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李明学,王文广,李娜,匡德宣,仝品芬,黄鑫,黎晓慧,孙晓梅,陆彩霞.树鼩PSEN1 全长编码序列的克隆及分子特征分析[J].中国实验动物学报,2019,27(4):456~465.
树鼩PSEN1 全长编码序列的克隆及分子特征分析
Cloning and characterization of presenilin 1 in the Chinese tree shrew
投稿时间:2019-04-12  
DOI:10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2019. 04. 006
中文关键词:  树鼩  PSEN1  分子克隆  系统发育分析
英文关键词:tree shrew  PSEN1  cloning  phylogenetic analysis
基金项目:
作者单位E-mail
李明学 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118 18687520819@ 163.com 
王文广 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118  
李娜 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118  
匡德宣 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118  
仝品芬 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118  
黄鑫 1. 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118
2. 昆明医科大学,昆明 650500 
 
黎晓慧 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118  
孙晓梅 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118 sxm@ imbcams.com.cn 
陆彩霞 中国医学科学院/ 北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心,昆明 650118 lcx@ imbcams.com.cn 
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中文摘要:
      目的 获取树鼩早老素蛋白-1(PSEN1)的全长编码序列并进行分子特征分析。方法 以树鼩脑组织总RNA 为材料,通过RT-PCR、RACE-PCR 扩增和序列拼接获得PSEN1 基因全长编码序列,进而通过DNAMAN、MEGA 等生物信息学软件对其序列和分子特征进行分析。qRT-PCR 和Western Blot 进一步分析PSEN1 在树鼩各个组织的表达模式。结果 克隆鉴定了树鼩PSEN1 基因,其cDNA 的开放阅读框全长1128 bp,编码375 个氨基酸。通过系统发育谱系树、氨基酸序列对比分析,发现树鼩PSEN1 与小鼠、大鼠等相比更接近人类和非人灵长类动物。qRT-PCR 和Western Blot 的结果表明,树鼩PSEN1 在脑组织的表达量明显高于其他脏器组织。结论 通过克隆树鼩PSEN1 基因序列并进行分析,为今后进一步深入研究该基因功能和建立相关疾病动物模型提供理论基础。
英文摘要:
      Objective To get the full-length presenilin-1 (PSEN1) cDNA encoding sequence and analyze itsmolecular characteristics. Methods Full-length PSEN1 cDNA was cloned from total RNA from brain tissue of tree shrewby RT-PCR and RACE-PCR. The molecular characteristics were compared with PSEN1 in other mammals and evaluatedusing biology softwares such as DNAMAN, MEGA and others. Quantitative reverse transcription PCR and western blotassays were used to examine the mRNA and protein expression pattern of PSEN1 in various tissues of tree shrew. ResultsThe open reading frame sequence of PSEN1 was 1128 bp and encoded 375 amino acids. We constructed a phylogeneticfamily tree and compared their PSEN1 amino acid sequences. Tree shrew PSEN1 was closer to humans and non-humanprimates than mouse and rat. The expression of PSEN1 mRNA and protein was obviously higher in the brain than that ofother organ tissues. Conclusions We successfully cloned the PSEN1 gene in tree shrew and provided comparative analysiswith other species. These findings provide a theoretical basis for further study on the function of this gene and the establishment of animal models of Alzheimer’s disease (AD).
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