(双侧宫腔注射氯膦酸二钠脂质体100 μL)、全身对照组(尾静脉注射磷酸缓冲盐脂质体500 μL)、全身清除组(尾静脉注射氯膦酸二钠脂质体500 μL)。注射后48h,获取组织样本。采用HE染色观察子宫、卵巢组织形态结构,免疫组化观察子宫、卵巢组织中巨噬细胞阳性表达,流式细胞术检测子宫、卵巢组织中巨噬细胞数量的变化。结果 各组大鼠子宫、卵巢组织结构与形态并无明显差异。免疫组化法结果显示:与对照组相比,单侧及双侧清除组中子宫巨噬细胞阳性表达明显降低(P<0.001),卵巢巨噬细胞阳性表达无影响(P>0.05),全身清除组子宫和卵巢组织中巨噬细胞阳性表达均减少(P<0.01,P<0.01);与单侧及双侧清除组相比,全身清除对卵巢组织中巨噬细胞阳性表达的影响更大(P<0.05)。流式细胞术检测显示,与对照组相比,各清除组均能有效降低子宫组织中巨噬细胞百分比(P<0.001,P<0.001,P<0.05),与全身清除组相比,单侧及双侧清除组子宫内膜巨噬细胞清除效果更好(P<0.05,P<0.05);各清除组卵巢组织中巨噬细胞数量与对照组相比均有所下降,其中全身清除组巨噬细胞数目减少最明显(P<0.05),单侧及双侧清除组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 局部宫腔注射氯膦酸二钠脂质体清除子宫巨噬细胞的方式优于尾静脉注射,并可避免其对卵巢巨噬细胞的影响,是建立理想的子宫局部巨噬细胞清除模型的最佳方法。

      • 1
    • APP/PS1转基因鼠中阿尔兹海默病对听功能的影响

      桂飞, 宋丹丹, 汪海燕, 孙筱品, 杨磊

      Abstract:

      目的 探究在AD进程中APP/PS1转基因鼠的听力和耳蜗组织形态学变化情况,判断AD发生发展是否会影响其听功能。方法 选择4、8和12三个月龄的APP/PS1转基因鼠和同窝野生型小鼠,通过免疫荧光染色法以及听性脑干反应(ABR)等方法检测,比较分析不同月龄APP/PS1转基因鼠的听功能变化情况。结果 与对照组相比,4月龄APP/PS1转基因鼠海马中Aβ斑块显著增多,表明此时已经开始表现出AD的病理变化;在4、8和12月龄,与同窝野生型小鼠相比APP/PS1转基因鼠的各频率听力阈值均未见显著差异。耳蜗组织形态学检测结果显示,两种小鼠耳蜗毛细胞、螺旋神经节等内耳关键细胞均无显著差异。APP/PS1转基因鼠和同窝野生型小鼠ABR检测结果显示,随着年龄增长两种小鼠的听力阈值均显著上升,均表现为年龄相关性听力损失;结论 APP/PS1转基因鼠的发病进程中存在年龄相关性听力损失,但AD发生发展几乎不会对APP/PS1转基因鼠的听功能产生影响。

      • 1
    • 黄花菜醇提物对斑马鱼抑郁样行为的改善作用研究

      郑涵文, 王梓航, 刘昕玥, 于佳玮, Alberto Carlos Pires Dias, 王琼

      Abstract:

      目的:探究黄花菜醇提物(Hemerocallis citrinaBaroni)在利血平(ReserPine)诱导的斑马鱼幼鱼(Danio rerio)模型中对抑郁行为的改善作用。方法:将斑马鱼幼鱼分为对照组、利血平组、利血平组+氟西汀(阳性药)组、利血平组+黄花菜低剂量组(1.5mg/L)、利血平组+黄花菜中剂量组(3mg/L)、利血平组+黄花菜高剂量组(4.5mg/L)。采用斑马鱼声音刺激和光刺激进行抑郁样行为学分析。利用 RT-qPCR研究黄花菜醇提物对抑郁症有关的星状胶质细胞标志物及其衍生物(GFAP、C3、C4B、EMP-1、S100α-10)以及神经营养因子(BDNF)及其自身受体转录基因(P75,TrkB)的调节功能。结果:与对照组相比,模型组在440Hz声音刺激与8000Lux光照刺激下运动距离缩短、运动时间减少(P<0.05,P<0.0001),呈现运动的不敏感性。而经过黄花菜醇提物给药后的斑马鱼幼鱼对于光与声音的刺激敏感度相较于模型组有明显升高(P<0.05,P<0.01)。与对照组相比,利血平组斑马鱼脑中的星形胶质细胞标志物基因表达上调(P<0.01),而给药组相较于利血平组,星形胶质细胞标志物表达显著下调(P<0.01),而神经营养因子及其受体基因表达,与对照组相比,模型组斑马鱼脑中的BDNF,P75,TrkB下调(P<0.01),而黄花菜醇提物给药组相较于模型组,BDNF,P75,TrkB表达显著上调(P<0.001)。表明黄花菜醇提物抑制了星形胶质细胞激活诱发的炎症表现,同时促进了神经营养因子及其受体基因的生成,对抑郁起到了改善作用。结论:黄花菜醇提物可以改善利血平诱导的斑马鱼幼鱼的抑郁样行为变化,斑马鱼脑中星形胶质细胞标志物的表达量减少,同时促进神经营养因子及其受体基因的生成,起到抗抑郁作用。

      • 1
    • 低剂量莠去津暴露饮用水诱导小鼠肝损伤模型的建立及验证

      朱玉, 苏莹实, 何宝国, 刘溪, 秦嫘

      Abstract:

      【】目的 建立长期饮喂低剂量莠去津诱发小鼠肝损伤模型,并评价莠去津引起的肝毒性作用。方法 C57BL/6-N雄性小鼠随机分为饮用对照组以及1.5mg/L和150mg/L莠去津剂量组,于饮喂后第35 d和第63 d检测血清肝功能生化指标和炎性因子水平,计算肝体比并对肝脏进行病理组织学和超微结构观察,检测肝组织中脂质过氧化水平和抗氧化能力,以及主要Ⅰ相代谢酶和Ⅱ相解毒酶的活性及相关蛋白表达。结果 与对照组相比,莠去津组AST/ALT比值,促炎性因子CCL2、TNFα和IL-6,H2O2含量以及代谢酶NCR、CYP b5和UDPGT活性均有显著变化(P < 0.05);150mg/L莠去津组肝功能GGT含量,过氧化物MDA水平及CYP1A2表达量极显著升高(P < 0.01),而GSH含量显著降低(P < 0.05),观察肝细胞损伤和线粒体空泡化更严重。结论 在建立低剂量莠去津诱导小鼠肝损伤模型时,1.5mg/L和150mg/L莠去津饮用水暴露均能够引起小鼠肝脏损伤,其中150mg/L莠去津暴露63 d后引起的肝脏代谢毒性更强。

      • 1
    • 铁死亡在白血病耐药中的研究进展

      安丽娟, 郝征

      Abstract:

      白血病的化疗耐药是临床亟待解决的治疗难题。铁死亡是铁依赖性的磷脂过氧化作用驱动的一种独特的细胞死亡方式。由于白血病的特征是氧化应激增加和铁超负荷,因此可以推测白血病细胞容易受到铁死亡的影响,这表明具有治疗潜力。近年来,铁死亡已被广泛研究并应用于各类白血病的治疗中。目前已有多项研究表明铁死亡的调控途径与白血病耐药机制之间存在关联,通过不同途径诱导铁死亡可有效降低各类白血病细胞对化疗药物的耐药性,进而提高临床疗效。本文总结了铁死亡的调控机制,详细分析了铁死亡相关氧化应激通路及铁代谢途径与白血病耐药机制之间的关联,并梳理了铁死亡在各类白血病治疗耐药中的实验研究与临床应用,旨在为研究铁死亡与耐药性白血病的治疗提供新的思路和方向。

      • 1
    • 动物生物安全三级模拟实验室的建设与实践探讨

      李晓燕, 卢选成, 鹿双双, 王嘉琪, 卡力比夏提.艾木拉江, 刘美, 刘科亮, 再那吾东.玉山

      Abstract:

      动物生物安全三级实验室(ABSL-3)是可以开展高致病性病原微生物感染实验动物的生物安全防护水平为三级的高级别生物安全实验室。近年来随着新发、再发传染病的不断出现,高级别生物安全实验室在病原致病机理、药物和疫苗研发等方面发挥了越来越重要的硬件支撑作用,ABSL-3实验室的需求与日俱增,与此同时,对于能够胜任ABSL-3实验室工作的人员需求也越来越多,岗前培训的系统化、规范化、标准化成为进入ABSL-3实验室开展工作的人员降低风险的重要保证。高级别生物安全实验室的岗前培训工作需要在特定的场所——模拟实验室内开展,因此有必要建立动物生物安全三级模拟实验室(ABSL-3模拟实验室),并建立科学有效的运行标准和机制。本文全面介绍了ABSL-3模拟实验室的设计、建设、运行及作用。

      • 1
    • 山医群体近交系自发性2型糖尿病中国地鼠血液生理生化指标的检测分析

      杨钰婷, 杨依纯, 卫兵艳, 武剑琴, 张瑞虎, 陈朝阳

      Abstract:

      目的:探究课题组前期建立的山医群体近交系中国地鼠自发性2型糖尿病(T2DM)动物模型的血液生理生化变化情况。方法:选取12月龄山医群体近交系自发性T2DM中国地鼠及正常地鼠各10只,进行空腹采血,应用Sysmex XT自动血液分析仪及Hitachi全自动生化仪对血液15项生理指标及16项生化指标进行测定并进行统计分析。结果:与正常对照组相比,糖尿病组白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、血红蛋白浓度(HGB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)等指标具有统计学差异(P < 0.05)。结论:对课题组前期建立的山医群体近交系中国地鼠自发性T2DM模型进行血液生理生化指标检测分析,其变化符合人类T2DM发病的趋势,为该模型的应用及发展提供了基础数据。

      • 1
    • 利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰小鼠模型的技术优化进展

      王煜, 吴勇, 梁春南, 范昌发

      Abstract:

      CRISPR/Cas9技术的兴起,推动了生命科学各个领域的发展。随着对其认识的不断加深,人们进行了多重改进和优化,以适应不同的应用场景。在基因修饰小鼠模型制作中,CRISPR/Cas9技术的优化也带来了众多突破性进展。本文简要回顾了CRISPR/Cas9技术的发展历程,并从CRISPR/Cas9元件优化、在条件敲除/敲入基因修饰小鼠模型的构建、以及CRISPR/Cas9元件和HDR模板的递送系统层面总结了优化策略,展望该技术的未来的发展。

      • 1
    • 高原低压低氧环境下牙周炎与中枢神经系统炎症的相关性

      陈露, 江小霞, 朱玲玲

      Abstract:

      近年来,随着在高原和山区活动人群的增多,高海拔暴露变得越来越普遍,许多基础疾病患者受高原低压低氧环境影响,病程进一步加重甚至导致认知障碍的现象频发。牙周炎是一种常见的炎症性疾病,能诱发牙周局部炎症反应,甚至中枢神经系统炎症。在高海拔环境下,机体出现免疫力下降、组织缺氧等反应,这些反应会促进牙周炎的发生发展,甚至有可能增加牙周炎引发中枢神经系统炎症的风险。随着高原医学研究的不断深入,高原低压低氧环境下牙周炎与中枢神经系统炎症之间的关系引发越来越多的关注。本文就牙周炎与中枢神经系统炎症的研究进展进行综述,并对高原低压低氧环境下牙周炎与中枢神经系统炎症之间的相关性进行讨论。

      • 1
    • 基于线粒体质量控制探讨运动对骨骼肌萎缩的研究进展

      郭孝静, 王艳

      Abstract:

      骨骼肌萎缩是指骨骼肌质量的下降和肌肉功能的丧失。线粒体质量控制(mitochondrial quality control,MQC)是维持线粒体正常生理功能的基础,主要涉及线粒体生物生成、线粒体动力学(分裂/融合)、线粒体自噬等调控过程,其通过调控线粒体的形态、数量及质量的相对稳定以维持肌肉稳态。运动干预是一种防治肌萎缩经济有效的方式,目前已得到广泛应用,但其与MQC的关系尚未明确。本文就线粒体生物生成、线粒体动力学、线粒体自噬这 3 个质量控制环节在骨骼肌萎缩中的作用及其相关分子靶点的研究展开论述,深入分析MQC介导运动改善衰老、废用、癌症恶病质导致骨骼肌萎缩的机制,以期为运动干预肌萎缩提供理论指导。

      • 1
    • SPF级C57BL/6小鼠肠道固有层单细胞悬液制备的酶消化法比较研究

      曾勤, 梁莹, 王新慧, 闫蕾, 王湘鹏, 杨嘉仪, 余仁欢

      Abstract:

      目的 探究小鼠小肠固有层单细胞悬液制备的最佳酶消化法。方法 采集10根长度一致的小鼠小肠,随机分为两组,每组分别采用以胶原酶A或胶原酶Ⅷ为主的酶消化法制备固有层单细胞悬液,比较这两种酶消化法对单细胞悬液细胞获得率、细胞活性和细胞表面抗原的影响,然后对较优酶消化法制备的单细胞悬液进行流式检测。结果 与以胶原酶Ⅷ为主的酶消化法相比,以胶原酶A为主的酶消化法可以获得更高的细胞产量(9.48?.10)?09 VS(4.18?.02)?09、活细胞比例(86.36?.32)% VS(61.62?0.93)%以及活性CD45 细胞比例(57.19?.11)% VS (26.01?1.44)%、活性CD3 细胞比例(8.73?.89)% VS (4.52?.49)%、活性CD4 细胞比例(6.19?.09)% VS(3.22?.91)%和活性B220 细胞比例(15.06?.27)% VS(5.07?.20)%,为后续流式检测提供了高质量细胞。结论 以胶原酶A为主的酶消化法更适合于小鼠小肠固有层单细胞悬液的制备。

      • 1
    • FOXN1基因敲除兔嵌合体的建立

      刘天平, 黎桂玲, 刘科, 陈傍柱, 王刚, 顾为望

      Abstract:

      目的 建立F0代FOXN1基因敲除兔嵌合体,以探究普通饲养环境免疫缺陷兔活体保种的方法。方法 首先,利用CRISPR/Cas9技术,将构建好的sgRNA和Cas9蛋白注入兔二细胞期胚胎的一个细胞中,以获得FOXN1基因编辑嵌合体胚胎。然后,胚胎移植至代孕母兔。最后,通过PCR技术以及Sanger测序方法鉴定F0代仔兔基因型,并观察其在普通饲养环境生长发育的情况。结果 PCR结合Sanger测序结果表明FOXN1基因敲除兔嵌合体构建成功。经观察,嵌合体在普通环境下生长发育良好,无免疫缺陷表型。结论 本研究初步建立了在普通环境下可正常生长发育的FOXN1基因敲除兔嵌合体,为后续进一步繁育FOXN1免疫缺陷兔奠定了研究基础。

      • 1
    • 胆管癌免疫微环境特征与免疫治疗:机制、挑战与前景

      武雪亮

      Abstract:

      胆管癌是一种具有胆道上皮特征的恶性肿瘤。目前胆管癌早期诊断困难、治疗效果欠佳。其微环境包括丰富的纤维化间质和多种细胞类型,这些成分通过促进迁移、抑制免疫反应和诱导血管和淋巴管生成等机制与肿瘤细胞的相互作用,促进胆管癌的发展和转移。免疫治疗是当前肿瘤治疗的重要手段之一,而胆管癌的免疫治疗也取得了一定的进展。本文综述了胆管癌免疫微环境的特征、与免疫治疗的关系及前沿的治疗策略。

      • 1
    • RANBP9调控TGF-β诱导结直肠癌Colo320细胞凋亡的机制研究

      武雪亮

      Abstract:

      目的:探讨Ran蛋白微管组织中心结合蛋白(RANBP9)靶向调控转化生长因子β1(transforminggrowthfactor-β1, TGF-β1)的表达,及其对结直肠癌Colo320细胞凋亡的影响。方法:分析TCGA数据库中中625例结肠癌组织以及20例正常结肠组织中RANBP9(基因)的表达数据,KMPLOT分析RANBP9的表达与结肠癌患者生存期的关系。人类蛋白免疫组化数据库分析TGF-β1在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达情况,使用UALCAN数据库分析TGF-β1的表达与结肠癌患者生存期的关系。双荧光素酶实验分析RANBP9和TGF-β1的关系。将pcDNA3.1-GFP-RANBP9和pcDNA3.1-GFP-RANBP9-NC分别转染至实验组和对照组细胞中,转染完成后细胞常规培养,另设立正常组细胞,不经过转染操作,常规培养;MTT法检测各组细胞的生长活力,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,JC-1染色检测各组细胞的线粒体膜电位,Western blot检测各组细胞中RANBP9和TGF-β1的表达。结果:RANBP9在结肠癌组织中的表达明显降低,与RANBP9表达低的患者相比,RANBP9高表达的结肠癌患者具有较高的生存期曲线,TGF-β1在结肠癌组织的表达明显升高,与TGF-β1表达高的患者相比,TGF-β1低表达的患者具有较高的生存期曲线,差异均具有统计意义(均P<0.05)。在结肠癌中,RANBP9能靶向调控TGF-β1的表达。与正常组细胞相比,实验组细胞的生长活力、线粒体的膜电位、TGF-β1的表达明显下调,细胞的凋亡率和RANBP9的表达明显升高,差异均具有统计意义(均P<0.05)。结论:RANBP9能靶向调控TGF-β1的表达,促使结肠癌细胞Colo320的生长活力和线粒体膜电位下降,诱导其凋亡。

      • 1
    • 山药多糖对地塞米松诱导IR-3T3-L1脂肪细胞的降血糖作用及机制研究

      刘昕玥, 王凤忠, 郑涵文, Alberto Carlos Pires Dias, 范蓓, 王琼

      Abstract:

      目的 探究山药多糖(Chinese Yam polysaccharide, CYPS)在地塞米松(Dexamethasone,DEX)诱导的3T3-L1胰岛素抵抗(IR-3T3-L1)细胞模型中的降血糖作用。方法 将IR-3T3-L1脂肪细胞随机分为对照组(Con)、模型组(DEX)、二甲双胍组(Met,阳性药组)、CYPS(0.05、0.15、0.45 mg/mL)组,通过DEX(1 μmol/L)诱导建立IR-3T3-L1细胞模型,进行给药后细胞对葡萄糖的消耗量和细胞中血脂(总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C))与丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)含量的检测,并采用qPCR对AMPK-PI3K/Akt信号通路中相关基因表达进行检测。 结果 DEX组与Con组相比,1 μmol/L DEX处理48小时显著降低了IR-3T3-L1细胞的葡萄糖消耗量(P<0.01),且在60 h内维持稳定。0.05、0.15、0.45 mg/mL CYPS处理IR-3T3-L1细胞显著增加了细胞中葡萄糖的消耗(P<0.01)、HK、PK、GSH-Px酶活性(P<0.01)、HDL-C含量(P<0.01);降低了MDA酶活性(P<0.01)、T-CHO、TG、LDL-C含量(P<0.01)。同时,CYPS可以显著回调PI3K、Akt、GLUT-4、AMPK、IRS-2、PPARa、Adiponectin的mRNA水平(P<0.05),降低IRS-1、GSK-3β、ACC、FAS的mRNA表达水平(P<0.01)。 结论 CYPS能够改善DEX诱导的IR-3T3-L1细胞对葡萄糖的消耗,调节脂代谢紊乱,缓解氧化应激,其作用机制可能通过调控IR-3T3-L1脂肪细胞的AMPK-PI3K/Akt信号通路来实现糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗调节来实现。

      • 1
    • 针刺调控缺血性卒中后铁死亡的作用机制研究进展

      薛静, 高莹, 王舒

      Abstract:

      缺血性卒中(Ischemic Stroke,IS)发病机制复杂,其治疗和康复仍面临众多挑战。针刺作为传统中医治疗手段,因治疗IS有效而受到广泛关注,特别是在调控铁死亡方面。铁死亡是一种铁依赖性脂质过氧化细胞死亡方式,与IS后神经功能损伤密切相关。本文综述了IS后铁死亡的主要机制,尤其强调了铁超载、脂质过氧化、线粒体损伤与铁死亡的关联;并进一步探讨了针刺对IS后铁死亡的调控机制,包括针刺在改善线粒体功能,调节铁代谢,减轻氧化应激,抑制炎症反应以及调节多个铁死亡信号通路方面的作用,以期为IS的综合治疗策略提供更多的科学依据和理论支持。

      • 1
    • 输日实验动物检疫监管政策的解析与思考

      丁宁, 梁佳琪, 富宏坤, 王莹, 朱道中, 王春霞, 任娇, 林志雄, 陶雨风, 麻丽丹, 高志强, 吴晓薇, 鱼海琼

      Abstract:

      日本是我国进出口实验动物的主要贸易伙伴之一,其进境实验动物检疫监管政策细致而严格。本文以实验犬、猫和猴为例,对出口日本的主要实验动物检疫监管政策进行了深入解析。通过对我国目前实验动物相关的法律法规、进出境管理办法、实验动物养殖生产和管理现状以及进出口业务趋势展开思考,从完善实验动物法律法规和进出境管理办法、保障国门生物安全、提高实验动物养殖管理水平以及促进实验动物进出口贸易着手,以期为全面提升我国实验动物生产、使用、管理水平,加强中日实验动物工作交流提供参考。

      • 1
    • 人参皂苷Rg1、Rb1 通过调控炎症改善慢性不可预测应激致大鼠抑郁、焦虑样行为的作用及比较

      贝雪怡, 姜宁, 姚彩虹, 张亦文, 孙欣然, 罗燕琴, 李亮, 谢梦洲, 刘新民

      Abstract:

      目的:研究人参皂苷Rg1、Rb1 通过调控炎症改善慢性不可预测应激诱导大鼠的抑郁样和焦虑样行为的作用及比较。 方法:SPF级SD雄性大鼠70只,适应 5 天后进行糖水偏爱实验检测,根据糖水偏爱指数将动物分为7组,即空白对照组、模型组、阳性药组、人参皂苷 Rg1 30 μmol/kg 剂量组、人参皂苷 Rg1 60 μmol/kg剂量组、人参皂苷 Rb1 30 μmol/kg剂量组、人参皂苷 Rb1 60 μmol/kg剂量组。除空白对照组外,其余大鼠每日随机接受1-2种不同的刺激,造模时间共35d。于第36天进行糖水偏爱、旷场实验、新奇环境摄食抑制实验、大鼠高架十字迷宫实验、强迫游泳等行为学实验,考察其抗抑郁、抗焦虑作用。采用Elisa法测定大鼠血清和海马IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子水平,和血清皮质酮(CORT)水平。结果:与模型组相比,人参皂苷Rg1、Rb1组大鼠糖水偏爱指数提升,强迫游泳不动时间显著减少,人参皂苷 Rg1(60 μmol/kg)组新奇抑制摄食潜伏期显著减少,人参皂苷 Rg1(30 和 60 μmol/kg)组开臂时间的比例显著上升,人参皂苷Rg1、Rb1两个剂量组血清中皮质酮的含量显著减少,人参皂苷 Rg1(30 μmol/kg) 剂量组血清中 IL-1β 和 IL-6的水平显著降低,人参皂苷 Rb1 (30 μmol/kg) 剂量组血清中 TNF-α 和 IL-6的水平显著降低,人参皂苷 Rg1、 Rb1 高剂量组海马中 IL-1β、IL-6 和TNF-α 的含量显著降低。 结论:两种人参皂苷均可通过调节 HPA 轴、抑制神经炎症,从而改善慢性不可预测应激致大鼠抑郁、焦虑样行为,此外人参皂苷 Rg1 的抗焦虑作用显著优于Rb1。

      • 1
    • 瓜蒌薤白白酒汤调节肠道菌群及其代谢物改善小鼠动脉粥样硬化的实验研究

      陈枝凡, 陈钰璘, 聂莎, 孙文昊, 李畅, 马梓珊, 胡凯, 何莹莹, 刘鹰, 唐耀平

      Abstract:

      目的 探索瓜蒌薤白白酒汤通过调节肠道菌群(gut microbiota,GM)及其代产物从而改善小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用机制。 方法 将32只雄性Apoe-/-小鼠随机分为空白(Blank)组、模型(Model)组、阿托伐他汀(Ato)组、瓜蒌薤白白酒汤(GXB)组,每组8只。除Blank组以外的3组小鼠建立AS模型后按组别灌胃给药。用油红O染色检测主动脉斑块面积,HE染色观察主动脉组织病理变化。采用16S rRNA基因测序技术分析小鼠GM。检测小鼠GM代谢物氧化三甲胺(TMAO)、短链脂肪酸(SCFA)以及血清中TG、TC、LDL-C、HDL-C和NO水平。 结果 与Blank组比较,Model组、Ato组AS斑块面积均增多(P<0.01、P<0.001);Model组血清TG、TC、LDL-C水平升高(P<0.001),HDL-C、NO水平降低(P<0.01、P<0.001)。与Model组比较,Ato组、GXB组斑块面积减少(P<0.001);Ato组、GXB组中血清TG、TC、LDL-C水平降低(P<0.001),NO水平升高(P<0.01);GXB组HDL-C水平升高(P<0.05)。与Ato组比较,GXB组斑块面积减少(P<0.05),NO水平升高(P<0.01)。16srRNA所得特征序列有6345个。α多样性分析提示GXB能降低AS小鼠GM的丰富度(P<0.001)并提升其均匀度(P<0.05)。β多样性分析提示GXB组的菌群群落结构与Blank组较为相似。各组菌群丰度在门水平、属水平上均存在差异。门水平上,小鼠AS造模后Proteobacteria的丰度上升(P<0.01),GXB干预后能使其丰度下降(P<0.01)的同时提升Verrucomicrobiota的丰度(P<0.05)。属水平上,GXB干预后能有效提升Akkermansia的丰度水平(P<0.05)。与Model组比较,GXB组中SCFA水平显著升高(P<0.01),TMAO水平显著降低(P<0.01)。 结论 本研究发现,瓜蒌薤白白酒汤可以调节GM及其代谢物SCFA、TMAO来改善AS,Akkermansia可能是GXB通过GM改善AS的关键菌属。

      • 1
    • 冠心病慢性心肌缺血小鼠模型及评价方法

      王兆博, 潘熠, 林谦, 钟菊迎

      Abstract:

      【摘要】目的 建立稳定的慢性心肌缺血小鼠模型,初步阐述缺血状态下T波低平的电生理原理。方法 1. C57BL/6 J小鼠作为对照组,正常饮食3个月。将APOE-/-小鼠随机分为模型组和降脂药(Lipid-lowering Drug,LLD)组,高脂饮食喂养3个月;2. 通过苏木伊红(Hematoxylin-eosin staining, HE)和油红染色评估斑块情况;3. 造模前后小鼠的心电图;4. 记录心室肌细胞的动作电位。结果 1.造模后模型组小鼠胆固醇(Cholesterol, CHO)及低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein, LDL-C)显著升高,同时其主动脉出现脂质斑块。LLD组的病变明显减少,而在对照组中没有发现斑块形成;2.对照组造模后心电图中T波/QRS波(简称T/QRS)无显著变化,模型和LLD组出现T/QRS的显著降低;3.T/QRS压低的程度与血脂水平、动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)病理程度存在显著的正相关;4. 心肌细胞动作电位内层心肌对比外层复极更加缓慢,而缺血的内层心肌细胞加速了复极速率。结论 APOE-/-小鼠可用于慢性心肌缺血小鼠模型,缺血状态下内层心肌复极速率增加可能是缺血状态下心电图“T波”压低的主要原因。

      • 1
    • 没食子酸对脂多糖诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用

      刁佳雯, 徐慧, 马新月, 全吉淑

      Abstract:

      目的 探讨没食子酸(gallic acid,GA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应的抑制作用。方法 将人THP1单核细胞用佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)分化为巨噬细胞,用LPS诱导建立巨噬细胞炎症模型,给予不同浓度GA进行保护。CCK-8法筛选 LPS 和GA对THP1细胞的安全浓度;设正常组、模型组(100 μg/L LPS)、GA组(100 μg/L LPS +不同浓度GA)。ELISA法检测各组细胞培养液白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平,微板法检测各组细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,荧光染色检测各组细胞活性氧(ROS)水平、细胞损伤情况和线粒体跨膜电位的变化,Western blotting法检测各组细胞环氧合酶-2(COX-2)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38)、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β、消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)蛋白表达的影响。结果 与正常组比较,模型组细胞培养液IL-6、TNF-α、IL-1β和NO的分泌增多(P<0.05),COX-2、HMGB1、p-ERK、p-JNK和p-P38和p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05),GSDMD蛋白表达水平降低(P<0.05), ROS生成和细胞损伤明显增多,线粒体跨膜电位较正常组显著降低,LDH活性升高(P<0.05);与模型组比较,GA组细胞培养液IL-6、TNF-α、IL-1β和NO的分泌减少(P<0.05),COX-2、HMGB1、p-ERK、p-JNK和p-P38和p-NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达降低(P<0.05),GSDMD蛋白表达水平升高(P<0.05), ROS生成和细胞损伤减少,线粒体跨膜电位逐渐升高,LDH活性降低(P<0.05)。结论 GA对LPS诱导的人THP1巨噬细胞炎症反应具有抑制作用,其抗炎机制可能涉及MAPK和NF-κB信号通路。

      • 1
    • 地榆通过影响PPARG和SLC7A11/GPX4表达减轻溃疡性结肠炎小鼠损伤

      尹小溪, 陈孜旋, 袁漪, 马京男, 王晶, 吕添熠, 佟苗苗, 李丽

      Abstract:

      目的:基于生物信息学探究地榆(Sanguisorbae Radix,SR)改善小鼠溃疡性结肠炎的机制。方法:利用R语言对高通量基因表达数据库(GEO)中GSE92415数据集进行溃疡性结肠炎(UC)差异表达基因筛选和加权基因共表达网络分析(WGCNA),并结合FerrDb数据库,获得UC相关铁死亡特征基因。对特征基因进行蛋白互作分析(PPI)和相关性分析,筛选UC铁死亡核心基因。构建葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC小鼠模型,并灌胃给予SR水提物9 d,记录疾病活动指数(DAI)和结肠长度,采用HE染色法观察结肠组织病理变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠结肠组织炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素-6(IL-6)和脂质过氧化因子丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平,免疫荧光法检测结肠组织闭锁小带蛋白1(ZO-1)表达,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测结肠组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、溶质载体家族7成员11(SLC7A1)和谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)蛋白表达。结果:通过生物信息学筛选得到9个UC相关铁死亡特征基因,其中核心基因为PPARG。相关性分析发现PPARG与铁死亡高度相关。结合生物信息学筛选结果,探讨SR改善小鼠UC的机制,实验结果发现,SR可降低UC小鼠DAI值,缓解结肠缩短,改善肠道粘膜屏障功能,对TNF-α、IL-6、MDA、GSH水平有显著回调作用,并可提高结肠组织PPARG、SLC7A11和GPX4蛋白表达。结论:铁死亡与UC密切相关,SR可通过影响PPARG 和SCL7A11/GPX4蛋白,进而改善UC小鼠结肠上皮损伤和功能障碍,为UC治疗策略提供了思路与方向。

      • 1
    • 脂质组学在慢性肺部疾病生物标志物发现中的应用

      张昂, 刘新光, 杜燕, 谢洋

      Abstract:

      慢性肺部疾病(CLD)通常包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘、特发性肺纤维化等。研究表明,CLD与脂质代谢紊乱密切相关,因此脂质作为CLD的生物标志物,对于疾病的诊断、预防及治疗过程中的监控可能有着重要价值。本文从脂质组学技术方法、脂质组学临床样本选择、CLD生物标志物发现和CLD不同中医证侯区分四方面讨论脂质组学在CLD生物标记物研究中的应用。

      • 1
    • WHBE兔膝骨关节炎模型的建立与PRFr的干预研究

      黄俊杰, 陈民利, 朱科燕, 江劲翱, 张静惠, 蒋超, 潘永明

      Abstract:

      目的 采用内侧副韧带和部分髌韧带切除术建立WHBE兔KOA模型并用富血小板纤维蛋白释放液(PRFr)干预,探讨WHBE兔KOA模型软骨损伤和炎症的机制以及PRFr干预疗效。方法 取WHBE兔24只,随机分成3组,即NC组(n=6)、KOA组(n=12)、PRFr组(n=6);其中KOA组和PRFr组分别于术后第7天和第14天时向两侧关节腔内注射生理盐水和PRFr 0.5 mL。造模4、8周时,各组动物进行行为学评分、X线影像学观察,并取血清进行ELISA检测IL-1β、TNF-α、MMP-13水平,4周时KOA组处理6只,8周时处理各组剩余动物,取兔双侧膝关节,进行大体评分,脱钙后行病理切片制作,然后进行H&E染色、甲苯胺蓝染色和番红O固绿染色以及TGF-β、BMP3和NF-κB免疫组化表达检测。结果 与NC组比,造模后WHBE兔Lequesne MG行为学评分,Mankin's评分,Pelletier评分均显著升高(P<0.01),可见膝关节肿胀明显、关节疼痛刺激和活动受限明显,且X光显示软组织呈高密度阴影,关节积液较多,解剖观察显示关节面粗糙,病理观察显示软骨表面缺损,软骨细胞丢失部分丢失,表明WHBE兔KOA模型成立。与KOA组比较,PRFr干预治疗后血清炎症水平(IL-1β、TNF-α、MMP-13)均显著降低(P<0.05,P<0.01),软骨表面粗糙程度低,大部分软骨细胞分布整齐;同时 TGF-β、BMP3和NF-κB表达水平亦显著降低(P<0.01)。结论 本研究成功建立了WHBE兔KOA模型,且PRFr可通过TGF-β/BMP和NF-κB途径改善WHBE兔KOA模型软骨损伤和炎症。

      • 1
    • 医药学实验室潜在的生物安全风险与防范措施

      陈沫, 陶佳颐, 王宏旭, 张庆建

      Abstract:

      医药学研究实验室涉及的研究领域十分宽泛,实验中应用的包括动物、微生物及纳米颗粒物等多种材料,所产生的废弃物也日益增多,存在着一定的生物安全隐患。本文概述了基因扩增、基因重组、病原微生物研究、纳米研究、动物实验、基因编辑动物及实验废弃物等的潜在安全风险,提出了从制定严格的规章管理制度和完善硬件设施、加强教育培训、增强安全防范意识为主导的实验室生物安全风险防范措施。

      • 1
    • 毒蛇咬伤后相关并发症的研究进展

      李玉梅, 杨悦, 易军, 严张仁, 王万春, 董德刚

      Abstract:

      毒蛇咬伤是一种常见的临床急症,具有发病急、病情变化迅速、致残率及死亡率高等特点。蛇毒中毒除出现常见的全身性和局部组织损伤外,还会引起显著的毒蛇咬伤并发症,包括即时性和延迟性。这些并发症也是导致毒蛇咬伤致残甚至死亡的主要原因,严重影响患者的远期预后及生活质量。该文综合新近的研究成果,重点从血液系统、神经系统、运动系统、内分泌系统、生殖系统及其他方面对毒蛇咬伤并发症的症状、诊断及治疗进行综述,以期在临床上为毒蛇咬伤有效、精准治疗提供参考。

      • 1
    • 铁死亡在脑缺血再灌注损伤机制中的研究进展

      蒋欢, 白文娅, 邵建林

      Abstract:

      铁死亡是近年来新发现的一种细胞死亡方式,参与了多种病理生理过程,如缺血再灌注(ischemia /reperfusion I/R)损伤、神经退行性疾病、肿瘤等。缺血性脑卒中(ischemia stroke IS)目前在世界范围内缺乏有效防治手段,而铁死亡参与脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injoury CIRI)过程,这为治疗IS提供了希望。文章通过检索PebMed、万方、维普及CNKI等数据库近年来发表的相关文献后纳入50篇文章,从铁代谢;铁死亡的概念、机制和调控;铁死亡在CIRI机制中的作用;以及抑制铁死亡的方法等方面入手,为探讨通过抑制铁死亡寻找潜在治疗IS的新策略的可能性提供参考。

      • 1
    • MHC功能及其转基因小鼠模型的研究进展

      曹湘雯, 李敏, 殷琦, 韩雪莲, 王原, 赵光宇

      Abstract:

      主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)与机体免疫调节密切相关,不仅具有遗传多态性,而且MHC限制性存在种属差异。人类的MHC被称为人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA),小鼠MHC则被称为H-2。构建人源化MHC转基因小鼠模型是突破MHC种属差异并模拟人体免疫应答特征的重要策略。MHC转基因小鼠主要分为MHC Ⅰ或MHC Ⅱ单转基因小鼠模型和MHC Ⅰ与MHC Ⅱ双转基因小鼠模型。HLA Ⅰ类转基因小鼠模型发展经历了三个阶段,目前采取敲除H-2Kb和H-2Db或者敲除鼠源β2m的策略来消除内源的H-2 I类分子对HLA I类分子的竞争性抑制;HLA Ⅱ类转基因小鼠模型的构建则是将鼠源β链敲除,转入HLA Ⅱ类基因。随着构建策略的优化,MHC转基因小鼠模型被应用于表位疫苗研发、肿瘤治疗及疾病遗传关联研究中,成为临床前试验的有力工具。本文对MHC转基因小鼠模型相关资料进行了总结,概述了MHC转基因小鼠模型的构建策略及其在疫苗研发、疾病治疗等方面的应用进展。

      • 1
    • 糖代谢重编程在阿尔茨海默病发病机制中的研究进展

      许倩, 杨琼, 谭子虎

      Abstract:

      阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)是以全面性痴呆为特征的神经退行性疾病。尽管AD的发病机制已历经半个世纪的广泛研究,但与AD相关的细胞损伤和认知缺陷的基础机制仍然难以明确。目前,多项研究证实AD中存在神经细胞葡萄糖代谢模式的改变,且存在显著的区域差异。这种转变是细胞存活和疾病进展的关键,甚至先于病理改变和认知功能障碍数十年出现。本文综述了不同类型神经细胞以及不同脑区糖代谢重编程导致AD的潜在机制,以及它们之间的相互影响,以期为AD的研究夯实基础,为开发新的防治方法提供线索和思路。

      • 1
    • 基于中西医临床病证特点的银屑病性关节炎动物模型分析

      史亚瑾, 李寒冰, 李根林, 吴宿慧

      Abstract:

      目的:近年来,随着银屑病性关节炎在我国的发病率逐渐升高且无法治愈,已经成为了医学事业上的一大难题。本研究基于中西医临床病证特点,积极探讨银屑病性关节炎的发病病机,总结目前现有的动物模型并进行分析评价。方法:对所检测到符合本题的文献进行整理归纳总结,通过银屑病性关节炎的中西医病因病机研究、中西医的诊断标准以及动物模型的特点及与临床吻合度的分析,给予现有模型吻合度评分。结果:本论述发现人白细胞抗原转基因鼠模型、多重杂交转基因小鼠模型以及甘露聚糖诱导的小鼠模型吻合度评分最高。结论:由于银屑病性关节炎多见于欧洲,目前动物模型的制备方法多由国外传来,中医病症特点制备的动物模型极少,因此,西医诊断的模型吻合度评分整体高于中医诊断的吻合度评分。希望未来可以结合中医的独特诊疗方法,进一步完善银屑病性关节炎的动物模型种类,为中西医结合治疗银屑病性关节炎构建更理想的动物模型提供基础。

      • 1
    • 线粒体质量控制在呼吸系统疾病中的研究进展

      徐菁菁

      Abstract:

      呼吸系统疾病(肺部炎症、肺纤维化)严重危害人类健康。作为真核细胞特有的细胞器,线粒体不仅在产生能量、生物合成和维持细胞内稳态中具有重要功能,而且作为多样化的信号细胞器,参与炎症、增殖、分化、细胞修复等过程。线粒体质量控制系统包括线粒体生物发生、线粒体动力学和线粒体自噬。研究发现,呼吸系统疾病的某些病理机制如氧化应激、炎症等与线粒体质量控制失调密切相关。因此,本文总结线粒体质量控制失调在呼吸系统疾病(慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化、急性肺损伤、哮喘和细菌性肺炎)的研究进展,以期从线粒体的角度寻求呼吸系统疾病防治的新思路。

      • 1
    • 脊髓灰质炎疫苗脑内法猴体神经毒力试验的神经病理研究

      于品, 徐艳峰, 韩云林, 赵文杰, 秦川

      Abstract:

      目的 本研究为探讨脊髓灰质炎疫苗猴体神经毒力试验毒力返强对神经免疫反应的影响及病理机制。方法 I型、II型和III型Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)的原液(不低于7000 lgCCID50?L-1)以及10-1稀释各型脊髓灰质炎疫苗采用脑内法进行神经毒力试验,观察脊髓灰质炎的病理变化,并利用免疫组织化学法检测脊髓灰质炎病毒受体CD155以及CD4+T淋巴细胞、CD20+B淋巴细胞和CD68+小胶质细胞的分布。结果 发生脊髓灰质炎的猴体出现脊髓炎症细胞浸润,少量神经元变性,脊髓神经元变性坏死、卫星现象、噬神经细胞现象、血管周围炎症细胞袖套状浸润和胶质细胞增生;主要为CD4+T淋巴细胞、CD20+B淋巴细胞和CD68+小胶质细胞大量浸润在血管袖套和增生的胶质结节中;在发生和未发生脊髓灰质炎的猴体中,CD155分布未见明显差别,均表达在神经元和胶质细胞,而血管内皮细胞未见表达。结论 脊髓灰质炎疫苗毒力返强导致典型病毒性脑脊髓炎。

      • 1
    • 五行音乐对孕期恐应激子代社交行为的影响及机制研究

      吴永叶, 杨丽萍, 赵佳佳, 宋琦, 侯俊林, 王耀辉, 李笑琳

      Abstract:

      目的 探究五行音乐对孕期恐应激子代社交行为的影响和机制,为临床胎源性情志疾病的早期防治提供依据。方法 将45只孕鼠随机分为空白组、模型组、五行音乐组。其中,模型组、五行音乐组均采用旁观电击法造模,五行音乐组在孕期的每日17时-19时播放宫调五行音乐。孕第19d对各组孕鼠采用ELISA法检测血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)的含量进行造模评价。仔鼠延续母鼠的分组,于8周龄时进行三箱社交实验观察社交行为;免疫荧光双标法检测仔鼠内侧前额叶皮层(medial Prefrontal cortex,mPFC)谷氨酸能神经元活性的表达;高效液相色谱法检测仔鼠mPFC区谷氨酸(Glutamate, Glu)总含量;高尔基染色观察仔鼠mPFC区神经元树突棘的变化。结果 与空白组相比,模型组孕鼠血清中ACTH、CORT含量显著上升,模型组仔鼠社交交互时间和社会新奇偏好指数显著降低,谷氨酸能神经元活性、谷氨酸含量及神经元树突棘显著下降。与模型组相比,五行音乐能降低孕鼠血清中ACTH 、CORT的含量并改善仔鼠社交行为、谷氨酸能神经元活性、谷氨酸含量及神经元树突棘的状态。 结论 五行音乐干预能够有效改善孕期恐应激所致子代的社交行为障碍,其机制可能与增强mPFC区谷氨酸能神经元的活性有关。

      • 1
    • CAST/EiJ小鼠外周血和脾脏中免疫细胞及亚群分析

      刘琪, 侯勇志, 李娜, 张京京, 陆佳涵, 丛喆, 朱林, 薛婧

      Abstract:

      目的 探索CAST/EiJ小鼠对多种病原体易感的可能原因,分析CAST/EiJ小鼠外周血和脾脏内的免疫细胞表型,明确CAST/EiJ小鼠的免疫细胞构成。方法 利用流式细胞术,通过细胞表面标记物CD3、CD4、CD8、CD11b、CD11c、CD19、CD27、CD49b和TCRβ检测CAST/EiJ小鼠和C57BL/6J小鼠外周血和脾脏内经典型树突状细胞(cDCs)、自然杀伤细胞(NK)、B淋巴细胞、T淋巴细胞及其亚群的细胞比例。结果 CAST/EiJ小鼠与C57BL/6J小鼠的cDCs细胞比例无明显差异,但cDC1细胞亚群比例偏低;CAST/EiJ小鼠的NK细胞(主要是成熟NK细胞亚群)和T淋巴细胞(主要是CD8+T细胞)比例都显著低于C57BL/6J小鼠,而CAST/EiJ小鼠的B淋巴细胞比例高于C57BL/6J小鼠。结论CAST/EiJ小鼠中NK和T淋巴细胞比例显著低于C57BL/6J小鼠。

      • 1
    • 基于数据挖掘的慢性疲劳综合征动物模型的评价

      李亚青, 王灿, 苗明三

      Abstract:

      目的:研究慢性疲劳综合征动物模型的应用情况,为其动物实验方法和模型完善提供参考。方法:以“慢性疲劳综合征,动物模型”“Chronic fatigue syndrom,animal model”等为检索词,在中国知网、万方、PubMed数据库进行检索,整理2000年7月至2023年7月慢性疲劳综合征动物模型的文献,对实验动物、造模方法、阳性药、检测指标等内容进行整理,建立数据库进行统计、分析。结果:共纳入有效文献155篇;实验动物以SPF级、周龄为6-8周的雄性SD大鼠最多,体重集中在180-220g;小鼠应用最多的是18-22g、周龄为6-8周的雄性KM小鼠;应用最多的阳性药是人参皂苷片;应用最多的造模方法是“强制冷水游泳+慢性束缚”法,造模周期多集中在14天,大多采用边造模边干预的方式;检测指标以行为学为主,主要包括力竭游泳实验、旷场实验、鼠尾悬吊实验、Morris水迷宫实验以及动物一般状态观察,其次是血清生化指标,检测最多的是血清MDA、SOD、TNF-α、IL-1β、CORT、IL-2、IFN-γ、ACTH、GSH-Px、IgG、IgA、IL-6等;根据研究目的不同选择其余多种检测指标,包括脾脏、胸腺等脏器指数测定、HE病理染色和超微结构电镜检测的形态学指标、免疫组化相关指标、时荧光定量PCR检测法检测的CRH、Smad4、BDNF、CREB、IFN-γ、NRF-1、TFAM、Tlr4等的相关mRNA表达指标,Western blot法检测的BDNF、CREB、ERK、Bmal1、Clock、NGF、PGC-1α、SIRT1、Smad4、Caspsae-3等的相关蛋白表达指标。结论:目前慢性疲劳综合征的发病机制尚不明确,动物模型以“强制冷水游泳+慢性束缚”的应激造模方法为主,模拟人类身体和心理疲劳状态;动物模型成模标准尚无统一规定,模型评价方式以各种行为学实验单独或组合应用为主,多数文献中客观评价指标多用于病因病机猜想的论证及干预措施有效性评价;各项检测指标应用结果表明慢性疲劳综合征可能与炎症反应、神经功能障碍和线粒体功能异常等因素有关,其发病机制中可能存在免疫功能、能量代谢、细胞增殖和细胞死亡的异常状况,挖掘内容有望为模型应用提供参考,为模型完善提供思路。

      • 1
    • 慢性应激实验动物模型的应用与展望

      岳小琪, 李玉婷, 姜淼, 赵自刚, 牛春雨

      Abstract:

      慢性应激对人类心身疾病的作用与机制是应激研究领域的热点。建立动物模型模拟人类慢性应激状态,在应激反应原理、相关疾病发生机制、临床治疗和药物研发方面有重要意义。本文综述了国内外常用的慢性应激动物模型,总结了应激原分类、动物选择、模型建造、病理表现和评价指标,讨论了各种模型的优缺点及应用进展,期望为研究慢性应激反应的模型选择提供参考。

      • 1
    • 脑卒中神经环路研究技术进展

      陈彦熹, 徐志栋, 刘婷婷, 马连素, 孙芳玲, 王文

      Abstract:

      神经环路由神经元之间通过突触结构相互连接而形成,是大脑信息传递和处理的基本单元,在神经功能调控中发挥重要作用。卒中后,脑梗死区域及梗死周围区域与远程区域的神经连接受损,导致患者出现神经功能障碍甚至残疾。然而,随着检测技术进步,越来越多研究已证实卒中患者在慢性期时能产生一定的功能恢复可能与突触连接和神经环路的重新建立有关。因此,开发特定的工具来识别和操纵神经元活动模式,以及使用高时空分辨率成像策略解读这些神经变化过程,使我们能够了解卒中恢复的全脑网络动力学和神经环路重建的发生机制,从神经生物学角度理解卒中病理学发展到行为结果的闭环关系。目前研究神经环路的工具主要集中于光遗传学、化学遗传学、在体钙成像和功能磁共振成像技术。本文将介绍这四种主要技术的工作原理,重点总结各自在解析卒中后神经重塑研究中的应用成果,并简要分析了每种技术的应用场景、优劣性和未来发展趋势,帮助临床及基础研究人员利用这些工具发现新的治疗策略以及评估康复策略的有效性。

      • 1
    • 脑可塑性在运动改善抑郁中的作用分析

      陈祥和, 陆鹏程, 沈梓铭, 刘驰, 曾炘瑜, 殷荣宾

      Abstract:

      抑郁发生的作用机制研究是当前神经科学领域的焦点,脑可塑性退化(海马、前额叶、扣带回等体积变小、结构退化及功能紊乱)导致抑郁。运动作为改善抑郁的重要手段,当前研究证实了海马、前额叶、扣带回等体积、结构及功能改善在此过程中的重要机制,但相关研究成果仅是单独聚焦于某一脑体积或连接功能变化,缺少较为全面、系统的分析脑可塑性改善在运动抗抑郁中作用机制的研究。因此,本研究拟从抑郁发生及运动改善抑郁两个方面展开,揭示脑可塑性在其中所扮演角色。这有助于全面理解脑可塑性在运动改善抑郁发生中的作用,也将为运动干预抑郁提供新思路。

      • 1
    • 胰腺癌类器官模型的构建与应用

      李鹏, 黄敏丽, 谭邓旭, 张彩勤, 张永斌, 师长宏

      Abstract:

      目的 构建胰腺癌类器官(Patient-derived tumor organoid, PDO)并进行药物治疗评价,评估PDO模型的有效性。方法 收集胰腺癌患者新鲜手术标本,用于PDO培养;分析PDO模型与原发瘤的病理学和遗传学特征;利用PDO模型开展临床化疗药物的疗效评价,测试模型的有效性。结果 成功建立一例胰腺癌PDO模型,组织形态学分析显示PDO模型基本保持了原发肿瘤病理学特征。全外显子测序结果显示,PDO在基因突变类型和特征方面与原始肿瘤保持一致。药物筛选试验显示,PDO模型对临床常用的化疗药物吉西他滨、伊立替康具有较好的敏感性。结论 成功构建了一例胰腺癌PDO模型,该模型能够反应原始肿瘤的组织学和遗传学特征,并可以进行体外药物敏感性实验,证明了PDO模型的有效性,有望应用于胰腺癌的个体化治疗。

      • 1
    • 星形胶质细胞表观遗传学调控机制研究进展

      徐柳清, 赵培源, 刘喜红, 杜晓丹, 范孟杨, 余晨阳, 侯俊林

      Abstract:

      星形胶质细胞(astrocyte,AS)是中枢神经系统最丰富的神经胶质细胞,其参与神经系统诸多生理和病理过程。其表型的改变对中枢神经系统的健康尤为重要。表观遗传学机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA调控和染色质重塑等,皆与AS增殖、分化、炎症等表型特征的改变紧密联系,但这些机制如何发挥作用仍需要探索与总结。通过综述在不同的生理和病理状态下表观遗传学机制对AS作用的最新进展,以期为相关疾病的认识和治疗提供新思路。

      • 1
    • 基于TLR4/NF-κB通路及Th17/Treg细胞平衡探讨熊果酸改善 1型糖尿病大鼠胰岛β细胞损伤的实验研究

      宋雨, 张小莉, 陈换换, 唐聪

      Abstract:

      【摘要】目的 探究熊果酸(ursolic acid,UA)对1型糖尿病(type 1 diabetes,T1DM)大鼠TLR4/NF-κB信号通路及Th17/Treg细胞的影响。方法 腹腔注射链脲佐菌素制备T1DM大鼠模型,随机分为空白组(Control组)组、模型组(Model组)、二甲双胍组(MET组)和UA组。记录大鼠体重、血糖等一般情况,灌胃六周后采集大鼠外周血、胰腺组织评估胰岛素干预情况。免疫组化观察胰腺组织病理变化;鲎试剂检测血清LPS含量变化;qRT-PCR法检测胰腺TLR4、MyD88、IκBα、NF-κB p65 mRNA的表达,以及转录因子RORγt、Foxp3 mRNA的表达;Western blot法检测胰腺TLR4、MyD88、IκBα、NF-κB p65蛋白的表达,以及转录因子RORγt、Foxp3蛋白的表达;流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞比例变化;ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量变化。结果 经STZ诱导的糖尿病大鼠经6周灌胃处理,与Model组相比,MET组大鼠和UA组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose (FBG))均明显下降,体重均明升高;胰岛β细胞炎性浸润减少;TLR4、MyD88、IκBα、NF-κB p65、RORγt mRNA和蛋白的表达明显降低;LPS含量明显下降;IκBα、Foxp3 mRNA和蛋白表达明显升高;Th17/Treg比值明显下降;TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显下降。结论 UA可通过减少LPS移位,抑制TLR4/NF-κB通路,下调RORγt并上调Foxp3的表达纠正T1DM大鼠Th17/Treg细胞比例失衡来改善大鼠症状。

      • 1
    • 芍药甘草颗粒对斑秃样小鼠毛发生长、行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

      曲保全, 吕书影, 林文君, 杨顶权

      Abstract:

      目的 探讨芍药甘草颗粒对斑秃样小鼠毛发生长、行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响。方法 C3H/HeJ小鼠42只,随机分为空白对照组、模型组、芍药甘草颗粒高中低剂量组、促肾上腺皮质激素释放激素1型受体拮抗剂组、复方甘草酸苷片组,每组6只,分别予以不同药物干预。进行照片和毛发镜拍摄、体重称量、行为学测定,以及促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、皮质醇、糖皮质激素受体、脑源性神经营养因子检测。结果 与模型组比较,高剂量芍药甘草颗粒可加速斑秃样小鼠毛发再生及体重增长(P<0.05),增加旷场实验运动总路程及中央区运动路程占总路程百分比(P<0.05),减少强迫游泳实验及悬尾试验不动时间(P<0.05),降低外周血促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、皮质醇水平(P<0.05),增加海马体糖皮质激素受体及脑源性神经营养因子表达(P<0.05)。结论 芍药甘草颗粒能促进斑秃样小鼠毛发生长、改善其行为学表现,其作用的发挥可能与下调促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素、皮质醇水平,上调糖皮质激素受体、脑源性神经营养因子表达,抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴轴过度活化相关。

      • 1
    • CAV1在消化道肿瘤中的研究进展

      吴志航, 潘海邦, 唐明政, 李晓凤, 荣耀, 崔岩

      Abstract:

      【摘要】消化道肿瘤是目前全球最常见的癌症之一,包括食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌和结直肠癌等,其预后不佳,治疗方法仍需进一步改进。小窝蛋白-1(caveolin-1,CAV1)在消化道肿瘤中具有双重调节作用,既是肿瘤抑制因子又是致癌因子。CAV1对消化道肿瘤的细胞增殖、侵袭、转移、血管生成和药物耐受性等方面具有重要作用,调节CAV1蛋白及其相关信号通路可能成为治疗消化道肿瘤的策略之一。因此,本综述就CAV1的结构、功能、表达调控以及调节消化道肿瘤上皮-间充质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及其耐药性等方面分析CAV1与消化道肿瘤的关系,以期为临床消化道肿瘤的诊疗提供新的思路。

      • 1
    • 程序性细胞死亡在脑卒中后认知障碍中的研究进展

      孙可心, 肖雨倩, 万俊, 陈淑颖, 陈丽敏, 王岩, 白艳杰

      Abstract:

      脑卒中后认知障碍(PSCI)是脑卒中后常见并发症之一,对卒中患者的生活质量影响较大,但发病机制尚未能完全解释清楚。越来越多的证据表明,程序性细胞死亡(PCD)机制与PSCI有关,包括细胞凋亡、坏死性凋亡、细胞焦亡、泛凋亡、PARP-1依赖性细胞死亡和铁死亡等。因此,清楚了解各种PCD机制及其与PSCI的关系,阐明PCD在疾病发病机制中的作用至关重要。文章综述了与PSCI相关的6种PCD途径,总结其在PSCI中的作用机制,并阐述了不同途径之间可能存在的串扰,以期为临床靶向PCD途径的调节因子来治疗PSCI提供资料依据。

      • 1
    • 刹车片颗粒及其主要成分硫化锑呼吸暴露对小鼠健康危害研究

      李彦红, 修晶辉, 周澧, 郭建国

      Abstract:

      目的 研究刹车制动来源颗粒物对机体的潜在危害。方法 研磨刹车片颗粒、硫化锑颗粒,小鼠通过气管灌注暴露1个月后,观察肺、心、肝等内脏器官病理改变,同时流式细胞术分析外周血巨噬细胞和自然调节T淋巴细胞(regulatory T cell, Treg)的变化。结果 刹车片颗粒及硫化锑颗粒暴露小鼠肺泡壁外源物质沉积,血管周围出现明显的炎症细胞浸润并随着暴露浓度的增加而加重,同时可出现心脏血管炎症和微血栓以及肝细胞肿胀等病理改变;Treg细胞减少,硫化锑组和低剂量刹车片组巨噬细胞增加,同时M2型巨噬细胞比例下调。结论 刹车片颗粒及其成分硫化锑颗粒暴露对小鼠肺、心、肝等脏器具有不同程度的毒性作用,并对免疫系统造成了影响,提示刹车来源的空气污染的潜在健康危害。

      • 1
    • 散结祛瘢方对BALB/C裸鼠瘢痕疙瘩模型的作用及转化生长因子-β1的影响

      黄储涵, 杨顶权, 钟施怡, 吴瑞英, 杨知山, 方慧娟, 刘青武

      Abstract:

      目的:探讨散结祛瘢方对瘢痕疙瘩裸鼠模型的作用及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)的影响。方法:将人手术切除后瘢痕疙瘩组织移植至6~8周龄健康SPF级BALB/C 雌性裸鼠背部皮下,建立瘢痕疙瘩裸鼠模型,随机分成散结祛瘢方组、积雪苷片组、对照组3组,每组5只,分别用散结祛瘢方、积雪草苷片及无菌纯水进行干预,连续灌胃28天后剥取瘢痕疙瘩组织,进行称重、苏木精伊红(hematoxylin eosin, HE)染色、Masson染色、免疫组化(TGF-β1)染色。比较三组间治疗前后的瘢痕疙瘩重量差值的差异,以及比较三组间治疗后的胶原纤维、成纤维细胞数量及TGF-β1表达的差异。结果:积雪草苷片组的瘢痕疙瘩重量差值大于对照组,且散结祛瘢方组与积雪草苷片组、对照组相比,散结祛瘢方组瘢痕疙瘩治疗前后重量差值最大(P < 0.01);散结祛瘢方组较对照组胶原纤维疏松、数量减少;成纤维细胞数量减少;散结祛瘢方组较对照组TGF-β1表达减少(P < 0.01)。结论:散结祛瘢方对瘢痕疙瘩具有一定的治疗作用,其机制可能是通过减少瘢痕疙瘩组织中TGF-β1的表达,从而减少成纤维细胞的增殖与细胞外基质的合成。该研究为临床中用中药治疗瘢痕疙瘩提供了实验基础与理论依据。

      • 1
    • miR-379-5p抑制小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖、侵袭和迁移

      宋艳梅, 孙宁鑫, 刘晨, 宋宜芬, 李洪利, 尹崇高

      Abstract:

      目的:通过研究miR-379-5p对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖、侵袭和迁移的影响,为临床抑制乳腺癌增殖、侵袭和转移提供新的治疗靶点。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)用来检测miR-379-5p在质粒转染后4T1细胞中的表达情况;采用(5-ethynyl-2’-deoxyuridine, EdU)细胞增殖实验与Transwell实验检测各组4T1细胞增殖能力与侵袭能力;通过划痕愈合实验检测过表达和敲低miR-379-5p后4T1细胞的迁移能力;利用BABL/c小鼠建立乳腺癌小鼠移植瘤模型,观察miR-379-5p过表达后对体内肿瘤生长状况,肺转移灶数量及大小的影响 。结果:EdU结果显示,与对照组相比,敲低miR-379-5p能增强细胞的增殖能力,过表达miR-379-5p能够抑制乳腺癌细胞的增殖能力(p<0.05);Transwell与伤口愈合实验结果显示,敲低miR-379-5p能够增强乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,过表达miR-379-5p显著抑制细胞的侵袭和迁移能力(p<0.01)。BABL/c小鼠体内成瘤实验显示,过表达miR-379-5p可显著减缓肿瘤的生长速度(p<0.05),对肺转移有抑制作用(p<0.01) 。结论:miR-379-5p在乳腺癌中起到抑癌基因的作用,抑制小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖,侵袭和迁移。

      • 1
    • 卵巢功能不全病因病机及动物模型构建研究进展

      杨智惠, 胡扬, 宗政, 孙向明, 宋辉, 陈鹰翔, 徐蓓蕾, 张文君, 陈鲁宁, 李文兰

      Abstract:

      卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency, POI),又称为“卵巢功能低下”,其发病率高达1%-5%,近年来还呈现不断上升的趋势,已经严重影响女性的身心健康及生活质量。目前,关于POI的发病原因及机制尚不明确,模型构建方法与应用也较混乱,且绝大多数模型在针对性、稳定性等方面存在一定不足。这也极大的限制了POI的相关研究及其临床诊断和治疗。因此本文对POI的病因病机与POI动物模型的构建进行综述和讨论,以期为POI的病因病机研究及模型的选择和构建提供更多参考。

      • 1
    • AIM在炎症反应和脂质代谢疾病中的作用

      张帆, 田春雨, 王景存, 喇孝瑾

      Abstract:

      巨噬细胞凋亡抑制因子(apoptosis inhibitor of macrophage, AIM),是清道夫受体富含半胱氨酸残基超家族(scavenger receptor cysteine rich-super family, SRCR-SF)B组的成员之一。AIM为巨噬细胞分泌的一种可溶性蛋白,该蛋白的表达受肝X受体(liver X receptor, LXR)控制,且在机体的免疫反应中起重要作用。AIM作为巨噬细胞的一种分泌蛋白,发挥着广泛的作用,不仅对巨噬细胞的凋亡具有抑制作用,并且可参与调控巨噬细胞极化。还有相关研究发现,AIM参与炎症、肥胖、动脉粥样硬化和癌症等多种生理、病理过程;可以作为结核病和肝硬化等疾病的生物诊断标志物;可以通过抑制脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS)活性从而促进脂肪细胞的脂解,在调节脂质内稳态平衡、脂质代谢与自身免疫疾病中发挥着重要的作用。该文综述了AIM的分子特征及其在炎症反应和脂质代谢等相关疾病方面的作用,展示AIM的多种功能特点,为相关的医学研究提供依据。

      • 1
    • 自噬与神经系统疾病

      梁钰莹, 黄泳, 刘俊升, 欧毅琳, 李逸文, 张睿, 李政, 张治楠

      Abstract:

      自噬是细胞内异常聚集蛋白和受损细胞器主要的降解和循环途径,维持着细胞正常的代谢平衡及物质更新。自噬具有神经保护作用,可通过调节神经元和胶质细胞的稳态、发育和凋亡等生理过程影响着神经系统的功能状态。近年来大量研究表明,神经系统疾病与异常自噬有着密切的关系,自噬的抑制或过度激活均影响着抑郁症、神经退行性疾病和精神分裂症的发生发展。了解自噬在神经系统疾病中的作用机制对于预防与治疗相关疾病具有重要意义。该文主要对当前自噬与上述神经系统疾病的研究进展进行综述,以期为以上疾病的进一步研究提供参考。

      • 1
    • Δ9-四氢大麻酚对血脑屏障作用的研究进展

      张千遥, 程浩, 黄依桢, 腾喊信, 张越, 张瑞林

      Abstract:

      大麻素的精神活性是众所周知的,关于大麻素在全世界是否可以用于治疗目的也一直存在争议。而Δ9-四氢大麻酚(tetrahidrocannabinol,THC)作为大麻中最主要的精神活性物质,它的神经作用机制直到最近才被发现,但其作用机理仍未完全明确。血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是保护大脑的关键屏障结构,也是外来物质入脑的第一道防线,THC的亲脂性及与内源性大麻素系统的相互作用使其更加容易对BBB产生作用。本文综述了THC的神经毒理作用,聚焦于THC对BBB的作用与机制,为阐明THC的神经作用机制提供理论依据。

      • 1
    • 精索静脉曲张合并勃起功能障碍动物模型的构建和评价

      陆杰, 李群生, 周磊, 李东润, 申振南, 李凝华, 朱璠宇, 陈冬, 唐文平, 杨文涛

      Abstract:

      目的 通过手术诱导SD大鼠精索静脉曲张(VC),阿扑吗啡试验(APO试验)筛选测VC后勃起功能障碍(ED)的大鼠,探讨建立VC合并ED模型的方法。方法 将60只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组,每组20只;参照Turner法,部分结扎左侧肾静脉,诱导左侧VC;并进行3次APO试验,筛选诱导VC后出现ED的大鼠,观察并记录勃起次数、生殖器梳理次数、打哈欠次数;测量双侧精索静脉直径;对双侧睾丸和肾脏称重;HE染色观察阴茎和左睾的病理改变;统计模型组大鼠的成模率。结果 模型组20只大鼠中有15只成功进行VC合并ED造模,成模率75%;造模后,模型组左侧精索静脉直径显著增加,且显著高于造模前,模型组右侧精索静脉直径增加,且高于造模前;模型组左侧睾丸重量显著降低,与右侧睾丸比较重量显著降低;各组双侧肾脏重量的比较,组间及组内无明显差异;模型组勃起次数、打哈欠次数、生殖器梳理次数显著减少,且随造模时间递减;模型组左侧睾丸和阴茎病理改变显著。结论 Turner法可以诱导大鼠精索静脉直径增加,引起睾丸损伤和重量下降,APO试验可以筛选诱导VC后出现ED的大鼠,二者相结合适用于构建与人类VC合并ED状态较相似的动物模型。

      • 1
    • 基于三联法高尿酸血症小鼠模型的建立与评价

      倪建宇, 白宁宁, 刘贤莉, 龚丽红, 寿旗扬

      Abstract:

      目的:探讨三联造模法(氧嗪酸钾、次黄嘌呤以及30%酵母膏饲料联用)能否在ICR背景小鼠上建立稳定可靠的高尿酸血症模型,并采用阳性药非布司他对该造模方法进行评价。方法:采用氧嗪酸钾、次黄嘌呤和30%酵母膏饲料,分别单用、两药或三药联用建立ICR小鼠高尿酸血症模型,检测血清尿酸、肌酐、黄嘌呤氧化酶(XOD)、尿酸氧化酶(UOX)等指标评价高尿酸血症模型成功与否。结果:氧嗪酸钾单用对ICR小鼠血清尿酸水平没有明显改变,与30%酵母膏饲料和次黄嘌呤分别联用组血尿酸有升高趋势但无显著差异,而三联给药组在7天时显著提高(P<0.01);14天的动态监测发现三联给药诱导的ICR小鼠血尿酸水平在7天时达到峰值;同时,XOD酶活性提升,UOX酶活性降低(P<0.001)。此外,三联给药诱导的ICR小鼠高尿酸血症模型对阳性药物非布司他反应敏感,血尿酸水平显著下降(P<0.001)。结论:通过三联给药的方法可以在7天时稳定诱导ICR小鼠的高尿酸血症模型。

      • 1
    • 大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型的建立与评估

      余奎, 梁晓强, 韩冕, 张静喆

      Abstract:

      目的 建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型,检测其病理生理指标,为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。方法 选用SPF级雄性SD大鼠,采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建,评估大鼠造模前后的体重变化、死亡情况、肝功能主要指标变化及肝脏组织病理改变情况。结果 造模后模型组大鼠体重明显降低;大鼠死亡数较少;肝功能主要指标及肝脏病理呈现出明显的胆汁淤积及肝功能损伤性改变。结论 本研究成功建立了大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型,该模型具有操作简便、损伤小、死亡率低、造模成功率高等优势,可为多种常见疾病的机制研究和药物研发提供标准化的实验动物模型。

      • 1
    • 细胞焦亡在肾缺血再灌注损伤中的研究进展

      孙豪杰, 朱俊雷, 李伟, 王锁刚

      Abstract:

      细胞焦亡是半胱氨酸蛋白酶介导的以线粒体参与、炎性小体组装、质膜穿孔、炎性释放为特征的细胞程序性死亡。作为介导机体炎症反应的重要机制,细胞焦亡在肾缺血再灌注损伤(renal ischemia-reperfusion injury, RIRI)中发挥了关键作用。本文就近年来细胞焦亡的分子机制、细胞焦亡在RIRI中的作用机制和治疗药物的研究进展进行综述,旨在为RIRI的早期治疗提供理论参考。

      • 1
    • TRP通道介导线粒体功能调控及其与心血管疾病关系研究进展

      朱美萍, 张世忠

      Abstract:

      Transent receptor potential (TRP)通道是一类非选择性阳离子通道。近年来研究发现TRP通道参与多种疾病发生机制,其中关于TRP通道通过线粒体功能调控参与相关心血管疾病机制的研究,正成为心血管疾病机制研究的热点之一。目前已有的相关文献主要集中在TRPV、TRPM和TRPC三种TRP通道。本文主要就上述三种TRP通道在线粒体功能调节中的作用及其与心血管疾病的关系研究进展进行综述。

      • 1
    • 4T1乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激诱导乳腺癌合并抑郁小鼠模型构建探索

      刘燕, 彭梦薇, 刘高源, 杨铁柱, 张文娴, 吴耀松, 陈玉龙

      Abstract:

      【摘要】目的 研究4T1乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激方法构建乳腺癌合并抑郁证小鼠模型核心行为症状、生物学指标、病理学等改变。方法 BABL/c小鼠随机分为正常组(Control)、束缚组(Stress)、移植瘤组(Tumor)和束缚 移植瘤组(Stress Tumor,S T),将4T1细胞株接种于Tumor和S T组小鼠腋下,待成瘤后,给予Stress和S T组小鼠束缚应激21天。造模期间监测各组小鼠体重、摄食量。实验结束后,采用糖水偏好试验、旷场试验、高架十字迷宫试验和强迫游泳试验评价各组小鼠抑郁样行为。小鼠断头处死后,测量小鼠瘤体重量和体积;采用Elisa方法检测各组小鼠血清肿瘤标志物:糖类抗原(CA199)、癌胚抗原(CEA)、血管内皮生长因子(VEGF)以及相关神经递质:5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、皮质酮(CORT)的含量;运用HE染色法观察小鼠肿瘤和海马组织病理学改变。结果 S T组小鼠体重、摄食量显著降低,瘤体重量和体积明显增大,血清肿瘤标志物(CA199、CEA、VEGF)水平显著升高,快感和对新环境的探索欲望减弱,紧张和绝望行为显著增强,血清神经递质5-HT和NE水平显著降低,CORT水平显著升高;另外肿瘤组织细胞排松散,间质减少,病理性核分类相增多,海马CA3区神经元细胞排列和形态紊乱,核内空泡化样改变明显。结论 4T1乳腺癌细胞株接种联合慢性束缚应激诱导的乳腺癌合并抑郁小鼠模型出现了乳腺癌和抑郁症双重典型症状和生物学指标改变,可为乳腺癌合并抑郁实验研究提供较好的模型参考。

      • 1
    • 补阳还五汤减轻氧化应激保护脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障的作用研究

      马娴

      Abstract:

      目的:探究补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction, BYHWD)降低氧化应激水平保护脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury,CIRI)大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的机制。方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞再灌注(middle cerebral artery occlusion/ reperfusion,MCAO/R)模型,应用PeriCam PSI激光散斑血流成像系统检测脑血流量判定模型建立是否成功。通过Zea Longa评分评价大鼠神经功能缺损情况;HE染色观察大鼠脑组织病理学改变;干湿重法检测脑水肿程度;伊文思蓝(Evans blue, EB)染色检测BBB通透性;透射电镜观察BBB超微结构改变;试剂盒检测氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)的含量及总超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫组织化学染色及Western blot检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平;免疫荧光双染及Western blot检测紧密连接蛋白(tight junction protein,TJP)中Occludin、ZO-1、Claudin-5蛋白的表达水平。结果:BYHWD能够降低MCAO/R大鼠神经功能缺损评分,减轻脑组织病理学损伤,减轻血脑屏障结构破坏,延长紧密连接结构致密区,减轻缺血侧大脑脑水肿情况,降低BBB通透性。BYHWD可以降低ROS与MDA水平,提高SOD活性,降低MMP-9表达水平,提高Occludin、Claudin-5、ZO-1蛋白表达水平。结论:BYHWD可以升高BBB紧密连接蛋白的表达水平,降低血脑屏障通透性,保护血脑屏障超微结构,减轻脑水肿,其机制可能与BYHWD抗氧化应激,抑制MMP-9的激活相关。

      • 1
    • PI3k/Akt通路在大戟大枣汤抗不同分子表型乳腺癌中的调控作用

      马立威, 姚宏玉, 陈哲, 倪世宇, 陈颂, 李京, 刘吉成

      Abstract:

      目的 探讨PI3k/Akt通路在大戟大枣汤(decoction of Euphorbia fischeriana Steud. and jujuba,DEFSJ)抗雌激素受体(ER)阴性(-)和ER阳性( )乳腺癌中的调控作用,为乳腺癌的针对性治疗提供参考。方法: 制备DEFSJ提取液,采用UHPLC-Triple Quad仪进行质控分析。采用血清药理学方法制备DEFSJ含药血清(containing serum,CS),乳腺癌(ER-)MDA-MB-453和(ER )MCF-7细胞分别用不同浓度DEFSJ-CS干预48 h。流式细胞术检测细胞周期分布,DNA ladder实验评估细胞凋亡程度,Western blot法检测PI3k/Akt通路相关蛋白表达,实时定量聚合酶链反应(qrt-PCR)法检测FoxO3a、FoxO1a及Bim mRNA表达;激光共聚焦显微镜观察FoxO3a蛋白核转位。结果: UPLC对5批DEFSJ提取物进行了分析,结果表明制备工艺可行,质量可控,保证了药理学实验结果的准确性。体外实验中发现,DEFSJ-CS能阻断细胞在G2/M期(P<0.05,P<0.01);DNA ladder实验中呈现典型的细胞凋亡梯带;与阴性对照组比较,DEFSJ-CS能使p-PI3k、p-Akt、p-FoxO3a及p-FoxO1a蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Bim蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);使FoxO3a、FoxO1a mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),Bim mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01);并能使细胞中FoxO3a蛋白呈现显著的核转位变化;且各数据结果均显示DEFSJ-CS对(ER-)MDA-MB-453细胞比对(ER )MCF-7细胞作用效果更好。结论: PI3k/Akt通路参与了大戟大枣汤抗乳腺癌作用的调控,作用效果因乳腺癌表型差异而不同。

      • 1
    • 基于IRS-1/PI3K信号轴探究补肺健脾方对COPD 大鼠骨骼肌线粒体损伤的影响

      沈婷婷, 李素云, 李亚, 轩银霜, 李景梅, 李高峰, 韩冰洋

      Abstract:

      目的 探究补肺健脾方(BJF)通过调控IRS-1/PI3K信号轴对COPD大鼠骨骼肌线粒体损伤的影响。方法 将60只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组(COPD稳定期组)、BJF组、吡格列酮组(PIO组)、BJF PIO组以及氨茶碱组,10只/组。采用烟熏加鼻腔滴菌(肺炎克雷伯杆菌)的方法建立COPD稳定期大鼠模型,自第9周开始给药至20周结束后取材,每周给予大鼠体重测量。分别对肺组织和骨骼肌组织进行常规切片与HE染色,并于光镜下观察其相应的病理学改变。分别于第0、8、20周时采用非束缚全身体积描记系统(whole body plethysmography,WBP)观察大鼠肺功能,包括潮气量(tidal volume,VT)、呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)、50% 潮气量呼气流量(50% tidal volume expiratory flow,EF50)。采用qPCR技术检测大鼠骨骼肌组织中IRS-1、PI3K、PGC1-α以及Leptin mRNA的表达。采用WB技术检测大鼠骨骼肌组织中IRS-1、PI3K、AKT、p-AKT、PGC-1α、TFAM、Leptin蛋白的表达。结果 光镜下观察显示:与Control组相比,Model组肺病理可见肺泡间质以及肺支气管存有大量的炎性细胞浸润,部分肺泡壁出现断裂并融合形成气腔、纤维网被破坏等;与Model组比,用药治疗后各组肺泡壁的断裂以及纤维网的破坏均得到改善,支气管中炎性细胞浸润减轻,其中以BJF组与Am组尤为明显。用药治疗后各组骨骼肌病理与Model组比,可不同程度改善肌纤维之间排列间隙、萎缩与断裂,肌细胞胞质染色不均一等,其中以BJF组疗效较为显著。与Control组比较,Model组PEF、VT和EF50第8周起显著降低(P < 0.01),BJF组、BJF PIO组和Am组可以显著提高PEF、EF50(P < 0.01)。与Control组相比,Model组中IRS-1、PGC1α和PI3K mRNA的表达水平显著降低(P < 0.01),Leptin mRNA的表达水平显著增高(P < 0.01);与Model组比较,四个用药组中Leptin mRNA的表达水平均显著降低(P < 0.01), BJF、PIO和BJF PIO组IRS-1 mRNA的表达水平均显著增高(P < 0.01);BJF和BJF PIO组中PGC-1α mRNA的表达水平较Model组显著升高(P < 0.01);BJF、BJF PIO和Am组中PI3K mRNA的表达水平较Model组显著增高(P < 0.01)。与Control组比较,Model组PGC-1α、IRS-1、PI3K蛋白表达水平显著降低(P < 0.01),Leptin蛋白表达水平显著增高(P < 0.01)。与Model组比较,BJF组PGC-1α蛋白的表达水平显著增高(P < 0.05),BJF PIO与BJF组IRS-1蛋白表达水平较Model组显著增高(P < 0.05, P < 0.01),Am、BJF和BJF PIO组PI3K蛋白的表达水平较Model组显著增高(P < 0.01),以BJF PIO组最为显著。与Control组比较,Model组股四头肌组织中 TFAM、p-AKT蛋白表达有明显的下降趋势,各治疗组的TFAM、p-AKT蛋白表达均有升高趋势,但无显著性统计学差异(P > 0.05)。结论 补肺健脾方可通过调控IRS-1/PI3K信号轴,改善骨骼肌线粒体的损伤,同时提高线粒体辅激活因子PGC-1α与线粒体转录因子TFAM的表达,增强线粒体的生物合成,从而减轻肺与骨骼肌组织的病理性损伤。

      • 1
    • LIMK1通过上调ROS/Src通路进而促进宫颈癌的进展[1]

      贾亚静, 杜耐一, 赵炜, 李永萍, 刘雅坤

      Abstract:

      摘要:目的 探究LIMK1对宫颈癌(CC)进展的影响。方法 构建LIMK1过表达人宫颈癌HeLa细胞,将HeLa细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤体积并以Western blot实验检测其瘤体细胞中NOX2、NOX4、p-Src、p-RUNX3、RUNX3以及MMP-9蛋白表达情况;将LIMK1过表达HeLa细胞培养于5%O2条件下,并加入抗氧化剂,以Western blot实验检测细胞内LIMK1、NOX4、p-Src、p-RUNX3、RUNX3以及MMP-9蛋白表达情况,以划痕实验检测细胞迁移能力,以Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,以单克隆增值实验检测细胞增殖能力。结果 接种LIMK1过表达HeLa细胞的裸鼠肿瘤体积明显增大,其NOX2、NOX4、p-Src、p-RUNX3以及MMP-9蛋白升高,而RUNX3蛋白表达降低;LIMK1过表达的HeLa细胞LIMK1、NOX4、p-Src、p-RUNX3以及MMP-9蛋白表达升高,RUNX3蛋白表达降低,同时细胞的迁移和侵袭能力以及细胞增殖能力增强,而加入抗氧化剂后,细胞的NOX4、p-Src、p-RUNX3、RUNX3以及MMP-9蛋白表达水平以及细胞迁移、侵袭和增殖能力与LIMK1正常表达的HeLa细胞无差异。结论 LIMK1通过促进ROS/Src通路进而促进宫颈癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力,促进了宫颈癌的进展。

      • 1
    • SHP2在消化系统肿瘤中的研究进展

      王鹏, 樊建春, 贾举名, 刁庆飞, 武雪亮, 薛军

      Abstract:

      【摘要】 目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致残率、致死率在逐年上升。Src同源性2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)是PTP家族中重要的一员,是一种功能广泛的酪氨酸磷酸酶,其在多种实体肿瘤中的表达量升高,在侵袭、转移、增殖、凋亡、耐药性等方面发挥着重要调控作用。已有大量研究表明,SHP2在许多实体瘤的发生和发展中起着非常重要的作用,但现在尚无系统的报道SHP2在消化系统肿瘤中的作用。基于此该文综述了SHP2在7种消化系统中不同肿瘤的生物学功能及临床意义,探讨其在不同癌症发展阶段的作用与机制,并总结与展望SHP2抑制剂的发展,进一步寻找有效的早期诊断和基因治疗的潜在靶点,这对癌症患者生存率的提高具有十分重要的意义。

      • 1
    • 调节性细胞死亡在扩张型心肌病中的研究进展

      邱月清, 王振涛

      Abstract:

      扩张型心肌病(Dilated cardiomyopathy,DCM)起病隐匿,以左心室扩大为主的全心扩大为主要影像学表现,是心力衰竭与心律失常的常见原发疾病之一。随着近年来研究的不断深入,调节性细胞死亡(Regulatory cell death,RCD)的内在分子机制逐渐明朗,研究者发现RCD在DCM的发生发展过程中扮演了十分重要的角色。RCD有细胞凋亡、细胞坏死性凋亡、细胞焦亡、铁死亡、自噬等不同形式,且不同的RCD之间具有一定的相关性,可相互作用和调控。人为干预RCD在DCM中的作用有望在日后成为DCM的临床治疗靶点。本文从以上5种不同的调节性细胞死亡方式出发,简要阐述DCM的基础研究进展。

      • 1
    • 肠道菌群与微小RNA在炎症性肠病中相互作用关系研究进展

      孔冰慧, 白龙洲, 杨丽

      Abstract:

      炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)是一种慢性肠道疾病,其特征是对肠道环境因素的免疫反应失调。肠道菌群(Gut microflora,GM)的失调可能导致炎症过程的发展。已有大量研究表明粪菌移植、益生菌、益生元和膳食干预等可能发挥着重塑GM及治疗疾病的潜力。微小RNA (microRNA,miRNA)参与细胞发育、增殖、凋亡等生理过程。此外,它们在炎症过程中发挥重要作用,参与促炎和抗炎途径的调节。miRNA谱的差异可能是IBD诊断工具,并作为疾病的预后标志物。miRNA与GM的关系尚未完全阐明,近期研究表明miRNA在GM的调节和诱导生态失调中的作用;反过来,菌群可以调节miRNA的表达,改善肠道稳态。因此,本综述旨在描述GM与miRNA在IBD中的相互作用,寻找潜在IBD精准靶向治疗方法。

      • 1
    • 回毒银花散中各药及药物不同配比对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用研究

      李雨芬, 姜爽, 宋伍, 姜涛, 刘畅, 周豪芳, 唐亚婷, 苏鑫

      Abstract:

      目的:研究《外科正宗》中回毒银花散对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌能力以及毒力因子α-溶血素(Hla)活性和生物被膜形成的抑制作用,同时探究回毒银花散最佳配比为古方新用提供实验支撑。方法:通过最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)、纸片扩散法(K-B法)分析回毒银花散及组方中各味药对MRSA菌株USA300的抑制效果,溶血实验、Hla中和实验、Hla寡聚实验、免疫印记分析实验验证药物以何种形式抑制毒力因子Hla的活性,生物被膜形成实验评价回毒银花散对生物被膜的抑制效果,最后正交实验探究回毒银花散的最佳配比。结果:回毒银花散抑制MRSA菌株,MIC90为64 mg/mL,MBC为256 mg/mL,抑菌圈直径为7.50±0.50 mm。回毒银花散还通过抑制Hla的释放抑制Hla的活性,最小有效浓度(MEC)为16 mg/mL,抑制生物被膜形成的MEC为8 mg/mL。回毒银花散中金银花、黄芪只影响MRSA溶血活性以及生物被膜形成但不抑制细菌的生长,两药溶血活性MEC以及生物被膜形成MEC均为32 mg/mL;甘草抑菌能力较强,MIC90为8 mg/mL,生物被膜MEC为1 mg/mL,在亚抑菌浓度下未表现出抑制溶血活性。最后正交实验显示,当回毒银花散中金银花、黄芪、甘草的比例为1:2:4时,MIC90为16 mg/mL,溶血活性MEC为8 mg/mL,生物膜形成MEC为4 mg/mL,均为9组中最低。结论:回毒银花散在亚抑菌浓度下可影响MRSA的溶血活性以及生物被膜形成,其中金银花、黄芪、甘草的最佳比例为1:2:4。

      • 1
    • 维生素D对自发性糖尿病大鼠肠道菌群结构和多样性的影响

      陈琳, 谭洪兴, 郝丽萍, 李艳艳

      Abstract:

      【摘要】 目的 探讨维生素D(VD)对自发性糖尿病大鼠肠道菌群的影响。 方法 肥胖II型糖尿病大鼠(ZDF大鼠)随机分为正常对照组(Con)、VD对照组(VD)、模型组(T2DM)和VD干预组(VD+T2DM)。检测各组大鼠空腹血糖情况和口服糖耐量水平。采用16S rDNA测序技术检测大鼠肠道菌群变化,进行OTU分析(韦恩图)、Alpha 多样性分析(chao1、observed species、PD whole tree、shannon和simpson)、Beta 多样性分析〔主坐标分析(PCoA)〕、菌群结构及菌群物种差异性分析〔线性判别分析及影响因子(LEfSe)分析〕。结果 VD干预显著改善了T2DM大鼠的空腹血糖水平和胰岛素抵抗情况(P<0.05)。Alpha多样性结果表明T2DM组和VD+T2DM组的chao1、observed species、PD whole tree、shannon和simpson指数无显著差异(P>0.05);Beta多样性分析结果显示,与T2DM组相比,VD+T2DM组与Con组的物种相似度更高。各组大鼠肠道菌群的优势菌具有显著差异;相较于T2DM组,VD+T2DM组的Bacteroidetes丰度下降、Firmicutes和Clostridium XIVa丰度增加。结论 VD可改善T2DM大鼠的空腹血糖升高和胰岛素抵抗情况;VD可改善T2DM大鼠的肠道菌群结构,降低Bacteroidetes、升高Firmicutes和Clostridium XIVa丰度。

      • 1
    • 经皮给药系统皮肤模型的研究进展

      刘沿, 胡小垒, 许可洪, 赵海荣, 巫秀美, 杨自忠, 张成桂, 赵昱, 高鹏飞

      Abstract:

      经皮给药系统(transdermal drug delivery system, TDDS)的皮肤模型是指构建能够模拟人体皮肤结构和功能,并用于研究和评估药物在经皮给药过程中的吸收、渗透及药效等方面的实验模型。该模型在可代替传统人体皮肤实验,减少药物开发过程中对人体皮肤的使用,为经皮制剂的研发和提供一种便捷、可控且经济高效的方法。针对于经皮给药系统的皮肤模型,本文从药物经皮吸收途径出发,对目前常用的动物皮肤模型、人工皮肤模型、重组人体皮肤模型进行介绍,并对其优缺点及应用进行了分析,为经皮制剂的研发提供参考。

      • 1
    • AMPK:多样性调控机制与疾病治疗新视角

      宁静华, 张鑫, 张钰哲

      Abstract:

      单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(the AMP-activated protein kinase, AMPK)是一种保守的细胞能量感受器,在调控细胞生长、增殖、分化、自噬、磷酸化、串扰以及葡萄糖和脂质代谢等方面起着重要作用,当机体能量匮乏或某些极端情况时AMPK被激活,而在营养过剩时被抑制,以维持能量平衡。此外,AMPK信号通路还介导铁死亡发生的调控机制也体现了其独特作用,AMPK在不同细胞器里发挥特殊调控功能为疾病治疗提供了新的方向。这也是预防疾病的治疗靶标,如生殖系统疾病、衰老、癌症、炎症和心脏功能障碍等。该文综述了细胞能量不平衡对机体微环境造成的损害,AMPK通过多样性信号调控机制激发了其在疾病和药物中的潜在治疗潜力,为不同系统疾病提供了治疗新思路。通过综述AMPK信号通路的多样性调节机制,为靶向AMPK的癌症治疗和其他疾病的治疗提供理论参考。

      • 1
    • 急性缺血性脑卒中瘀毒互结证大鼠模型“脑-脾炎症耦联”机制探讨

      董一蕾, 刘悦, 李珺媛, 付建华, 张允岭, 姚明江

      Abstract:

      【摘要】目的:探讨急性缺血性脑卒中瘀毒互结证大鼠模型脑损伤与脾脏损害的相关性,分析对MCP-1/CCR2趋化因子信号轴的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、角叉菜胶联合干酵母菌瘀毒互结证组(单纯证候组)(Carrageenan/Yeast,CA/Y)、大脑中动脉阻塞组(单纯疾病组)(middle cerebral artery occlusion,MCAO)、大脑中动脉阻塞瘀毒互结证组(MCAO CA/Y),每组10只。CA/Y组与MCAO CA/Y组于造模首日经腹腔注射角叉菜胶10mg穔g-1、第二日背部皮下注射干酵母悬液2mg穔g-1,MCAO组及MCAO CA/Y组于第二日采用线栓法建立大脑中动脉阻塞模型。脑梗死模型术后24h,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,采用TTC染色法观察脑梗死面积百分比,取脾脏测定脾脏重量,采用Spearman相关系数分析脑梗死面积百分比与脾脏重量的相关性,苏木素-伊红(HE)染色法观察脑组织及脾脏组织病理形态,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测大鼠血浆中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)含量,western blot法检测缺血侧脑组织趋化因子C-C-基元受体2(Chemokine C-C-Motif Receptor 2,CCR2)蛋白表达。结果:与sham组比较,MCAO组和MCAO CA/Y组的神经功能缺损评分、脑梗死面积、血浆中MCP-1与IFN-γ含量均显著升高(P<0.01),脾脏重量显著下降(P<0.01),脑组织中CCR2蛋白表达明显上调(P<0.05);与CA/Y组比较,MCAO组和MCAO CA/Y组的神经功能缺损评分、脑梗死面积显著升高(P<0.01),脾脏重量显著下降(P<0.01),脑组织和脾脏组织中CCR2蛋白表达均明显上调(P<0.05);与MCAO组比较,MCAO CA/Y组的脑梗死面积显著升高(P<0.01),脾脏重量明显下降(P<0.05)。Spearman相关分析显示,脾脏重量与脑梗死面积百分比呈负相关(P<0.01,r=-0.9711)。病理形态学观察结果显示,MCAO CA/Y组病理改变最为严重,脑组织皮层中可见大脑液化坏死灶,病灶中神经元细胞排列稀疏,紊乱,体积萎缩,少部分空泡化和核固缩,大部分神经元细胞红色变性、坏死,小胶质细胞增生明显,小血管明显增多,间质脂质变性;脾脏组织部分动脉周围淋巴鞘细胞密度减低,边缘区增宽。结论:急性缺血性脑卒中瘀毒互结证大鼠模型脑损伤与脾脏损害存在相关性,可能与MCP-1/CCR2趋化因子信号轴参与“脑-脾炎症耦联”机制有关。

      • 1
    • 利多卡因调节Hippo-YAP信号通路对原位肝移植大鼠缺血再灌注损伤的影响

      刘玥, 艾克拜尔·努尔买买提, 叶建荣

      Abstract:

      目的:探究利多卡因(LID)对原位肝移植(OLT)大鼠缺血再灌注损伤的影响,并分析其作用机制。方法:将60只大鼠随机分为对照组、模型组、LID低剂量组、LID中剂量组、LID高剂量组、维替泊芬(Verteporfin)组,每组10只,除对照组外,其余大鼠构建OLT模型。苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,全自动生化分析仪检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-1β和IL-10水平,荧光探针法检测活性氧(ROS),硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(MDA),氮蓝四唑显色法检测超氧化物歧化酶(SOD),分光光度计法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),原位末端标记法(TUNEL)检测肝组织细胞凋亡,蛋白印迹法(WB)检测Hippo-YAP信号通路相关蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶(MST1)、磷酸化(p)-MST1、大肿瘤抑制因子1(LATS1)、p-LATS1、Yes相关蛋白(YAP)、p-YAP以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠肝组织出现损伤,肝细胞坏死且大量炎性细胞浸润,细胞凋亡率、血清AST、ALT、TBIL、LDH活性、肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax水平显著升高,肝组织IL-10、SOD、GSH-Px及Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,LID低、中、高剂量组肝组织损伤减轻,细胞凋亡率、血清AST、ALT、TBIL、LDH活性、肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax水平显著降低,肝组织IL-10、SOD、GSH-Px及Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP蛋白表达水平显著升高(P<0.05);Hippo-YAP信号通路抑制剂Verteporfin逆转了LID对OLT大鼠缺血再灌注损伤的改善作用(P<0.05)。结论:LID可能通过激活Hippo-YAP通路,减少炎症反应、氧化应激和肝细胞凋亡,对OLT大鼠肝缺血再灌注损伤发挥改善作用。

      • 1
    • Q热动物模型研究概况

      李进春, 尹家祥

      Abstract:

      Q热是由贝氏柯克斯体感染所致的一种人兽共患病,在自然界中广泛传播。动物模型是研究传染病的病原学、发病机制以及评价疫苗有效性的重要工具。近年来,无脊椎动物、啮齿动物和非人灵长类动物等多种动物模型已被用于Q热的相关研究。本文对Q热不同动物模型的研究现状进行了综述,讨论了不同模型的优缺点,总结了未来建模工作的需求和标准。

      • 1
    • 激光散斑衬比成像技术在慢性脑缺血动物模型中的应用研究进展

      唐鑫, 谭洁

      Abstract:

      激光散斑衬比成像技术可用可视化、可量化的方法实时动态测量组织或器官的微循环血流量。因其活体检测、实时成像及操作简单等优点,已在微循环检测的多个领域中应用。慢性脑缺血动物模型主要通过减少双侧颈总动脉向大脑输送血流量的方法造模,可造成脑供血长期不足。激光散斑衬比成像技术可通过对慢性脑缺血动物模型皮层脑血流量、侧支循环开放、神经血管耦合反应等进行观察分析,从而判断动物模型造模是否成功及干预方法对其的治疗效果。本文就激光散斑衬比成像技术在慢性脑缺血动物模型中的应用及其优缺点进行总结,以期为临床治疗和科研提供新思路。

      • 1
    • 小檗碱在缺血性脑卒中神经保护领域的研究进展

      李泓宇, 兰瑞

      Abstract:

      小檗碱是一种天然的异喹啉生物碱,最初可作为广谱抗菌药应用于临床治疗肠炎、消化性溃疡、慢性胃炎、肺炎等疾病,近年来随着对小檗碱药理作用的深入研究,越来越多证据证明,小檗碱对缺血性脑卒中具有神经保护作用,在本综述中,我们介绍了小檗碱对缺血性脑卒中危险因素的干预,还详细论述了小檗碱在缺血性脑卒中不同机制的神经保护作用,旨在对本领域的临床和基础研究提供一定的参考。

      • 1
    • 新生鼠心肌再生相关调节机制的研究进展

      陈梦琪

      Abstract:

      心血管疾病是一种危害人类健康的疾病,心肌梗死导致的收缩性心力衰竭是造成死亡的主要原因。既往观点认为,成年哺乳动物心脏中心肌细胞自我增殖更新能力有限,而近年来大量报道指出,哺乳动物在出生早期具备心肌再生的能力,并且其强度足以修复受损的心脏组织。新生鼠心肌再生现象的发现,为探讨影响心肌细胞增殖的相关机制研究提供了理想的动物模型,继而许多能够逆转心肌细胞周期阻滞和促进心肌细胞增殖的调控机制得以揭示。本文基于近几年开展的有关新生鼠心肌再生的研究,综述了影响心肌再生基因表达的因素(ncRNAs、转录因子等)、心肌再生相关信号通路、非心肌细胞(细胞外基质、免疫反应、心外膜等)对心肌再生的调节作用,以期为实现成年哺乳动物心肌损伤后心肌再生提供方向。

      • 1
    • 实验用鹌鹑遗传检测方法的初步建立

      何洋, 章秀林, 张秋宇, 张晓璐, 傅博, 王文栋, 杜小燕, 陈振文, 李长龙

      Abstract:

      目的 建立封闭群实验鹌鹑微卫星DNA遗传检测方法。方法 通过文献检索,筛选鹌鹑微卫星位点,利用种间转移法,在鹌鹑近缘物种—鸡和鸭筛选适合鹌鹑的微卫星DNA位点。提取鹌鹑肝组织DNA作为模板,并通过PCR扩增以及琼脂糖凝胶电泳技术,对相应的位点进行筛选。最后根据所选微卫星位点扩增情况、等位基因数目和多态性等,筛选出适用于鹌鹑遗传质量检测的微卫星位点组合并建立检测方法。结果 初步确定适用于封闭群实验鹌鹑遗传检测的23个微卫星位点组合。结论 初步建立了实验鹌鹑的遗传质量检测方法。

      • 1
    • 基于智慧教学环境下实验动物学教学的创新与探索

      杨子豪

      Abstract:

      目的 在传统的实验动物学授课环境中,存在师生互动较少,学生兴趣不足、学习投入度不高等现象。为进一步提升实验动物学的教学质量,方法 本教研室基于多媒体教室与智慧教室的不同教学环境,以《医学实验动物学》的理论课程教学为研究对象,对课程授课形式、教学模式、教学手段等方面进行创新与探索。研究通过问卷调查了解学生学习投入度变化和智慧教室使用偏好情况,采用NVivo质性分析软件编码分析师生课堂行为。结果 相对于传统教学,智慧教学环境下,学生的兴趣更高,课堂师生互动频次更多。同时,学生学习投入度显著高于传统教学,学生课内、后习题有更高的正确率,对实验动物学相关概念的把握程度更好。结论 智慧教学环境能给学生带来更好的感受和体验,提高学生对实验动物学的兴趣,增加课堂学习投入度,取得了良好的教学效果。

      • 1
    • 雷公藤多苷致小鼠早发性卵巢功能不全模型的不同时间点进展研究

      马林纳, 马堃, 范晓迪, 罗洁, 李佳妮, 张涵

      Abstract:

      目的 探讨雷公藤多苷致早发性卵巢功能不全小鼠模型相关指标的变化,确定采取干预措施的最佳时间点。方法 将40只ICR雌性小鼠随机分为对照组、A、B、C、D模型组,每组8只。对照组灌胃纯水14d(0.01ml/10g),其余各组给予雷公藤多苷混悬液(80mg/kg,0.01ml/10g)分别连续灌胃1d(A模型组)、3d(B模型组)、7d(C模型组)、14d(D模型组),并分批次取材。称量各组小鼠体重、湿重子宫和双侧卵巢;酶联免疫法检测各组小鼠血清FSH、LH、E2、P、AMH、INH-B、T含量;HE染色观察各组小鼠各级卵泡、黄体的数量及发育状态;TUNEL荧光染色法检测各组小鼠卵巢内凋亡面积;IHC法检测各组小鼠卵巢中VEGFA、CD34、EPO蛋白阳性表达;PCR法检测各组小鼠HIF-1α、SDF-1、CXCR4的mRNA表达量。结果 与对照组比较,A模型组各指标变化不符合POI成模标准;B模型组小鼠卵巢指数、子宫指数、体重显著降低(P<0.01),C模型组体重显著下降(P<0.01),D模型组卵巢指数明显下降(P<0.05);B、C、D模型组血清指标FSH、LH含量升高(P<0.01或P<0.05),E2、PROG、AMH、INH-B、T含量下降(P<0.01);B、C、D模型组始基卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡、排卵前卵泡及黄体数量明显减少(P<0.01或P<0.05),闭锁卵泡数量显著增多(P<0.01);A、B、C、D模型组TUNEL荧光染色凋亡面积明显增加(P<0.01或P<0.05);B、C、D模型组CD34、VEGFA、EPO阳性表达明显下降(P<0.01或P<0.05);A、B模型组HIF-1α、SDF-1、CXCR4的mRNA表达量明显升高(P<0.01或P<0.05)。与B模型组相比,C、D模型组相关指标发生明显变化,提示C、D模型较严重,趋向POF发展。结论 B模型组是卵巢功能从受损状态的POI发展到不可逆POF的转折点,提示雷公藤多苷给药3d是诱导POI疾病模型及药物有效干预的最佳时间。

      • 1
    • 非编码RNA在甲基苯丙胺诱导成瘾及神经毒性作用的研究进展

      张树威, 程浩, 王浩伟, 苗霖, 李怡, 官莉娜, 曾晓锋

      Abstract:

      甲基苯丙胺(Methamphetamine, METH)具有高度成瘾性和神经毒性,可导致滥用者的认知和记忆功能障碍。METH的危害不仅在于其本身的毒性,更在于吸毒者身心的高度依赖性,常造成精神障碍并引发暴力行为,给社会带来极大的安全隐患。非编码RNA(Non-coding RNA, ncRNA)不编码蛋白质,是在转录后水平调控基因表达的重要因子。研究表明,ncRNA在甲基苯丙胺诱导的成瘾及神经毒性中发挥了重要的调控作用,但其具体机制尚不清楚。本文就目前ncRNA调控METH诱导成瘾及神经毒性的研究进展进行综述,以期为ncRNA作为METH滥用者的法医学鉴定指标和潜在的药物干预靶点提供参考。

      • 1
    • 环状RNA在帕金森病中作用机制研究进展

      刘娟, 李彦杰, 秦合伟, 马璐瑶, 赵楠楠, 徐振华

      Abstract:

      帕金森病(Parkinson’s disease, PD)是一种以黑质中多巴胺能神经元退行性死亡为特征的神经退行性疾病,表现出一系列运动症状和非运动症状,对患者的生存质量产生严重影响。环状RNA(circularRNA, CircRNA)是一种共价闭环非编码RNA,在PD病程进展中发挥重要作用。本文就circRNA参与氧化应激,调节转录水平,神经炎症,自噬、α-突触核蛋白等方面进行综述。

      • 1
    • 基于数据挖掘的急性肝损伤动物模型应用分析

      胡毅龙, 张双丽, 邱广楠, 冯艺凡, 苗明三, 苗晋鑫

      Abstract:

      目的 探究各类急性肝损伤动物模型的造模要素,为急性肝损伤动物模型的建立和评价提供参考和建议。方法 在中国知网(CNKI)、万方(WanFang)、重庆维普(VIP)、中华医学期刊全文数据(Yiigle)、PubMed等数据库检索2002-2022年急性肝损伤动物实验文献,归纳总结文献中涉及到的急性肝损伤动物模型的动物种类、阳性对照药、造模方法、造模药及给药剂量、给药时间、检测指标,应用Excel、SPSS Modeler18.0、Cytoscape3.8.2对结果进行分析。结果 数据库共纳入896篇文献,急性肝损伤动物模型中应用最多的动物是雄性KM小鼠;造模方法以化学性肝损伤、酒精性肝损伤、药物性肝损伤、免疫性肝损伤四大类为主,分别对应的主要造模方式为:① 实验前24h腹腔注射10.0 mL 0.1%CCl4植物油;② 实验前16h灌胃12.0 mL 50.0%-56.0%乙醇;③ 实验前24h腹腔注射APAP 300mg/kg;④ 实验前8h尾静脉注射Con A 20mg/kg。模型的评价以肝脏病理指标为金指标,结合生化指标血清ALT、AST,肝组织匀浆SOD、MDA含量及活性为直接指标。结论 临床上急性肝损伤发病原因各异,在制备急性肝损伤动物模型时应根据特定的研究内容、研究特点选择对应的造模方法。

      • 1
    • 炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的研究

      陈乾, 王帝, 张定一, 贾赛蕾, 王丽辉, 曹玉净, 李燕红

      Abstract:

      目的 探讨炎调方通过调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的影响。 方法 取70只BALB/c小鼠随机分为空白组(10只)、假手术组(10只)和造模小鼠(50只)。空白组小鼠正常饲养,不予处理;假手术组小鼠仅开腹游离盲肠不进行穿孔结扎;通过盲肠结扎穿孔术(CLP)构建脓毒症急性胃肠损伤小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组,炎调方低、中、高剂量组,ROCK抑制剂组。采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠回肠组织病理学改变;ELISA 法检测各组小鼠血清白细胞介素-1β( IL-1β) 、白细胞介素-6( IL-6)、肿瘤坏死因子-α( TNF-α) 、白细胞介素-10( IL-10) 水平;免疫组织化学检测观察小鼠回肠组织细胞的增殖程度PCNA、Ki-67的表达;蛋白印迹法检测回肠组织凋亡蛋白Caspase 3 蛋白、Bax蛋白的表达;RT-qPCR检测小鼠回肠组织Rho/ROCK 通路上ROCK mRNA、MLC mRNA表达。结果 脓毒症急性胃肠损伤模型小鼠回肠组织肠黏膜萎缩明显、绒毛排列杂乱,可见断裂、脱落,上皮细胞细胞坏死脱落,炎症细胞浸润明显以及Chiu’s病理评分升高;较空白组和假手术组相比,模型组小鼠外周血血清中促炎介质水平(IL-1β、IL-6、TNF-α)和Caspase 3、Bax、ROCK mRNA、MLC mRNA水平升高,而抑炎介质水平(IL-10)和回肠组织中PCNA、Ki-67表达降低。与模型组比较,炎调方各组随着剂量的增加,回肠组织病理学改变均得到不同程度的改善:Chiu’s病理评分降低、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低、IL-10水平升高;且回肠组织中PCNA、Ki-67表达升高,Caspase 3、Bax、ROCK mRNA、MLC mRNA的表达降低。结论 炎调方通过调控Rho/ROCK信号通路抑制脓毒症急性胃肠损伤小鼠的肠上皮细胞凋亡,从而具有减轻肠道组织炎症反应,最终达到防止肠黏膜组织损伤的作用。

      • 1
    • 抑郁症动物模型的研究现状与趋势分析—基于CiteSpace的文献计量分析

      杨加辉, 林萌, 罗小泉, 罗涛, 龚美富

      Abstract:

      目的:借助文献计量学对抑郁症动物模型相关文献进行分析,从而更好地了解该领域的研究现状与热点。方法:本文作者从WoSCC数据库选取了近十年抑郁症动物模型的相关文献,并使用分析软件Citespace 6.1 R1(64-bit) Basic对相关的年度出版量、国家、机构、作者等进行分析。结果:通过分析本次研究纳入的文献可得知,近十年论分发表量呈现逐步增加并趋于稳定的趋势;美国发表的文章最多(256篇);Wegener Gregers是该领域中影响力最高的作者。结论:目前,该领域目前较多侧重于信号通路与治疗方法的研究,以确定抑郁症的发病机制并探求更好的治疗方法。本研究揭示了抑郁症动物模型相关的研究趋势与热点,以期帮助研究人员更好的了解最新情况。

      • 1
    • 性别差异对牛II型胶原诱导的类风湿关节炎模型的影响

      孙文婷, 万盈盈, 杨家熙, 王文乾, 王皓男, 叶婉婷, 寇秋爱

      Abstract:

      目的 构建雌性及雄性牛II胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,比较性别差异对CIA模型关节及关节外表现的影响。方法 选用雌性及雄性SD大鼠并注射牛II型胶原和弗氏完全佐剂诱导CIA模型,评估各组大鼠的一般情况、关节炎指数、足肿胀度、血清炎症因子及纤溶酶原激活物抑制剂水平、脾脏指数、膝关节及踝关节病理、右后足爪骨破坏情况、肺间质病变情况。结果 雌性CIA大鼠的关节炎指数在初次免疫后第21天较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),两组足肿胀度在观察的任一时间点均无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠血清肿瘤坏死因子α、白介素1β、脾脏指数均较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.001;P<0.001;P<0.05),纤溶酶原激活物抑制剂水平无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠膝关节和踝关节病理的炎症细胞浸润及滑膜增生评分较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05);雌性CIA大鼠膝关节软骨损伤及右后足爪骨破坏程度均较雄性显著升高(P<0.05);雌雄CIA大鼠均出现了肺间质炎症细胞浸润及轻度纤维化,但雌性比雄性的肺间质病变更重。结论 使用SD大鼠构建的雌性及雄性CIA模型均能兼具关节炎及肺间质病变,但雌性CIA大鼠的病变程度更重,在使用CIA模型进行RA相关研究时应关注性别差异带来的影响。

      • 1
    • NCTD通过靶向PPP5C对人白血病细胞增殖、凋亡的影响及机制

      张鑫, 崔冰洁, 于国兴, 王飞, 赵靓, 高娜, 杜静

      Abstract:

      目的 研究去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)通过靶向磷酸蛋白磷酸酶催化亚基5C(PPP5C)对人白血病NB4、K562细胞增殖、凋亡能力的影响及机制研究。方法 体外培养NB4、K562细胞,电转pcDNA3.1和PPP5C-pcDNA3.1质粒至NB4、K562细胞,遗传霉素(G418)筛选NB4、K562稳转细胞系。Western blot和qRT-PCR检测PPP5C蛋白和mRNA表达水平。采用CCK-8、迁移实验、Live & DeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒分别检测NB4、K562细胞的增殖能力、迁移能力和死细胞、活细胞的数量。将NB4、K562稳转细胞分为对照组和不同浓度NCTD组,分别用含有0、8、16、32 μg/ml NCTD的1640培养基培养;Live & DeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒检测死细胞率并对细胞形态进行拍照;Western blot检测各组细胞caspase 3、Cleaved caspase 3、JNK、p-JNK、p38、p-p38和α-Tubulin蛋白表达水平。结果 转染NB4、K562细胞后PPP5C表达水平显著提高,细胞增殖能力、迁移能力、抗凋亡能力显著增强;与对照组相比,NCTD各浓度组会促进细胞凋亡,且呈剂量依赖性;PPP5C过表达拮抗NCTD对白血病细胞的杀伤作用。结论 NCTD能够通过抑制PPP5C促进 NB4、K562细胞凋亡,抑制细胞的增殖。

      • 1
    • 中医药干预白血病干细胞免疫逃逸研究进展

      章美玲, 美玲, 崔亚茹, 陈抒鹏, 林智敏

      Abstract:

      白血病是目前临床上高发的急危重症,病死率极高,其中白血病干细胞(LSC)发生免疫逃逸是白血病诱导缓解后复发及进展的主要因素。中医药临床诊疗具有鲜明的辨证论治优势,基于“以平为期”的诊治目的,中医药辨治白血病强调恢复人体机能的“阴阳和谐”,有助于提高机体自身免疫力,符合干预肿瘤细胞免疫逃逸的机制。本文从文献研究及中医理论探讨中医药干预LSC免疫逃逸的机制及其研究进展。

      • 1
    • 江香薷炮制前后多糖含量及消炎止血抗氧化活性的影响

      马秋婷, 徐磊, 朱钰晨, 徐梦婷, 张文凯, 刘志勇

      Abstract:

      摘要:目的:探究生姜汁炮制前后江香薷多糖含量变化,以及对炮制前后多糖消炎止血抗氧化活性评价。方法:利用苯酚-硫酸法测定炮制前后江香薷多糖(江香薷多糖JXRPs,姜制江香薷多糖JZJXRPs)的含量;体内通过构建大鼠足肿胀模型和体外脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,采用细胞增殖(MTT)法选取最佳给药浓度,ELISA法测定细胞上清液中IL-6、IL-12、NO、IL-4和IL-10的表达来评价炮制前后多糖的抗炎作用;通过剪尾法观察小鼠的出血时间来评价其止血效果;最后,利用清除DPPH和ABTS的能力来评价其体外抗氧化活性能力。结果:生姜汁炮制前后江香薷多糖的含量分别为13%,22%;大鼠足肿胀结果显示:在注射角叉菜胶4h后,与模型组相比,江香薷多糖在给药剂量为200 mg/kg出现显著性差异(P<0.05),而姜制江香薷多糖在给药剂量为100 mg/kg时就可明显减轻大鼠足肿胀(P<0.05);体外抗炎结果显示,炮制前后的多糖均能显著抑制细胞分泌IL-6、IL-12和NO(P<0.01),促进细胞分泌IL-4和IL-10(P<0.01),且炮制后作用更强。小鼠断尾止血实验结果表明:与对照组相比,江香薷多糖组可以加快止血效果但无显著性差异,而姜制江香薷多糖在中剂量时有显著性差异(P<0.05),而高剂量有加快趋势但并无显著性差异;体外抗氧化活性结果显示:炮制前后的江香薷多糖对DPPH和ABTS皆有不同程度的清除能力,其中江香薷多糖的IC50值分别为0.2215 mg/ml和0.2110 mg/ml,姜制江香薷多糖的IC50值分别为0.1651 mg/ml和0.1884 mg/ml。结论:江香薷经生姜汁炮制后可促进多糖的溶出,增加多糖含量;炮制后江香薷多糖消炎止血及抗氧化能力均比江香薷多糖较强,可为江香薷多糖后续研究及临床应用奠定基础。

      • 1
    • SHP-2在肿瘤相关巨噬细胞中的研究进展

      武雪亮

      Abstract:

      摘要:肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)是肿瘤免疫微环境(TIME)中的优势细胞群,是TIME中免疫系统抑制和肿瘤细胞增殖最重要的调节细胞。Src同源2蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP-2)是一种非受体蛋白酪氨酸磷酸酶,该磷酸酶在从细胞表面到细胞核的信号传递中发挥重要作用,且是介导细胞增殖和分化的关键细胞内调节因子,参与多种生长因子和细胞因子的信号通路。最近的研究表明,SHP-2是决定TAMs功能的一个关键酶,但是由于其功能多变,在不同的实体瘤微环境中发挥不同甚至是相反的作用。基于此,本文综述了SHP-2在TAMs功能及在相关实体瘤中的作用,为肿瘤的免疫和靶向治疗提供坚实的科学依据。

      • 1
    • 朱砂根抗肿瘤作用研究进展

      任群利

      Abstract:

      朱砂根是中国传统中药,属于紫金牛科植物,其主要成分为香豆素类、皂苷类、黄酮类和挥发油等。随着对朱砂根抗肿瘤作用的深入研究,其活性抗癌化合物有岩白菜素,朱砂根皂苷A、B,百两金皂苷A、B,蒽贝素,主要通过诱导肿瘤细胞凋亡、增加肿瘤细胞毒性抑制细胞增殖、抑制肿瘤细胞转移和迁徙等多种途径在口腔癌、鼻咽癌、肝癌、结肠癌、膀胱癌、宫颈癌和白血病等肿瘤中显示出很高的抗肿瘤潜力。然而,朱砂根的抗肿瘤机制临床前实验数据缺乏高质量、多样本、多重复的随机对照试验,临床研究数据缺乏肿瘤预后及药效学和药代动力学相关试验数据,应设计精准研究实验和临床试验进一步探索挖掘朱砂根的药理作用。

      • 1
    • 外泌体对细菌感染免疫调节机制的研究进展

      书灵, 李智伟

      Abstract:

      外泌体是通过细胞内体途径生成的由脂质双分子层包裹的一种细胞外囊泡(EVs),包含蛋白质、脂质、DNA、 RNA 、miRNA、lncRNA等多种物质。外泌体参与细菌感染过程中的病原识别、抗原呈递、自噬调节、免疫激活和免疫抑制。研究表明外泌体miRNA、lncRNA和蛋白质在调节机体抗菌反应中发挥重要作用。本文综述了外泌体对几种胞内菌和胞外菌感染的免疫调节作用,为研究外泌体与细菌感染之间的相互作用提供依据。

      • 1
    • NHP实验动物在神经科学领域的应用及挑战

      胡凌峰, 范胜涛, 柳洁

      Abstract:

      【摘要】:目前,非人灵长类动物(NHP)在实验动物中的地位越来越重要,尤其是在神经科学领域的运用越来越被重视,包括在大脑发育研究、神经退行性疾病以及精神疾病等领域,凭借这种实验动物取得了许多重大的突破,但是随着其养殖和运用范围的增长,其生物安全问题和动物伦理问题应当被重视,本文从NHP的概述、在神经科学领域运用、养殖与操作、和动物伦理几个方面归纳总结了这种实验动物的在神经科学领域中的应用以及面临的挑战。

      • 1
    • 2型糖尿病周围神经病变动物模型评价的研究进展

      朱紫约

      Abstract:

      糖尿病周围神经病变是糖尿病常见并发症之一,目前对其发病机制的认识不够明确,且缺乏有效治疗手段,需要利用动物实验进行深入研究。造模成功与否的判定标准和周围神经功能恢复的评价方法是开展糖尿病周围神经病变动物实验的关键,但对于2型糖尿病周围神经病变模型评价方法的整理分析较缺乏。因此笔者查阅近年资料,从小神经纤维、大神经纤维两方面总结分析了2型糖尿病周围神经病变动物模型评价方法,并提出未来可能的发展方向,以期为相关研究提供参考。

      • 1
    • 机器学习在实验动物设施管理中的应用进展与展望

      徐骁, 陈琦

      Abstract:

      随着我国实验动物设施智能化水平逐步提升,积累了大量能够反映设施运行真实状态的数据。由于分析手段的缺乏,数据价值没有得到充分的挖掘。在大数据背景下,机器学习 (Machine Learning)算法已经在生物医疗、建筑科学等领域取得了显著的成果,也为其在实验动物设施管理中的应用提供了参考。本文对国内外机器学习方法应用于实验动物设施各系统中的内容、方法和模式进行了综述与展望。

      • 1
    • 用于多重免疫荧光染色的小鼠肺组织冰冻切片制备方法优化研究

      叶倩宸, 徐丹, 文富强, 陈俊, 汪涛

      Abstract:

      目的 优化小鼠肺组织冰冻切片制作方法,提高肺组织冰冻切片质量,有利于提高免疫荧光染色的特异性,获得更准确可靠的实验结果。方法 使用C57BL/6小鼠,分别采用传统冷冻后固定法、冷冻前固定法、改良灌注冷冻前固定法三种方法制作冰冻切片,经免疫荧光染色后使用激光扫描共聚焦荧光显微镜观察肺组织染色情况。使用荧光显微镜对肺组织切片进行全片扫描,计算单位面积内完整气道数量。结果 传统冷冻后固定法制作的小鼠肺组织冰冻切片,肺泡结构破坏,气道壁断裂严重,存在非特异性染色;冷冻前固定法制作的小鼠肺组织切片,肺泡和气道结构相对完整,但肺泡塌陷,部分气道结构破坏;改良灌注冷冻前固定法制作的小鼠肺组织切片,肺泡和气道结构形态均完整、清晰,多重免疫荧光染色定位准确。改良灌注冷冻前固定法制作的小鼠肺组织冰冻切片单位面积内完整气道(直径≥100 μm)数量高于冷冻前固定法(0.66±0.15个/mm2 vs. 0.33±0.14个/mm2,P<0.05),也显著高于传统冷冻后固定法(0.66±0.15个/mm2 vs. 0.02±0.04个/mm2 ,P<0.01)。结论 使用改良灌注冷冻前固定法制作冰冻切片,利于保持小鼠肺组织形态完整,利于获得高质量的多重免疫荧光染色结果。

      • 1
    • 探究不同类型饮水对小鼠生长和粪便菌群的影响

      吴旭颖

      Abstract:

      【摘要】 目的 探讨不同类型饮水对小鼠的生长和粪便菌群的影响。方法 选取SPF级NIH小鼠,分成5组,每组32只,雌雄各半,分别饲喂纯净水(对照组)、酸化水、碱化水、弱酸水和固体水,连续监测20天饮食和体重,实验结束后取动物粪便样本,用细菌16S rDNA通用引物扩增V3-V4区域,采用Illumina Miseq测序平台进行测序,使用生物信息学方法进行微生物菌落分析、Alpha多样性分析和Beta多样性分析。结果 在体重方面,不同pH值的饮水,雌性小鼠中,弱酸水高于对照组,其他组均低于对照组(P﹥0.05);雄性小鼠中,仅酸化水组的体重高于对照组,其他组均低于对照组,但组间无统计学差异(P﹥0.05);固体形态水的雌性和雄性小鼠体重均低于对照组的体重(P<0.05)。在采食和饮水量方面,碱化水组的雌性小鼠饮水和采食量低于其他组,固体水组的饮水量,雌性和雄性小鼠均低于其他组。经OTU聚类分析,稀释性曲线说明本次测序的数据量合理。NIH小鼠粪便菌群共分成五个门,其中拟杆菌门和厚壁菌门占主要地位,属水平上,主要是假紫单胞菌属、乳酸杆菌属、另枝菌属。5种类型饮水的粪便菌群丰度和多样性存在差异,alpha分析结果显示,在菌群的丰度和多样性上,酸化水组最高,而在菌群的多样性上,固体水组最低。beta分析显示,固体水组和对照组的粪便菌群最接近,其次分别为碱化水组、酸化水和弱酸水组。结论 通过对不同类型饮水的探索,揭示了固体形态饮水方式对小鼠体重、采食量、饮水量和粪便菌群影响较大,而不同pH值的饮水影响小鼠的粪便菌群丰度和多样性,尤其是酸化水对小鼠粪便菌群的影响更大。

      • 1
    • 基于Nrf-2/HO-1探究甘草锌对黄褐斑小鼠的治疗作用

      杜晓霜, 刘萍, 邓映, 杨洪秋, 杜宇

      Abstract:

      [摘要] 目的 探讨甘草锌对黄褐斑的治疗作用。方法 100 mJ/cm2 UVB照射联合15 mg/kg黄体酮注射进行黄褐斑造模,后对小鼠进行氨甲环酸(0.065g/kg)与甘草锌低(0.65 g/kg)/中(1.3 g/kg)/高剂量(2.6 g/kg)连续治疗14天。取皮肤进行HE、Masson-Fontana 染色;并检测SOD、MDA、GSP-Px、TNF-α、IL-1β及IL-6含量;浆蛋白Nrf-2,核蛋白Nrf-2、HO-1表达水平。结果 高剂量甘草锌明显减少黑素细胞形成、胶原细胞坏死与炎性浸润;显著上调GSP-Px、SOD表达,降低MDA、IL-6、IL-1β与TNF-α表达;上调核蛋白Nrf-2、HO-1表达,下调浆蛋白Nrf-2表达。结论 甘草锌激活Nrf-2/HO-1通路启动HO-1、SOD和GSP-Px高表达抗氧化应激,从而减少黑色素形成。

      • 1
    • 口腔菌群参与槟榔提取物诱发大鼠口腔溃疡的作用机制研究

      彭冬冬, 陈相池, 唐梓宁, 刘学武, 袁湘中, 李萌, 厉巧, 章泽恒

      Abstract:

      目的 通过槟榔提取物构建大鼠口腔溃疡模型,观察口腔内菌群结构变化以及多样性特征,探索口腔菌群参与槟榔提取物诱发大鼠口腔溃疡的发病作用机制研究,为临床防治口腔溃疡提供理论支持。方法 将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、药物治疗组,10只/组。大鼠口腔黏膜经皮下注射10g/mL的槟榔提取物,复制大鼠口腔溃疡模型。通过观察溃疡面积、溃疡评分、局部组织口腔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、白介素-8(IL-8)水平,并取口腔黏膜组织进行HE染色,观察其组织形态学变化,采用高通量测序方法分析口腔微生物菌群结构分布及微生物群落多样性。结果 与正常组比较,模型组大鼠溃疡面积显著增大(P<0.01),溃疡评分显著上升(P<0.01),口腔黏膜组织IL-2、IL-8、TNF-α水平均明显升高(P<0.01),大鼠口腔唾液的shannon指数显著增大(P<0.05),simpson指数显著减小(P<0.01),链球菌属(Strep-tococcus)、韦荣球菌属(Veillonella)均显著减少(P < 0.05、0.01),模型组大鼠口腔黏膜上皮细胞增生或局灶性坏死,黏膜固有层水肿、出血,并伴有大量的中性粒细胞和单核细胞浸润;与模型组比较,模型组大鼠溃疡面积显著减少(P<0.05),溃疡评分显著减少(P<0.05),口腔黏膜组织IL-2、IL-8、TNF-α水平均明显降低(P<0.05、0.01),大鼠口腔唾液的shannon指数显著减少(P<0.05),simpson指数显著增大(P<0.01),链球菌属(Strep-tococcus)显著增加(P < 0.001),葡萄球菌(Staphylococcus)明显减少(P < 0.01),口腔黏膜组织病变程度有明显改善。结论 槟榔提取物可成功复制大鼠口腔溃疡模型,推测槟榔提取物诱发口腔溃疡疾病发展可能与口腔菌群失衡及局部组织炎性介质有关。

      • 1
    • 5-Aza-CdR通过Notch1通路对小鼠海马神经发生的影响

      王报捷, 苏丽晴, 闫磊, 张志勇, 王志广, 包素雅, 邵国

      Abstract:

      【摘要】 目的:研究5-Aza-CdR对Notch1通路影响及神经再生的影响,并通过探讨对小鼠主动回避行为实验来探讨5-Aza-CdR对小鼠学习记忆能力的影响的作用。方法:将60只6~8周龄ICR雄性SPF级小鼠分为两组,通过侧脑室注射(i.c.v)给一组小鼠注射5-Aza-CdR,另一组注射BSA作为对照组。注射后24小时通过实时PCR和Western blot检测Notch1和HES1的mRNA和蛋白表达水平;通过激光共聚焦显微镜观察了5-溴-2’-脱氧尿苷(BrdU)阳性细胞和海马DG中Notch1的表达;用MS-PCR检测Notch1甲基化变化;通过测量被动回避测试和穿梭回避实验来评估小鼠的学习和记忆行为。结果:注射5-Aza-CdR使海马Notch1通路活性增加并促进DG区神经细胞再生,降低Notch1启动子区甲基化水平,小鼠主动回避行为能力得到提升。结论: 5-Aza-CdR对小鼠主动回避行为的影响可能与通过Notch1通路影响海马神经再生有关。

      • 1
    • 大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬的影响

      陶柏楠, 王咏兰, 洪岚, 袁林

      Abstract:

      目的:基于cGAS/STING信号通路研究大黄素(EMD)对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)细胞自噬的潜在作用。方法:采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MDC法检测MH7A细胞自噬情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cGAS、STING、p-STING、LC3-I、LC3-II、p62、Beclin-1的蛋白表达水平。结果:MDC染色结果提示,大黄素能够增强MH7A细胞自噬;Western Blot结果提示,大黄素可降低MH7A细胞自噬相关蛋白cGAS、STING、p-STING、P62的表达,增加LC3-II和Beclin-1的表达。加入自噬抑制剂3-MA后,MH7A细胞P62蛋白表达升高,LC3-II和Beclin-1蛋白表达降低。结论:大黄素可能通过下调cGAS/STING信号通路加速自噬,抑制MH7A细胞增殖。

      • 1
    • 细胞焦亡与动脉粥样硬化关系进展

      黄舒宁

      Abstract:

      细胞焦亡是一种程序性死亡方式,活化的天冬氨酸酶-1(caspase-1)可以诱导焦亡的发生,促进炎症因子的释放。近年来研究发现焦亡可能同动脉粥样硬化的发生、发展、转归密切相关。本文分别从内皮细胞焦亡、血管平滑肌细胞焦亡、巨噬细胞焦亡在动脉粥样硬化发展中的有关研究作一综述,旨在为动脉粥样硬化发病机制和诊疗研究提供新思路。

      • 1
    • Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响

      刘茂林, 王晓堂, 宋晓娜, 马云辉, 常潇琪, 宋国华

      Abstract:

      目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果 口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(Epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论 口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。

      • 1
    • MNU诱导SD大鼠下焦湿热证尿血(膀胱癌)模型研究

      常拓, 王洁, 李楠, 王天奇

      Abstract:

      目的:探讨N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱导SD大鼠下焦湿热证尿血——膀胱癌(BC)模型的造模过程和成模率。方法:通过膀胱灌注MNU的方法在造模前、造模中、造模后共计6个时间点进行分批次样品采集,并对膀胱组织进行H&E染色以了解膀胱原位癌的形成及发展过程。结果:实验过程顺利,在操作过程中大鼠未出现明显尿路损伤现象。通过本造模手法模型组大鼠膀胱内有明显的上皮增生、破损及大面积肿瘤形成和尿血现象。结论:MNU可以成功诱导SD大鼠下焦湿热证尿血模型(膀胱癌),且成模明显,死亡率低,实验数据可为膀胱癌模型的建立、改良和应用提供一定的参考。

      • 1
    • HIF-1α信号通路在离体器官冷保存中的保护作用

      王智洋, 郑斯阳, 朱亮

      Abstract:

      器官移植是机体器官功能衰竭的主要治疗方法,而供体器官在离体运输过程中的功能保护是决定器官移植成功与否的关键,如何保护离体运输过程中的供体器官功能是当今器官移植研究领域的热点问题之一。在低氧环境下,组织细胞会激活一系列基因的转录活性,这些基因参与血管生成、铁代谢、葡萄糖代谢和细胞增殖/生存。在需氧生物体内,缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factors-1α,HIF-1α)参与多种基因表达的调控,以维持组织、细胞在缺氧条件下的内环境稳态,从而适应缺氧状态。多项研究表明HIF-1α信号通路在离体器官冷保存过程中,对其遭受的冷缺血损伤具有重要保护作用,是当前离体器官冷缺血损伤保护机制的研究热点,干预HIF-1α相关信号通路有望成为离体器官冷保存过程中维护器官功能的新策略。

      • 1
    • 饮食诱导非酒精性脂肪性肝病动物模型的研究进展

      王佳林, 王重阳, 李杨, 陈贤玮, 袁中楠, 邹朝霞, 邹臣丹

      Abstract:

      建立科学有效的动物模型是完成疾病研究的关键步骤。饮食诱导是常见的建立非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD) 疾病动物模型的方法。常见饮食诱导的NAFLD的动物模型主要包括高脂高糖饮食诱导模型、高脂高胆固醇饮食诱导模型和胆碱缺乏饮食诱导模型,由于不同造模方式其摄入的营养成分不同,使得肝脏出现脂肪性变形、炎症及纤维化等病理特征不同。此外,不同动物模型的疾病进程、疾病严重程度以及适用的研究亦各有不同。本文通过分析比较常见的不同饮食诱导NAFLD动物模型在造模方式、造模时间、病理学特征、适用研究及相关优缺点,为NAFLD研究者选择动物模型提供参考。

      • 1
    • 小鼠肝脏中枯否细胞和肝星状细胞的分离提取

      马文萌, 吴昊, 闫昱彤, 孙逊, 郑倩倩

      Abstract:

      【】 目的 探讨小鼠肝脏枯否细胞和肝星状细胞的提取及纯化方法,为小鼠原代肝脏非实质细胞分离提取方法学提供参考和建议。方法 以体内胶原酶灌注消化为基础,使用Percoll、OptiPrep等不同的试剂和浓度梯度分别提取C57BL/6小鼠的肝脏枯否细胞和肝星状细胞并通过流式细胞仪及免疫荧光等方法验证纯化细胞的纯度。结果 两层Percoll法提取枯否细胞和两层OptiPrep法提取肝星状细胞可行,纯度可达90%以上,细胞得率为1-2×107/肝,细胞存活率在90%以上。细胞原代培养48h后,枯否细胞F4/80阳性细胞、肝星状细胞α-SMA阳性细胞均达75%以上。结论 小鼠肝脏中枯否细胞和肝星状细胞的分离提取方法完善可靠且具有成本效益和可重复性。

      • 1
    • 单细胞转录组技术在神经退行性疾病上的应用研究进展

      邬建飞, 王丙龙

      Abstract:

      神经退行性疾病(neurodegenerative diseases, NDs)是一类与中枢神经系统密切相关的精神疾病,以特定神经元群的形态异常和功能进展性丧失为主要特征,神经退行性疾病主要包括阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)、帕金森病(Parkinson’s disease, PD)、肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis, ALS)、多发性硬化症(Multiple sclerosis, MS)和亨廷顿病(Huntington’s disease, HD),目前还没有发现直接预防或治愈神经退行性疾病的策略。近年来,单细胞转录组技术(single-cell RNA-sequencing, scRNA-seq)被广泛应用于各种神经退行性疾病研究,并发现神经退行性疾病发病机制与脑中免疫细胞态密切相关,主要涉及线粒体功能、血管生成、炎症和突触传递等生物学过程,诱导性多功能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)疗法是治疗神经退行性疾病的潜在方案。本文对单细胞转录组测序技术在各种神经退行性疾病上的研究进行综述,以期对将来神经退行性疾病的预防和治疗提供参考。

      • 1
    • 斑马鱼肾损伤造模方法及评价指标的研究进展

      兰爱琳, 黄春华, 夏铭, 李茂娟, 汪思齐, 楼迪栋

      Abstract:

      肾脏主要功能为过滤血液、调节体液和电解质的平衡,对机体健康至关重要,并且肾脏容易受到体内外各种化合物毒性的影响, 致使肾功能损害,所以预防和治疗各种因素引起的肾功能损害亦是研究热点。斑马鱼在肾的形态、生理和功能等方面以及对化合物的反应与人类高度相似,是理想的动物模型。本文将对斑马鱼肾损伤造模方法及评价指标进行综述。

      • 1
    • 不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质功能区的微血管形态计量学分析

      郭民

      Abstract:

      【摘要】目的 观察不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区的微血管构筑,并进行定量分析。方法 采用改良碱性磷酸酶染色法染色C57BL/6小鼠大脑皮质运动皮质区(初级运动皮层、次级运动皮层)、感觉皮质区(初级体感皮层、次级体感皮层)、视觉皮质区(初级视觉皮层、次级视觉皮层)、听觉皮质区(初级听觉皮层、次级听觉皮层)、嗅觉皮质区(外嗅皮层、内嗅皮层)的微血管形态,OLMPUS BX51显微镜结合Image-Pro Plus 5.1进行图像捕获,采用Image-Pro Plus 5.1软件进行微血管长度密度(Lv)、微血管表面积密度(Sv)、微血管体积密度(Vv)的定量分析。结果 C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区微血管内的碱性磷酸酶表达随年龄的增加不断增加,成年时达到峰值;软脑膜血管进入皮质的方式分四种:T字形、Y字形、大弧形、小弧形;相同年龄不同部位的Lv、Sv和Vv显示运动皮质区、感觉皮质区、视觉皮质区、听觉皮质区、嗅觉皮质区呈现下降趋势,且运动皮质区和感觉皮质区与嗅觉皮质区比较Lv、Sv、Vv微血管密度有统计学意义(P<0.05)。老年组各功能区血管密度均较成年组降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论 改良后的碱性磷酸酶染色法能清晰显示C57BL/6小鼠大脑皮质微血管构筑,将为脑血管疾病研究及动物模型制备提供形态学参考。

      • 1
    • 中医药治疗缺血性卒中的表观遗传学机制

      付雪琴

      Abstract:

      表观遗传学是分子生物学的一个分支,是生命科学领域后基因时代的研究热点,应用表观遗传修饰研究方法是缺血性卒中发病机制的前沿领域,是阐释中医药治疗缺血性卒中的靶点及其作用机制的有效途径。目前,缺血性卒中的的病因病机尚未完全明确,现代医学治疗尚有不足,而中医药治疗缺血性卒中具有独特的优势和广阔前景。最新研究发现,中医药能参与调控异常表观遗传修饰治疗中风。本文主要从中风的中医理论的表观遗传学基础以及从DNA甲基化、非编码RNA和组蛋白修饰三个方面在中风治疗及中医药研究中的应用入手,阐释中医药治疗中风的表观遗传作用,以期为该病的中医药治疗提供新思路和科学依据

      • 1
    • 京尼平苷通过PI3K/Akt通路促进糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合

      陈晓燕

      Abstract:

      目的 探讨京尼平苷对糖尿病性皮肤溃疡的保护作用及其机制。方法 将大鼠分为正常组、模型组、京尼平苷亚组(Gen-L: 200 mg/kg; Gen-H: 500 mg/kg)。在糖尿病大鼠皮肤溃疡造模后,各组大鼠均灌胃生理盐水或京尼平苷(n = 6)。每天给药1次,每天记录各组伤口愈合情况及炎症情况。在糖尿病性皮肤溃疡治疗7天后,分别通过测量皮肤溃疡创口面积、组化切片与TUNEL染色及Western blot蛋白免疫印迹法量化分析创面愈合,细胞凋亡及其相关调节蛋白表达的变化情况。结果 与模型组相比,京尼平苷(200 mg/kg和500 mg/kg)口服能显著促进糖尿病大鼠创面愈合,增加损伤处的收缩。在糖尿病大鼠皮肤创面凋亡研究中,京尼平苷亚组TUNEL染色阳性细胞明显减少(P<0.05)。京尼平苷能显著抑制皮肤炎症,促进创面修复可能与促进PI3K和Akt蛋白磷酸化有关。结论 京尼平苷通过抑制炎症反应和细胞凋亡促进糖尿病大鼠皮肤创面修复。

      • 1
    • 定坤丹对子宫内膜异位症大鼠PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

      武雪亮

      Abstract:

      【摘要】目的:探索定坤丹对子宫内膜异位症(EMs)大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法:通过异位移植子宫内膜组织,构建EMs大鼠模型,随机分为5组:模型组(M组)、定坤丹低(1.13g/kg)剂量组(DKP-L组)、定坤丹中(2.26g/kg)剂量组(DKP-M组)、定坤丹高(4.52g/kg)剂量组(DKP-H组)、孕三烯酮(60mg/kg)组(GES组),每组12只,另取12只正常SD大鼠只开腹不异位移植子宫内膜组织,设为假手术组(Sham组),以药物分组干预后处死大鼠,测定各组大鼠异位病灶重量与异位子宫内膜体积,免疫组织化学染色检测大鼠异位子宫内膜微血管密度(CD31阳性率)与VEGF、MMP-9表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清VEGF、MMP-9、iNOS、TNF-α水平;蛋白免疫印迹实验检测大鼠异位子宫内膜PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达。结果:与Sham组相比,M组大鼠异位子宫内膜微血管密度、VEGF与MMP-9表达、血清VEGF、MMP-9、iNOS及TNF-α水平、异位子宫内膜织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR明显升高(P<0.05);与M组相比,药物干预组大鼠异位子宫内膜体积、异位病灶重量、异位子宫内膜微血管密度、VEGF与MMP-9表达、血清VEGF、MMP-9、iNOS及TNF-α水平、异位子宫内膜p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR均降低,且DKP-L、DKP-M、DKP-H组之间呈剂量依赖性(P<0.05);DKP-H组和GES组相比,大鼠各指标无明显差异(P>0.05)。结论:定坤丹可减轻炎症,抑制EMs大鼠异位内膜生长,可能是通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号途径传导实现的。

      • 1
    • 蒙药哈它各其-7通过HIF-1α促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合的实验研究

      董成海, 澈力格尔, 潮日雅, 满柱, 包永林, 龚利民

      Abstract:

      目的:研究蒙药哈它各其-7通过缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合的治疗价值。方法:成年雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、蒙药组、细胞因子组,除对照组外、其余3组采用腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病模型,4组均在背部制备溃疡创面,1周后蒙药组给予哈它各其-7治疗、细胞因子组给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗,连续2周。检测空腹血糖(FBG),创面面积,创面病理改变,创面中晚期糖基化终末产物(AGEs)、AGE受体(RAGE)、HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及白介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、总抗氧化力(T-AOC)水平。结果:糖尿病组、蒙药组、细胞因子组的FBG均高于对照组(P<0.05)且三组间FBG无显著性差异(P>0.05);与对照组比较,糖尿病组的溃疡创面面积、镜下未修复组织范围增大,创面组织中AGEs、RAGE的表达水平及IL-1β、IFN-γ、MDA水平增加,T-AOC水平及HIF-1α、VEGF表达水平降低(P<0.05);与糖尿病组比较,蒙药组、细胞因子组溃疡创面面积、镜下未修复组织范围缩小,创面组织中AGEs、RAGE的表达水平及IL-1β、IFN-γ、MDA水平降低,T-AOC水平及HIF-1α、VEGF表达水平增加(P<0.05)且蒙药组的各项指标优于细胞因子组。结论:蒙药哈它各其-7促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合,抑制AGEs及RAGE表达并激活HIF-1α是可能的分子机制。

      • 1
    • 恒古骨伤愈合剂对db/db小鼠的降血糖和改善肠道菌群作用研究

      邓绍友, 赵玉兰, 王佩锦, 李蓉, 赵宏斌, 角建林, 郑红

      Abstract:

      目的 探索恒古骨伤愈合剂对db/db小鼠血糖和肠道微生物的影响。方法 将野生小鼠作为对照组,db/db小鼠随机分为模型组和恒古骨伤愈合剂治疗组;灌胃给药12周后,检测空腹血糖,血清糖化血红蛋白和胰岛素含量,使用16S rDNA技术分析小鼠肠内容物菌群变化及预测菌群功能。结果 与模型组比较,恒古骨伤愈合剂降低db/db小鼠空腹血糖(P < 0.01)、血清糖化血红蛋白(P < 0.01)、胰岛素抵抗指数(P < 0.01),升高胰岛素含量(P < 0.01);恒古骨伤愈合剂增加db/db小鼠盲结肠有益菌丰度,降低害菌丰度,其中马文氏菌属的丰度显著升高(P < 0.01);恒古骨伤愈合剂抑制了db/db小鼠菌群D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢、鞘脂代谢、半乳糖代谢的降低及赖氨酸降解、硫中继系统、丙酸代谢的升高(P < 0.05)。结论 恒古骨伤愈合剂具有降血糖功效和调节db/db小鼠肠道微生态平衡的作用。

      • 1
    • 自噬在系统性硬化症发病机制中作用的研究进展

      李鑫, 孙晓林, 王永福

      Abstract:

      【摘要】系统性硬化症 (systemic sclerosis,SSc) 是一种以血管病变、皮肤纤维化为特征,可引起多器官结构和功能损害的自身免疫性疾病,SSc发病机制复杂,可能与遗传、环境因素、免疫机制异常等有关。自噬是一种在进化上保守的机体内自降解过程,可通过多种途径参与机体免疫及自身免疫性疾病发病。本文主要综述自噬通过调节免疫细胞、介导信号通路调控SSc血管病变和纤维化的研究进展。

      • 1
    • miRNAs在大鼠酒精性肝损伤中的作用研究初探

      从美丽

      Abstract:

      目的 探讨miRNAs在大鼠酒精性肝损伤病变过程中的作用及其机制。方法:将30只雄性SD大鼠随机分成模型组和对照组,模型组灌胃56%白酒,对照组灌胃蒸馏水,连续8周;解剖取肝组织,采用大鼠miRNA芯片对肝脏中miRNAs进行检测,对其表达量进行分析,对差异miRNA进行靶基因预测,并采用Gene Ontology(GO)和KEGG Pathway富集分析了解差异miRNA靶基因的功能,使用Cytoscape构建差异miRNA-mRNA-Pathway调控网络进一步筛选调控关键miRNA与关键通路,qRT-PCR对挑选的miRNA进行表达量验证分析。结果:通过比较分析模型组和对照组芯片数据,共筛选出差异表达miRNA 12个(P<0.05,Fold change≥2),其中上调2个,下调10个。差异miRNA靶基因GO分类注释显示,差异miRNA与抗氧化活性、代谢过程、生物调控、细胞杀伤、信号转导、酶调控活性等生物功能存在密切关联。差异miRNA靶基因KEGG Pathway通路分析显示,AMPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、Hippo信号通路、wnt信号通路、癌症、自噬、胰岛素抵抗、Ras等信号通路可能在酒精性肝损伤病变过程中发挥着重要的调控作用。通过构建差异miRNA-mRNA-Pathway调控网络筛选出的Hub miRNA和通路有miR-145-5p、miR-107-3p、miR-297、Hippo信号通路、癌症、PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路等。qRT-PCR结果显示挑选验证miRNA表达变化趋势和基因芯片结果一致。结论:本研究建立了大鼠酒精性肝损伤miRNA表达谱,提示miR-145-5p、miR-107-3p及miR-297可能在肝脏酒精性病变过程中起着重要的作用。

      • 1
    • 骨桥蛋白通过LGALS3BP调控PI3K/AKT通路促进肝癌细胞迁移

      邓林林, 安日问, 赵方新, 林婷, 刘翠华, 红梅, 武建强, 张烜

      Abstract:

      摘要:目的 探讨骨桥蛋白(OPN)通过半乳糖凝集素3结合蛋白(LGALS3BP)促进肝癌细胞迁移的作用及机制。 方法 体外培养人肝癌细胞系SMMC-7721、稳定转染空真核表达载体的人肝癌细胞系SMMC-P及稳定转染OPN基因的人肝癌细胞系SMMC-OPN。qRT-PCR检测细胞中OPN及LGALS3BP mRNA表达情况,Western blot检测细胞中OPN、LGALS3BP和PI3K/AKT通路蛋白表达水平,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。SMMC-OPN细胞中分别转染靶向LGALS3BP的小干扰RNA (si-LGALS3BP)及阴性对照(si-NC)后,检测细胞迁移能力变化和PI3K/AKT通路蛋白相对表达水平变化。 结果 相较于亲本细胞SMMC-7721和转染空载体的细胞SMMC-P细胞,高表达OPN的SMMC-OPN细胞迁移能力明显增强,而且细胞中LGALS3BP mRNA及蛋白表达水平显著上调,同时p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT 蛋白相对表达量均显著升高。沉默LGALS3BP表达后,SMMC-OPN细胞的迁移能力受到明显抑制,同时p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT蛋白相对表达水平均显著降低。结论 OPN可以通过上调LGALS3BP的表达激活PI3K/AKT通路,从而促进肝癌细胞迁移。

      • 1
    • 两种常用压力性损伤大鼠模型的建立方法与效果评价

      刘艺, 李晓雷, 梁新培, 王娜, 马姗, 张新平, 贾汝福, 张素, 李贤

      Abstract:

      目的:通过比较两种不同的压力性损伤大鼠模型的建立方法,探索更合适的压力性损伤动物模型制备方法。方法:将18只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=6),模型A组(n=6)和模型B组(n=6)。对照组:对模拟造模部位脱毛后进行碘伏处理。模型A组:采用单纯深部组织异物植入法进行纵向加压;模型B组:使用磁铁加压法进行横向加压,记录制备各组大鼠产生压力性损伤模型的全程时间及各分期时间,观察大鼠的一般情况,并进行成模率、死亡率、感染率的比较。 结果:肉眼观察到模型A组和模型B组均逐渐出现受压部位红肿、溃烂,出现渗血、渗液并伴有坏死现象。模型A组与模型B组产生压力性损伤全程时间比较:两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。模型A组与模型B组产生压力性损伤各期时间比较:I期两组之间差异无统计学意义(P>0.05);II期两组之间差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ期两组之间差异有统计学意义(P<0.05);Ⅳ期两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠精神、运动评分与模型A组、模型B组比较有显著性差异(P<0.05)。模型A组大鼠与模型B组大鼠一般状态有明显区别,均出现毛色黯淡,活跃度下降的现象。模型A组大鼠与模型B组成模率为100%。模型A组死亡率、感染率高于模型B组,分别为33.34%、16.70%。 结论:两种方式均可成功制备压力性损伤四期模型,二者既有共性也有各自特点,磁铁加压法用时短,大鼠一般状态良好,死亡率和感染率低,适合短时间内干预性研究;单纯深部组织异物植入法用时长,需要大鼠有一定耐受性,感染率高,死亡率高,可运用于长期的观察类压力性损伤大鼠的研究。

      • 1
    • 中医药调控谷氨酸治疗抑郁症的研究进展

      李超

      Abstract:

      谷氨酸是中枢神经系统中主要的兴奋性神经递质,也是潜在的神经毒素。 在抑郁症发生发展过程中存在海马区谷氨酸浓度增高的现象,谷氨酸发生堆积时,将 对神经元和脑组织造成严重损伤,加重抑郁状态。因此谷氨酸堆积可能是造成抑郁症 的重要机制。星形胶质细胞、谷氨酸转运体及谷氨酸受体对谷氨酸的浓度起着重要的 调控作用。本文综述了中医药疗法通过调控星形胶质细胞、谷氨酸转运体、谷氨酸受 体影响谷氨酸,进而治疗抑郁症的作用机制,为探究中医药治疗抑郁症提供新的思路。

      • 1
    • 探究社会性不同的犬的认知能力是否存在差异

      宋梦煜, 郭怡君, 赵雪榕, 白静, 周子娟, 王靖宇

      Abstract:

      目的:探究社会性不同的拉布拉多犬认知能力是否存在差异。 方法:参照瑞典工作犬协会(the Swedish Working Dog Association)创建的犬气质评估测试(Dog Mentality Assessment,DMA),使用DMA测试中的社会接触、游戏Ⅰ、距离游戏、扮鬼和游戏Ⅱ5个子测试中的12个行为变量来评估犬的社会性,根据评分标准对中国导盲犬大连培训基地提供的49只拉布拉多犬的社会性行为变量进行评分,使用聚类分析将其分为社会性高分组(n=15)和低分组(n=34)。根据Bray等人的犬认知发展系列测试(dog cognitive development battery,DCDB)建立了新的犬认知能力测试体系,对犬的社会线索使用、无法解决任务、抑制控制、认知灵活、工作记忆和多步骤解决任务等不同领域的认知能力进行测试,记录犬在测试中的行为表现及持续时长,统计分析社会性不同的犬认知能力是否存在差异。 结果:社会性高分组与低分组的犬在无法解决任务、抑制控制测试和多步骤解决任务中的行为变量上存在显著差异。在无法解决任务中,社会性高分组的犬注视人时长显著高于社会性低分组的犬(P=0.008),注视人潜伏时长显著低于社会性低分组的犬(P=0.0001)。在抑制控制测试中,社会性高分组的犬选择正确率显著高于社会性低分组的犬(P=0.034),选择时长显著低于社会性低分组的犬(P=0.039)。在多步骤解决任务中,社会性高分组的犬完成木桩任务数量显著高于社会性低分组的犬(P=0.044);操作木桩时长占比显著低于社会性低分组的犬(P=0.05);完成骨头盘任务平均时长显著高于社会性低分组的犬(P=0.037);操作骨头盘时长占比显著低于社会性低分组的犬(P=0.038)。涉及到可操作仪器的测试中,社会性高分组的犬注视人时长高于社会性低分组的犬,操作仪器时长低于低分组的犬,但经统计无显著差异(P>0.05)。 结论:社会性不同的犬的认知能力存在差异。社会性好的拉布拉多犬表现出更强的认知能力,它们在测试时抑制冲动的能力更强,完成多步骤解决任务的能力更强,在遇到无法解决任务时更倾向于转变策略向人寻求新线索而不是执着于操作仪器。

      • 1
    • 通过加权基因共表达网络构建结肠癌的预后风险标志物及其临床意义

      李轶辉

      Abstract:

      目的 结肠癌(Colon adenocarcinoma,COAD)患者预后较差。因此筛选结肠癌预后相关基因,建立结肠癌新的预后风险评估模型。方法 基于癌症基因组图谱(The cancer genome atlas, TCGA)和基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中结肠癌相关数据,分别作为训练集和验证集。采用加权基因共表达网络分析(Weighted correlation network analysis,WGCNA)、Cox回归模型结合最小绝对值选择与收缩算子(Least Absolute Selection and Shrinkage Operator,LASSO)回归分析筛选结肠癌预后相关基因并构建预后模型,受试者工作特征(Receiver Operating Characteristic,ROC)结合生存曲线验证模型的准确性,并建立列线图。根据中位值将患者分为两组,免疫细胞阳性比例分数(Immune cell proportion score,IPS)评估两组患者免疫治疗反应。结果 最终筛选出15个特征基因,以此建立结肠癌患者预后预测模型的ROC曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)>0.6,高风险组生存率显著低于低风险组(P<0.05),该模型可较好的区分高低风险组结肠癌患者。低风险组患者拥有较高的免疫细胞阳性比例(Immune cell proportion score ,IPS)评分(P=0.026),对免疫治疗反应效果更好。结论 建立的结肠癌预后模型对结肠癌高风险和低风险人群的生存情况具有较好的预测能力。

      • 1
    • 针刺干预青光眼动物实验研究报告质量评价

      李佳贤, 梁丽娜, 李亚敏, 许凯, 黄子杨, 李晓宇, 金昱, 周维

      Abstract:

      目的 通过SYRCLE动物实验风险评估工具、ARRIVE 2.0指南和GSPC清单评价针刺干预青光眼的动物实验报告质量。方法 计算机检索CNKI、VIP、万方、Sinomed、PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library等数据库,寻找针刺干预青光眼的动物研究文章。使用SYRCLE工具对纳入研究进行偏倚风险评估,使用ARRIVE 2.0指南和GSPC清单对研究报告质量进行评价,通过 Excel和SPSS软件进行统计分析。结果 最终有30篇文章符合纳入/排除标准被纳入最终的分析,其中SYRCLE工具的10项条目中有6项条目低风险率<50%,非低风险条目主要集中在选择性偏倚、实施偏倚和测量偏倚方面。ARRIVE 2.0指南的22项必备子条目中有12项低风险率<50%;16项推荐子条目中有9项低风险率低于50%。GSPC清单19项子条目中有12项子条目低风险率<50%,随机化、盲法、伦理声明、饲养场所和饲养、动物护理和监测以及方案注册是ARRIVE 2.0指南和GSPC清单的非低风险条目。结论 当前公开发表的针刺干预青光眼动物研究方法学质量和实验报告质量普遍不高,对多个条目的描述尚不完善,可能影响读者对实验结果能否进一步转化为临床研究的判断。建议未来的研究严格按照动物实验偏倚风险工具以及报告指南进行,以提高动物实验的设计、实施和报告,保证实验步骤的可重复性及实验结果的再现性,为结果转化到临床提供可靠的证据。

      • 1
    • 过表达miR-181a-5p的口腔癌皮下移植瘤小鼠模型的小肠代谢组学研究

      吴学海

      Abstract:

      【摘要】目的 通过检测口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢通路的变化,分析过表达miR-181a-5p对皮下移植瘤小鼠小肠中代谢组和代谢物组的影响。方法 实验分为三组,空白对照组(Control),阴性对照组(Negative control,NC组)以及实验组(Over expression of miR-181a-5p,OE组)。将不同组别处理后的细胞混悬液,通过皮下注射到M-NSG重度免疫缺陷雌性小鼠右侧腹股沟中上部,构建成口腔癌皮下移植瘤小鼠模型。按时记录小鼠体重变化,对小鼠小肠组织进行HE染色,观察各组病理变化。采用超高效液相色谱-串联飞行时间质谱联用仪和串联Orbitrap质谱联用仪检测NC 组、OE组和 Control组小鼠小肠中的代谢物,使用XCMS预分析原始数据,质量评价样本数据,鉴定Control组与NC组、NC组与OE组的差异代谢物,进行KEGG富集分析获取差异代谢通路。结果 Control和 NC组小肠组织中共鉴定出170种差异代谢物。代谢物富集的显著性信号通路包括胆碱代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,γ-氨基丁酸(GABA)神经突触代谢,甘油磷脂代谢,环磷酸腺苷(cAMP)信号通路代谢,癌症中心碳代谢以及烟酸和烟碱胺代谢通路。NC组和OE组相比,小鼠小肠中检测到VIP(Variable Importance in the Projection)值大于2的差异代谢物有16种,显著性差异代谢物包括甘油磷酰胆碱、棕榈酸、3-羟基丁酰肉碱、β-羟丁酸等。代谢物富集到的显著性差异通路为胆碱代谢通路。 结论 口腔癌皮下移植瘤可引起小鼠小肠的代谢物发生变化,主要改变了小肠中与能量代谢相关的代谢物。过表达miR-181a-5p影响口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠代谢物,代谢物富集通路为胆碱代谢通路。

      • 1
    • 基于HIF-1α/自噬途径探讨二氯化钴调控3T3-L1脂肪细胞炎症反应及胰岛素抵抗的机制

      岳欣欣, 付洋, 李怡然, 尹晓燕, 于飞, 傅全威

      Abstract:

      目的 探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl2)调控3T3-L1脂肪细胞自噬活性从而改善脂肪细胞炎症反应和胰岛素抵抗的机制。方法 常规培养和诱导分化3T3-L1脂肪细胞成为成熟的脂肪细胞,CoCl2作为低氧诱导剂在不同时间、不同浓度条件下干预成熟的脂肪细胞,确认CoCl2干预脂肪细胞自噬活性的最佳时间和浓度,随后根据此时间和浓度分组,分为对照组(0h组)、12h、24h、48h CoCl2处理组,收集细胞样本进行相关指标测定。MTT法评价各组细胞存活情况;Western blot分析各组细胞HIF-1α及其下游蛋白葡萄糖转运蛋白Glut-1、自噬相关蛋白LC3Ⅱ和Beclin 1的表达情况;免疫荧光法检测各组细胞的自噬水平;ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6分泌情况。结果 150μmol/L CoCl2是调控3T3-L1脂肪细胞自噬水平的最佳干预浓度;150μmol/L CoCl2干预成熟的脂肪细胞24h时,自噬活性水平增高,细胞存活率无显著的减低,脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin 1、Glut-1蛋白的表达水平也显著升高,但炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平无明显增加;48h时自噬水平减低,细胞存活率出现显著的减低,脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin 1、Glut-1蛋白的表达水平减低,炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平出现增加趋势。结论 150μmol/L CoCl2可以调控脂肪细胞自噬水平增加,自噬水平的增加以依赖HIF-1α的方式活化,从而使自噬发挥保护脂肪细胞的作用使其免受炎症损伤和改善脂肪细胞胰岛素抵抗。

      • 1
    • 小胶质细胞-星形胶质细胞的交互作用及其介导的神经炎症在阿尔茨海默病中的研究进展

      胡鑫, 汪蒨, 张晨曦, 郑慧慧, 李鹏洋, 赵红晔, 邓凤春

      Abstract:

      阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种侵袭性神经退行性疾病,其发病原因迄今未知。神经炎症是中枢神经系统(CNS)中由小胶质细胞和星形胶质细胞激活的难以自主消退的慢性炎症反应,与多种炎症因子和血脑屏障(BBB)相关联。近年来的研究表明,神经炎症已经成为AD中继β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积和神经原纤维缠结(NFTs)后的第三大病理特征。本文就小胶质细胞与星形胶质细胞及其交互作用进行总结与分析,并对小胶质细胞与星形胶质细胞的交互作用在神经炎症和AD中的作用进行整理、讨论。以期为小胶质细胞和星形胶质细胞参与AD神经炎症的病理性改变提供参考。

      • 1
    • miRNA在缺血性脑卒中神经保护领域的研究进展

      李泓宇, 兰瑞

      Abstract:

      缺血性脑卒中是一种具有高残疾率和死亡率,严重者可危及生命的脑血管疾病,在全球范围内具有沉重的社会经济负担。缺血性脑卒中的病因及病理过程是由多种分子过程介导,这些分子机制部分转录后被动态调节。越来越多证据表明,微小RNA(micro-ribonucleic-acid,miRNA)作为转录后基因沉默的重要介质在基因表达和缺血性脑卒中病理过程中起着至关重要的作用。在本综述中,我们介绍了miRNA在缺血性脑卒中不同机制中的神经保护作用。由于通过特定的药物和非药物治疗促进或抑制miRNA的表达可能有益于缺血性脑卒中的恢复,本文还详细论述了关于miRNA在缺血性脑卒中的临床诊断和治疗相关作用,旨在对本领域临床和基础研究提供一定的参考。

      • 1
    • miRNAs对消化系统肿瘤肝转移影响的研究进展

      杨斯棋, 金明, 邹亲玲

      Abstract:

      肝脏是最常见的肿瘤远处转移脏器,miRNA的表达对肿瘤肝转移的过程非常重要。本文整理分析相关miRNA对消化系统中恶性肿瘤发生肝转移起调节作用的研究进展。查阅相关文献介绍miRNAs在结直肠癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌这几类消化系统肿瘤肝转移过程中发挥的调节作用,为肿瘤肝转移的诊断、治疗及研究提供帮助。

      • 1
    • 小鼠慢性酒精中毒性脑损伤模型的建立

      蔡瑜

      Abstract:

      【摘要】 目的 建立有效稳定的小鼠慢性酒精中毒性脑损伤模型。 方法 将C57BL/6J小鼠随机分成对照组和模型组,模型组小鼠除基础饮用水中添加5%(v/v)酒精外,同时灌胃28%(v/v)酒精,灌胃剂量前两周呈梯度增长(从0逐渐增加至6 g/kg体重),随后四周维持在6 g/kg体重,对照组饮用水中不添加酒精同时灌胃等量生理盐水。实验结束后,通过行为学实验测定小鼠的认知功能和运动能力,通过组织病理染色检测小鼠脑组织的形态学变化。 结果 与对照组比较,模型组小鼠在行为学实验中表现出认知功能和运动功能障碍,并且,模型组小鼠脑组织病理染色显示海马区形态损伤和细胞坏死。 结论 实验成功有效建立了小鼠慢性酒精中毒性脑损伤模型,该模型可应用于慢性酒精中毒性脑病的机制和治疗药物研究。

      • 1
    • HBV感染DLBCL患者的分子机制及预后研究

      袁和锐, 郭鹏翔

      Abstract:

      近年来乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者患弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)呈上升趋势,且其病因复杂,治疗棘手,因此受到国内外学者的广泛关注。本文在回顾分析国内外学者研究的基础上,进一步探讨了HBV感染致DLBCL发生、发展的机制及相关患者的临床预后情况,最终发现在基因组、转录组层面,HBV可能主要通过诱导BCL6、FOXO1、ZFP36L1等基因的改变,以及通过HBV的X蛋白激活各种调控基因,从而诱导淋巴细胞克隆性增生,最终形成淋巴瘤;而针对患者的临床预后评估,主要通过分析比较患者发病年龄、性别、脏器受累情况、国际预后指数(IPI)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平、增殖指数(Ki-67)、bcl-2、bcl-6、炎症指标等因素,旨在为DLBCL的临床诊治及基础研究提出理论依据。

      • 1
    • lncRNA SNHG16通过调控miR-570对肝癌细胞索拉非尼耐药的机制研究

      柳扬, 范伟, 丁洁

      Abstract:

      目的:分析长链非编码RNA SNHG16(Long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene16,lncRNA SNHG16)通过调控微小RNA-570(miR-570)对肝癌细胞索拉非尼耐药的机制研究。方法:采用实时荧光RT-PCR检测人体正常肝脏组织、肝癌细胞组织中HepG2、HepG2-R细胞的lncRNA SNHG16、miR-570表达,用MTT法、流式细胞仪、Transwell试验检测细胞增殖、凋亡及侵袭,Western Blot法测定细胞CyclinD1、P21MMP-9、MMP-2表达变化。结果:与正常的肝细胞相比,肝癌细胞中lncRNA SNHG16表达升高,miR-570表达下降(P<0.05)。与HepG2-P组相比,HepG2-R组LncRNA SNHG16、IC50值表达上升,miR-570、HepG2-R细胞在索拉非尼浓度为1、2、4、8、16μmol/L中的抑制率水平下降(P<0.05)。HepG2-R pcDNA SNHG16作为过表达组,其lncRNA SNHG16表达明显升高(P<0.05),与HepG2-R pcDNA组对比,HepG2-R pcDNA SNHG16组的迁移的细胞个数、CyclinD1、P21、MMP-9、MMP-2表达减低,抑制率、凋亡率、P21表达上升(P<0.05)。与HepG2-R anti-miR-NC组相比,HepG2-R anti-miR-570组miR-570水平降低(P<0.05),与HepG2-R anti-miR-NC组比较,HepG2-R anti-miR-570组CyclinD1、MMP-9、MMP-2水平降低,抑制率、凋亡率、P21水平升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,与miR-NC组相比,miR-570使WT-SNHG16荧光素酶活性减低(P<0.05),而对MUT-SNHG16荧光素酶活性影响较小(P>0.05)。过表达lncRNA SNHG16可使HepG2-R细胞中miR-570表达下降(P<0.05),与HepG2-R pcDNA SNHG16 miR-NC组相比,HepG2-R pcDNA SNHG16 miR-570组迁移的细胞个数、CyclinD1、MMP-9、MMP-2水平升高,抑制率、凋亡率、P21水平降低(P<0.05)。结论:lncRNA SNHG16通过调控HepG2-R肝癌细胞的耐药性,其机制与lncRNA SNHG16靶向调控miR-570有关,为临床治疗肝癌细胞提供新的靶点。

      • 1
    • 基于PI3K/Akt/NF-kB信号通路探讨高尿酸血症合并非酒精性脂肪肝机制

      龚晓红, 李桓

      Abstract:

      摘要:目的:基于PI3K/Akt/NF-kB信号通路研究高尿酸血症合并非酒精性脂肪肝(HUA-NAFLD)的发病机制。方法:64只SD大鼠,随机分为空白组、HUA组、NAFLD组、HUA-NAFLD组,每组16只,分别于8、12周末取材,对大鼠血清生化指标进行检测;苏木素-伊红法(HE)和油红O染色法观察肝脏组织病理变化和脂质沉积情况;蛋白免疫印迹法(WB)检测肝脏组织PI3K/Akt/NF-kB信号通路相关蛋白表达水平。结果:与其余3组比较,HUA-NAFLD组大鼠肝脏指数明显升高(P<0.05)。与空白组比较,HUA组UA、LDL水平升高,NAFLD组HDL水平降低,HUA-NAFLD组UA、CHOL、TG、LDL水平升高,HDL水平降低(P<0.05);与HUA组比较,NAFLD组UREA水平降低(P<0.05);与HUA-NAFLD组比较,HUA组CHOL、TG、LDL水平降低,NAFLD组UA、TG、LDL降低(P<0.05)。HE和油红O染色结果显示,与其余3组比较,HUA-NAFLD组大鼠肝细胞出现大量脂肪空泡,肝索结构模糊,病变更重。WB结果显示,与空白组比较,NAFLD组AKT、p65磷酸化水平显著升高,HUA-NAFLD组AKT、PI3K、p65、IKKβ磷酸化水平显著升高(P<0.05);与HUA-NAFLD组比较,HUA、NAFLD组AKT、p65磷酸化水平显著下降,HUA组IKKβ磷酸化水平显著下降(P<0.05);与HUA组比较,NAFLD组p65磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结论:HUA-NAFLD组较单个疾病组生化指标更加异常,肝脏病变程度更重,PI3K/Akt/NF-KB信号通路可能在HUA、NAFLD以及HUA-NAFLD发病过程中发挥重要作用。

      • 1
    • 大蒜素通过JAK2/STAT3信号通路改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化

      甘林望, 李乾程, 高利超, 刘琦, 李莹, 王玉洁, 欧三桃

      Abstract:

      目的 探讨大蒜素改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化的相关机制。 方法 培养人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)后将其进行2次分组,分组1:①对照组;②8.5 mM D-葡萄糖诱导组(8.5 mM DG组);③17 mM D-葡萄糖诱导组(17 mM DG组);④34 mM D-葡萄糖诱导组(34 mM DG组);⑤68 mM D-葡萄糖诱导组(68 mM DG组)。其中除对照组外,其余组合分别用8.5 mM、17 mM、34 mM、68 mM的D-葡萄糖诱导48 h。分组2:①对照组;②34 mM D-葡萄糖诱导组(HG组);③34 mM D-葡萄糖+低剂量大蒜素诱导组(AL-L组);④34 mM D-葡萄糖+中剂量大蒜素诱导组(AL-M组);⑤34 mM -葡萄糖+高剂量大蒜素诱导组(AL-H组);⑥34 mM D-葡萄糖+JAK2抑制剂诱导组(JAK2组)。其中HG组用34 mM的D-葡萄糖诱导48 h,AL-L组、AL-M组、AL-H组用34 mM的D-葡萄糖预处理6h后分别用10 ng/mL、20 ng/mL和40 ng/mL大蒜素诱导48 h,JAK2组加入1 μmol/L AG490预处理6 h后用34 mM的D-葡萄糖诱导48 h。Elisa检测HPMCs上清的IL-6、TNF-α和IL-1β的含量;CCK-8检测细胞增殖并观察形态;Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin、α-SMA、MCP-1、p65、p-p65蛋白的表达情况。结果 与对照组相比,高糖诱导组HPMCs的相对存活率明显降低(P<0.01),细胞形态表现异常,促进上皮细胞-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)发生的α-SMA、N-cadherin和 Vimentin表达明显上调,抑制EMT发生的E-cadherin蛋白表达明显下调,JAK2/STAT3信号通路被激活从而导致EMT的发生(P<0.01);而大蒜素能明显促进高糖诱导后的HPMCs增殖,恢复异常的细胞形态,调节与EMT发生的相关蛋白水平从而改善HPMCs的上皮间质转分化;与高糖诱导组相比,大蒜素处理组HPMCs的促炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α明显降低,促炎症蛋白p-p50和MCP1表达明显下调,表明大蒜素能改善EMT引起的炎症。结论 大蒜素可通过抑制JAK2/STAT3信号通路调节EMT发生的标志蛋白、炎症信号蛋白及炎症因子水平从而改善高糖诱导的EMT及炎症。

      • 1
    • 金丝桃苷调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对肾病综合征大鼠自噬反应的影响

      孔露娇, 王心, 刘静, 郭晓阳, 薛明伟

      Abstract:

      目的 探究金丝桃苷(Hyp)对肾病综合征(NS)大鼠肾脏自噬及AMPK/mTOR/ULK1通路的影响。方法 32只6周龄SD大鼠分为正常组(N组)、NS组、Hyp组(60 mg/kg Hyp)、Hyp AMPK抑制剂组(Hyp CC组)(60 mg/kg Hyp 0.2 mg/kg CC),每组8只。给药结束后,全自动分析仪检测24 h尿液总蛋白(UTP)、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)和白蛋白(ALB)水平;HE染色和TEM观察观察肾病理形态和超微结构;Western blot检测肾中自噬、足细胞及AMPK/mTOR/ULK1通路蛋白表达;免疫荧光染色观察自噬体和足细胞的定位。结果 相比于N组,NS组肾小球体积变大、肾小管萎缩或部分消失、基底膜增厚;UTP、BUN、Scr、基底膜厚度、足突宽度及p-AMPK/AMPK比值显著增加(P<0.05),ALB、LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、Atg5、Atg7、NPHS2蛋白水平、NPHS2、Beclin-1相对荧光强度及p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1比值显著降低(P<0.05)。相比于NS组,Hyp治疗可改善肾小球形态,降低UTP、BUN、Scr、基底膜厚度、足突宽度及p-AMPK/AMPK比值(P<0.05),增加ALB、LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、Atg5、Atg7、NPHS2蛋白水平、NPHS2、Beclin-1相对荧光强度及p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1比值(P<0.05)。AMPK抑制剂组CC能减弱Hyp的促自噬和保肾脏作用。结论 Hyp可能通过激活AMPK/mTOR/ULK1通路促进肾细胞自噬活性,减轻NS大鼠的足细胞损伤等肾脏病变。

      • 1
    • 黄芩苷对注意缺陷多动障碍动物模型SHR大鼠核心症状影响研究

      张永婷, 周荣易, 马丙祥, 吴晨蕾, 谢新月, 丁雪颖

      Abstract:

      目的 通过旷场和Morris水迷宫实验,探究黄芩苷调控注意缺陷多动障碍动物模型核心临床症状的疗效及其潜在机制。方法 将30只SHR大鼠随机分为模型组、盐酸哌甲酯(MPH)组、黄芩苷组、黄芩苷+丁苯那嗪组、MPH+丁苯那嗪组,每组6只,另设6只WKY大鼠为对照组。MPH组(1.5 mg/kg)、黄芩苷组(150 mg/kg)按体重(1 ml/100 g)灌胃给药,空白组、模型组给等量生理盐水,MPH+丁苯那嗪组、黄芩苷+丁苯那嗪组在灌胃给药同时,按体重(0.5 ml/100 g)腹腔注射丁苯那嗪(3 mg/kg)。连续给药4周。在规定时间进行旷场和水迷宫实验,记录并分析实结果。结果 MPH组和黄芩苷组在旷场实验中运动总距离和平均速度较模型组显著减小(P<0.05),在水迷宫实验中潜伏期较模型组显著缩短(P<0.05)、在目标象限运动距离和停留时间占比及穿越平台次数较模型组显著增加(P<0.05),且这两组间无明显差异;黄芩苷+丁苯那嗪组在旷场实验中运动总距离和平均速度较模型组显著减小(P<0.05),较黄芩苷组明显增大,在水迷宫实验中潜伏期较模型组显著缩短(P<0.05),较黄芩苷组显著延长(P<0.05)、在目标象限运动距离和停留时间占比较模型组明显增加,较黄芩苷组显著减少(P<0.05)。结论 黄芩苷能够改善SHR大鼠多动、冲动、注意力不集中等核心症状,其疗效的发挥可能与调控DA囊泡转运相关。

      • 1
    • 六君子汤乙酸乙酯提取物干预CAFs条件培养基下EC9706细胞能量代谢的机制研究

      陈星, 娄翔宇, 尚艺婉, 周哲旭, 刘洋, 刘娅茹, 胡啸博, 陈玉龙

      Abstract:

      目的:探索六君子汤乙酸乙酯提取物(EAELD)对癌相关成纤维细胞(CAFs)条件培养基下食管癌EC9706细胞能量代谢影响的分子机制。方法:噻唑蓝(MTT)法检测EAELD对EC9706增值活性的影响;比色法检测六君子汤对CAFs条件培养基(CAFM)下EC9706细胞上清中乳酸及葡萄糖含量的影响;seahorse能量代谢分析系统检测EAELD对CAFM下EC9706细胞能量代谢的影响;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(western blot)法检测EAELD对能量代谢相关分子mRNA及蛋白表达的影响。结果:与DMEM相比,除10μg/mL组外,EAELD对EC9706细胞增殖活性均有明显抑制作用(P <0.05),选取抑制浓度(IC30)25μg/mL,半抑制浓度(IC50) 40μg/mL,作为低、高剂量组进行后续实验。在CAFM培养的EC9706细胞各组中,EAELD低、高剂量组都能显著降低非线粒体耗氧、基础呼吸值、最大呼吸值、合成ATP耗氧量、备用呼吸能力、基础糖酵解、补偿糖酵解、糖酵解潜能(P <0.01),减少EC9706细胞上清乳酸含量(P <0.01),下调GLUT1的mRNA表达(P <0.05、P <0.01),下调p-PKM2、HK2、PKM2、MCT1蛋白表达(P <0.01);EAELD高剂量组能够下调EC9706细胞的线粒体耗氧与基础糖酵解比值(P <0.05),减少EC9706细胞葡萄糖摄取(P <0.05),下调p-PKM2、GLUT1的蛋白表达(P <0.01、P <0.05);EAELD低剂量组能够下调MCT1的mRNA表达(P <0.05)。结论:六君子汤乙酸乙酯提取物能够干预CAFs条件培养基下EC9706细胞的能量代谢,其机制可能与EAELD调控HK2、PKM2、GLUT1、MCT1、MCT4的mRNA和蛋白表达相关。

      • 1
    • 基于数据挖掘的骨肉瘤动物模型应用分析

      喻帅克, 罗茂丽, 王连睿, 周天豹, 白莉, 苗明三

      Abstract:

      目的 总结骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)动物模型造模要点,为完善其造模方法和评价指标提供参考与建议。方法 通过检索中国知网、万方数据库、PubMed中OS动物模型相关文献,建立数据库,总结其实验动物种类、性别、造模方法、癌细胞株种类、检测指标等,建立数据库进行统计分析。结果 共纳入284篇文献,统计分析发现:OS模型动物首选BALB/c-nu/nu裸鼠(227例,75.17%),其次是SD大鼠(20例,6.62%)。造模方式多选用背部皮下细胞液移植法(66例,21.85%)、腋部皮下细胞液移植法(55例,18.21%)或原位细胞液移植法(51例,16.89%)等;癌细胞株种类以人源MG-63细胞(100例,33.11%),鼠源UMR-106细胞(39例,12.91%)为主;检测指标主要选择肿瘤组织表观指标(238例,83.80%)、肿瘤组织HE染色(129例,45.42%)、动物表观指标(94例,33.10%)、肿瘤组织免疫组化(89例,31.34%)。结论 目前OS模型多选用4~6周龄BALB/c-nu/nu裸鼠作为实验动物,采用人源MG-63细胞异位移植法(背部、腋下移植)建立OS动物模型,模型检测指标以动物表观指标、肿瘤表观指标、肿瘤组织病理进行整体评价。但目前依旧缺少与临床吻合度高的动物模型制备及评价标准,本文通过文献挖掘、数据分析总结其优缺点,以期为建立良好的OS模型提供参考,更好地应用于OS机制研究及新药开发。

      • 1
    • 中等强度和高强度间歇运动对非酒精性脂肪肝小鼠心肌线粒体自噬的影响

      何苗, 李佳航, 刘鑫, 杨威, 吴良文, 范晶晶

      Abstract:

      目的 探讨中等有氧运动和高强度间歇运动对非酒精性脂肪肝小鼠心肌线粒体自噬的影响及可能机制。方法 将40只3周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通饲养组(Chow组,n=10)和高脂饲养组(HFD组,n=30)。第18周,将HFD组体重超过普通饮食组20%~30%(包含 20%)者判定为肥胖小鼠(n=26),通过随机抽选2只小鼠做肝脏油红O染色,确定NAFLD小鼠模型建立成功。随机筛选出16只NAFLD小鼠分成中等强度有氧运动组(MICT组)和高强度间歇有氧运动组(HIIT组),每组8只,分别对两组进行8周的运动训练,干预结束后称重取材。Masson染色观察心肌纤维化情况;透射电镜观察心肌细胞超微结构;Western Blot检测心肌中线粒体自噬和线粒体生物发生等相关蛋白表达。结果 ⑴与Chow组相比,HFD组体重显著增加、心指数明显下降;与HFD组相比,MICT和HIIT组体重明显增加、MICT组心指数上升。⑵ Masson结果显示,与Chow组相比,HFD组心肌内胶原纤维含量显著增加,且电镜下心肌肌纤维排列杂乱、断裂,心肌形态杂乱不堪,线粒体肿胀、嵴发生断裂且模糊不清并夹杂多个脂滴;与HFD组相比,MICT组和HIIT组心肌内胶原纤维含量显著性减少,透射电镜下心肌肌纤维排列略有恢复,z线清晰可见,线粒体变性程度略有改善,且脂滴也略有减少,其中,MICT组对心脏组织结构改善效果优于HIIT组。⑶Western Blot结果显示,与Chow组相比,HFD组心肌组织中PINK1和Beclin1表达水平无明显变化,Parkin、LAMP1和PGC-1α表达显著下降(p<0.01),p62蛋白表达和LC3-II/LC3-I比值显著升高(p<0.05,p<0.01);与HFD组相比, MICT和HIIT组PINK1和Beclin1表达水平无明显变化,PGC-1α表达呈上调趋势,其中MICT组Parkin、LAMP1表达显著升高(p<0.05), p62蛋白表达和LC3-II/LC3-I比值明显降低(p<0.05,p<0.01),HIIT组Parkin、LAMP1表达水平具有上调趋势,LC3-II/LC3-I比值和p62蛋白表达明显降低(p<0.05,p<0.01)。结论 不同方式有氧运动均能有效改善NAFLD小鼠心肌结构和功能损伤,其作用途径可能是通过刺激心肌细胞内线粒体自噬通量,激活自噬,恢复细胞正常自噬功能,从而改善心肌细胞损害,且中等连续有氧运动改善效果更佳。

      • 1
    • 医学领域应急科技攻关项目的管理创新机制探究

      陈昱君, 苏美洋伊, 王清玄, 高苒

      Abstract:

      目的 应急科技攻关项目凸显“应急”和“攻关”两个关键,即如何高效的取得目标成果。承接此类项目的机构需要制定合理的项目管理机制,为应急科技攻关项目的成功落实保驾护航。本文旨在通过调查研究,调研目前医学领域应急科技攻关项目管理存在的问题,分析可改进的措施,提高科研管理的效率和质量。 方法 本文结合作者实践经验,调查相关单位的科研管理运行现状,并就科管和科研人员最关心的管理环节开展问卷调研。基于调查反映出来的问题,再组织专家座谈进行论证。 结果 通过调研发现:1、目前针对应急科技攻关项目的管理规范鲜有制定;2、科研人员最关注的是行政审批和项目经费的问题;3、科管人员最关注的是如何在合法合规的前提下,同时满足上级单位的管理以及科研人员的需求。结论 应急科技攻关项目与常规科技项目相比有其特殊之处,在立项审批、经费使用、资源分配和安全等方面可以进行管理优化,本研究针对应急科技攻关项目管理提供创新方案,为各科研单位对此类项目的管理提供有益的经验和借鉴。

      • 1
    • 复方木姜叶柯活性茶对高尿酸血症肾病小鼠尿酸和肾功能的影响

      园园, 曾亚南, 杜小浪, 慕泽泾, 廖承东, 章常华, 曹岚

      Abstract:

      摘要:目的 探究复方木姜叶柯活性茶对高尿酸血症肾病小鼠的尿酸和肾功能的影响,为开发治疗高尿酸血症肾病药物和功能性食品提供实验依据。方法 采用氧嗪酸钾和腺嘌呤建立高尿酸血症肾病小鼠模型。小鼠随机分为正常组、模型组、苯溴马隆阳性药组(10 mg?kg-1?d-1)、复方木姜叶柯活性茶高、中、低剂量组(10g?kg-1?d-1、3.33g?kg-1?d-1、1.11g?kg-1?d-1)。末次给药1h后,取尿液,采用CBB法测定尿蛋白(UP),脲酶法检测尿素氮(UUN);眼眶取血,采用酶比色法检测血清中尿酸(UA)含量,脲酶法检测血清中尿素氮(BUN)含量,酶联免疫法检测血清中白介素细胞6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量;荧光定量分析法检测小鼠肾脏中尿酸盐转运蛋白1(URAT1)及葡萄糖转运体9(GLUT9)含量;取肾脏组织,HE染色观察组织病理改变情况。结果 与正常组相比,模型组小鼠UP、UUN、UA、BUN、IL-6、URAT1及GLUT9水平显著增高(P<0.01),TNF-α水平增高(P<0.05),肾组织结构正常。与模型组相比,苯溴马隆阳性药组中UP、UUN、UA、BUN含量显著降低(P<0.01),IL-6及TNF-α水平降低(P<0.05),URAT1水平增加,肾脏有少量肾小球萎缩变形,肾偶见肾小管扩张,无炎性细胞浸润。与模型组相比,复方木姜叶柯活性茶高剂量组中UP、UUN、UA、BUN、IL-6及URAT1水平显著降低(P<0.01),TNF-α与GLUT9水平降低(P<0.05);中剂量组中UP、UA、UUN含量及IL-6、URAT1、GLUT9水平显著降低(P<0.01),BUN与TNF-α水平降低(P<0.05);低剂量组中UP、UUN、UA含量及IL-6、URAT1水平显著降低(P<0.01),BUN含量及 TNF-α、GLUT9水平降低(P<0.05);复方木姜叶柯活性茶组小鼠肾脏情况均有所改善。结论:复方木姜叶柯活性茶能降低高尿酸血症肾病小鼠的尿酸,对肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与抑制尿酸重吸收有关,具体机制有待于进一步研究。

      • 1
    • HDAC6抑制剂通过保护肾小球内皮细胞线粒体改善糖尿病肾病

      陈小丽

      Abstract:

      目的 探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)特异性小分子抑制剂Tubastatin A对糖尿病肾病(DN)小鼠肾损伤的保护作用和机制。方法 C57BL /6小鼠随机分为3组:对照组、DN组和Tubastatin A组。DN组和Tubastatin A组行包膜下肾切除术以切除右肾,并通过腹膜内注射STZ诱导DN。Tubastatin A组接受Tubastatin A治疗,每3天一次,连续治疗8周。RNA测序分析DN组和Tubastatin A组肾脏组织中差异表达基因。通过透射电子显微镜评估线粒体受损情况,以及DHE染色估计肾组织中的ROS水平。将小鼠肾小球内皮细胞(mGEC)暴露于高葡萄糖培养基(HG))或40 mM甘露醇(对照),加入或不加入Tubastatin A处理。采用蛋白质印迹分析HDAC6、肾损伤标志物KIM1和EMT标志物的表达情况,以及流式细胞仪检测细胞中线粒体ROS和细胞凋亡情况。结果 DN小鼠肾组织和暴露于HG的mGEC细胞中HDAC6表达上调,并与物KIM1水平升高一致。组织学分析显示DN小鼠的显著形态学变化,包括肾小球肥大、肾小球系膜基质积聚、肾小球基底膜增厚、肾小管基底膜增厚和出现肾小球、肾小管间质纤维化;Tubastatin A治疗缓解了这些变化。与对照DMSO相比,Tubastatin A在HG处理下显著降低了mGEC细胞中KIM1、HDAC6、α-SMA、N-钙粘蛋白、波形蛋白表达(P<0.05),并上调E-钙粘蛋白表达(P<0.05)。RNA测序揭示了揭示了与DN组小鼠相比,Tubastatin A组小鼠肾脏组织中与ECM-受体相互作用和与三羧酸(TCA)循环相关的基因富集。透射电子显微镜显示Tubastatin A组小鼠的肾小球内皮细胞受损线粒体的比例较DN组显著降低(P<0.01)。DHE染色显示Tubastatin A组小鼠肾组织中ROS水平较DN组降低(P<0.01)。在mGEC细胞中,Tubastatin A处理下调了HG诱导的mGEC细胞中的线粒体ROS水平(P<0.01),以及减少了细胞凋亡(P<0.05)。结论 Tubastatin A改善了HG诱导的肾小球内皮细胞损伤和DN进展,其作用机制与保护线粒体稳态和抑制EMT发生相关。

      • 1
    • 人羊膜上皮细胞移植对大鼠子宫瘢痕模型子宫内膜的改善及对MMP-8、VEGF的影响

      王静

      Abstract:

      目的:探讨人羊膜上皮细胞(hAECs)移植对大鼠子宫瘢痕模型子宫内膜的改善及对基质金属蛋白酶8(MMP-8)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:建立大鼠子宫瘢痕模型,并随机分为模型组及移植组,每组各18只,另取18只大鼠作为假手术组。移植组大鼠于子宫瘢痕处注射hAECs,模型组及假手术组仅给予等量PBS。4周后,取各组8只大鼠子宫组织,HE染色观察组织形态学变化,测量子宫内膜厚度和腺体数量;Masson染色观察子宫内膜纤维化情况;细胞角蛋白和整合素β3免疫组化染色分别评估子宫内膜生长和容受性;RT-qPCR技术检测子宫内膜组织中MMP-8、VEGFA mRNA表达水平;Western blotting法检测组织中MMP-8、VEGFA蛋白表达水平;8周后,取各组剩余10只大鼠进行妊娠能力测定。结果:与假手术组比较,模型组及移植组大鼠子宫内膜厚度、腺体数、角蛋白和整合素β3 IOD值、MMP-8、VEGFA mRNA和蛋白相对表达水平、妊娠率和子宫胚胎数降低(P<0.05);与模型组比较,移植组大鼠子宫内膜厚度、腺体数、角蛋白和整合素β3 IOD值、MMP-8、VEGFA mRNA和蛋白相对表达水平、妊娠率和子宫胚胎数升高(P<0.05),另hAECs移植可改善子宫瘢痕大鼠子宫内膜组织病理形态,减轻子宫内膜纤维化程度。结论:hAECs移植可改善子宫内膜损伤,减少瘢痕形成,提高子宫内膜容受性,并增强模型大鼠的妊娠功能,其作用机制可能与促进MMP-8和VEGFA表达有关。

      • 1
    • 抑制线粒体内膜蛋白OMA1对Rot诱导帕金森病细胞模型凋亡的影响

      石瑾, 李海宁, 吕玥, 徐婷

      Abstract:

      目的 探究抑制线粒体内膜蛋白OMA1(overlapping activity with m-AAA protease,OMA1)对鱼藤酮(Rotenone,Rot)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的影响。方法 体外培养SH-SY5Y细胞,使用Rot(终浓度为0.05、0.1、0.2、0.3、0.4 μmol/L的Rot)处理SH-SY5Y细胞24 h,选择最佳Rot(0.2 μmol/L)开展后续实验。实验分为对照组(细胞不经特殊处理)、PD模型组(0.2 μmol/L的Rot处理细胞24 h)、空载转染组(正常对照组基础上转染OMA1 siRNA的阴性对照序列)、OMA1 siRNA组(0.2 μmol/L的Rot处理细胞24 h后转染OMA1 siRNA)。CCK-8检测细胞生存率、倒置相差显微镜观察各组细胞形态学、Western blot检测OMA1及凋亡相关蛋白Casapse-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的变化、TUNEL凋亡试剂盒检测细胞凋亡。 结果 与对照组相比,随着Rot浓度的升高,SH-SY5Y细胞生存率呈浓度依赖性降低(P<0.05);与对照组相比,PD模型组中OMA1的表达及凋亡蛋白Caspase-3表达升高,Bax/Bcl-2值升高(P<0.01);与PD模型组相比,OMA1 siRNA组细胞形态学变化逐渐恢复、凋亡蛋白Caspase-3表达降低、Bax/Bcl-2值降低,TUNEL凋亡染色提示凋亡减轻(P<0.01)。 结论 抑制线粒体内膜蛋白OMA1可以改善Rot诱导的PD细胞模型引起的凋亡,进而对神经元可能具有保护作用。

      • 1
    • 纳米二氧化铈对雄性小鼠脏器 结构和氧化还原指标的影响

      殷俊

      Abstract:

      目的 探究纳米二氧化铈(CeO2NPs)亚急性腹腔染毒对ICR小鼠体重、主要脏器以及血清氧化还原指标的影响。方法 将雄性ICR小鼠35只随机分成5组,每组7只。设生理盐水对照组和不同浓度的CeO2NPs(100、500、1000、5000 μg/kg)试验组。小鼠腹腔隔日注射CeO2NPs,28 d后进行相关指标的检测。结果 与对照组相比,CeO2NPs各剂量组小鼠体重增长差异不显著(P>0.05);5000 ug/kg剂量组肝脏系数、附睾系数与精子存活率与对照组相比差异极显著(P<0.01)。5000 ug/kg剂量组肝脏和脾脏内可见纳米氧化铈沉积,部分肝脏中可见肉芽肿。100 ug/kg剂量组血清SOD和GSH-Px活力升高,MDA含量降低,体现出CeO2NPs的抗氧化作用,随着注射剂量的升高,CeO2NPs的氧化应激作用增强。结论 低剂量CeO2NPs对机体较安全,并表现出一定的抗氧化作用,随着剂量增加,CeO2NPs对机体的毒性也逐渐增强。

      • 1
    • 肠道微生物菌群与肥胖相关代谢性疾病的研究进展

      苏黑艳·帕尔哈提, 张姣姣, 马壮, 王俊人, 李艳红

      Abstract:

      以肥胖为中心的糖尿病、高血压和癌症等代谢性疾病在全球范围内正以惊人的速度增长,已成为全球公共健康问题。肥胖及相关代谢性疾病的治疗逐渐成为了研究热点。目前,越来越多的研究证明肠道微生物菌群可调节能量平衡和糖脂代谢,并调节肥胖及相关代谢性疾病的发生和发展。肠道微生物菌群很有可能是治疗和防控代谢性疾病的潜在新靶标。本文总结了肠道微生物菌群在肥胖相关代谢性疾病发生发展中的研究进展,并分析了肠道微生物菌群在代谢性疾病中的作用。

      • 1
    • 外泌体microRNA在早期筛查与治疗阿尔兹海默症的相关研究进展

      张俊峰

      Abstract:

      外泌体作为一种能被不同细胞分泌的小分子细胞外囊泡,通过运输microRNA等多种生物活性物质在阿尔兹海默症的病理过程中发挥重要作用。研究表明,外泌体microRNA的表达在AD患者早期阶段发生变化,并且通过外源性注射间充质干细胞来源的外泌体microRNA可以改善AD动物模型的学习记忆能力。本文就该领域对外泌体在早期筛查和治疗阿尔兹海默症的研究情况进行综述。

      • 1
    • 病证结合COPD动物模型研究进展

      把得婷, 郝彬彬, 李娟

      Abstract:

      慢性阻塞性肺疾病是临床常见的呼吸系统疾病,发病率高,死亡率高,已成为当今社会一个重要的卫生问题。中医药在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的治疗中积累了丰富的历史经验,并且具有独特的临床优势。为深入发掘中医药对本病的治疗效果,制备病证结合的COPD动物模型是关键前提。本文归纳总结的病证结合模型包括肺气虚证动物模型、肺脾两虚证动物模型、痰热郁肺证动物模型、痰瘀阻肺证动物模型、寒饮证动物模型五大类。现将近几年常见的病证结合类造模方法进行简单的阐述与梳理,以期为研究人员提供新思路,推动中医药治疗本病的研究进程。

      • 1
    • 高原对线粒体功能及能量代谢影响研究进展

      李勃深, 张宇轩, 范容晖, 李茂星

      Abstract:

      高原是一个低压、低氧、高寒的特殊环境,高原环境将降低能量物质代谢与线粒功能从而影响高原作业,近年来,线粒体损伤引起了广泛关注,线粒体作为细胞的能量工厂,与机体运动紧密相关。以高原线粒体损伤为研究核心,通过网络数据库检索总结高原对于基础能量物质的代谢影响以及对线粒体生化供能反应关键酶活性和线粒体结构功能的改变,发现蛋白质、糖类与脂质代谢在高原受到负面影响,导致高原作业时易疲劳、高血脂症与机体修复受阻;丙酮酸代谢、三羧酸循环、β-氧化和氧化磷酸化相关酶活性被抑制,线粒体形态与数目改变,导致线粒体功能受损,影响运动供能。未来高原细胞损伤机制的探明将大力推动高原损伤防治药物的研究。

      • 1
    • 血管性痴呆动物模型的研究概述

      宋元毓, 陈英华

      Abstract:

      摘要:血管性痴呆(vascular dementia, VD)以脑血管病变为基础,即脑实质有出血性或缺血性病变,其中以缺血性较为多见。由于其导致的认知能力和记忆力的渐进性下降及日益上升的发病率已成为影响人们健康和生活质量的一个主要问题。因此,越来越多的学者开始着手研究VD的发病机制和防治措施。建立合适的动物模型以用于研究治疗VD各种方式的作用机制及其疗效评价,也成为本领域的研究重点。在常规建模方法,双侧血管阻断法(bilateral occlusion of the common carotid arteries, 2VO)和四血管阻断法(four-vessel occlusion,4VO)的基础上,研究人员研发了其他改良方法,以期使VD模型更稳定、更贴近VD的临床表现。本文在列举现阶段研发的改良方法及其具体操作方法的基础上,介绍这些模型的优缺点和相关的细胞和分子机制。

      • 1
    • 角蛋白17基因敲除加剧糖尿病小鼠的创面愈合障碍

      鲍丹, 郭蕊, 侯道荣

      Abstract:

      目的 探究角蛋白17(keratin 17,Krt17)基因敲除对糖尿病小鼠的创面愈合的影响。 方法 取6周龄野生型小鼠和Krt17基因敲除小鼠,利用60%高脂饲料喂养4周和腹腔注射链脲佐菌素(40mg/(kg?d),连续5d)联合诱导建立糖尿病小鼠模型;于造模成功后1周,小鼠异氟烷全身麻醉,背部剃毛,用6 mm环钻制造在体的皮肤圆形损伤;于制造创面后第8天,利用Western blotting和免疫荧光染色检测KRT17在创面近端中的表达和定位及病理组织学分析;并于制造创面后第0、2、4、6和8天拍照记录,计算伤口愈合速率。 结果 在正常生理情况下,KRT17主要在小鼠毛囊中表达;当皮肤受到损伤时,创面近端的角质形成细胞中KRT17的表达显著升高;而糖尿病小鼠创面中KRT17的表达较对照组小鼠显著下调。与野生型小鼠相比,Krt17基因敲除小鼠的伤口愈合速率显著降低;创面局部炎症反应更持续。 结论 Krt17基因敲除加剧了糖尿病小鼠的创面愈合障碍,Krt17可能是参与该病理进程的重要调控基因之一。

      • 1
    • 黄芩素介导自噬经由miR-449a/HDAC1轴抑制喉癌细胞增殖及迁移的机制研究

      王剑, 孙永东, 周兴玮, 刘雷, 童兴科, 陈龙, 何娴

      Abstract:

      目的:探究黄芩素抑制喉癌细胞增殖及迁移的机制。方法:采用Hep-2 细胞为研究对象。MTT法检测各组细胞增殖活力;划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡情况;WB检测各组细胞中Beclin-1、LC3I/II、p62及HDAC1的表达水平;RT-PCR检测细胞miR-449a的表达水平;生物信息学软件分析miR-449a与HDAC1的靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验鉴定;透射电子显微镜观察自噬小体数量。结果:黄芩素显著抑制了喉癌细胞的增殖和迁移,并诱导细胞凋亡;黄芩素增加了细胞内Beclin1及LC3II的蛋白表达水平,减少了p62及LC3I的蛋白表达水平;黄芩素显著增加喉癌细胞miR-449a的表达水平,降低HDAC1的蛋白表达量;HDAC1与miR-449a存在结合作用;黄芩素联合miR-449a mimic处理喉癌细胞,可以更显著的抑制细胞增殖及HDAC1的蛋白表达水平,以及更为有效地上调miR-449a的相对表达量和诱导自噬。结论:黄芩素可以介导自噬经由miR449a/HDAC1轴抑制喉癌细胞增殖及迁移。

      • 1
    • 低剂量BPA和DEHP对成年大鼠前列腺AKR1C3的影响

      黄冬妍, 吴双双, 邵丛丛, 苏欣, 杨荣富, 王凯玥, 周萍, 吴建辉

      Abstract:

      目的 明确低剂量BPA和DEHP对成年大鼠前列腺AKR1C3的影响。 方法 56只成年雄性SD大鼠随机分成7组,每组8只,分别灌胃给予BPA(10.0µg/kg、30.0µg/kg和90.0 µg/kg),DEHP(30.0µg/kg 、90.0µg/kg 和270.0 µg/kg)和溶媒,连续4周。动物于末次给药24 h后,麻醉后采血,剖取前列腺并分叶,利用ELISA法检测血清和前列腺中AKR1C3水平,利用免疫组化法分析各叶前列腺中AKR1C3的表达情况。结果 给予BPA后,腹侧前列腺90µg/kg剂量组AKR1C3表达显著性高于对照组(P<0.05);背侧前列腺10µg/kg剂量组AKR1C3水平和蛋白表达均显著性高于对照组(P<0.01,P<0.001)。给予DEHP后,270µg/kg剂量组血清AKR1C3水平显著性高于对照组(P< 0.001),腹侧前列腺各组AKR1C3水平均显著性高于对照组(P< 0.05,P<0.01),270µg/kg剂量组AKR1C3蛋白表达显著性高于对照组(P<0.05);背侧前列腺90µg/kg 和270µg/kg剂量组AKR1C3表达显著性高于对照组(P<0.001,P<0.05)。结论 低剂量BPA和DEHP均能促进成年大鼠前列腺AKR1C3表达,但各叶前列腺腹对BPA和DEHP的敏感度有所不同。

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