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2026,34(3):313-325, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 001
Abstract:
目的 构建慢性不可预测轻度约束( chronic unpredictable mild restraint,CUMR)与慢性不可预测节律干预(chronic unpredictable rhythm disturbance,CURD)两种慢性应激相关干眼模型,比较两种模型的表型和代谢组学特征以及与中医证候的关联。 方法 SPF 级健康雄性大鼠分为空白组、CUMR 组、CURD 组,CUMR 组每天施加单笼饲养 + 行为约束,CURD 组每天施加随机节律干预。 造模 6 周后,筛选出郁证相关干眼大鼠,评估一般情况、行为学、干眼指标;苏木素-伊红(HE)染色观察结膜、角膜、泪腺病理变化;ELISA 法检测血清 5-羟色胺(5-HT)、皮质醇(cortisol)和角膜组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β 指标水平;超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用系统(UPLC-QTOF-MS) 技术进行血清代谢组学分析。 结果 ( 1)CUMR 组和 CURD 组外观和行为学有显著性差异;( 2) CUMR 组、CURD 组与空白组相比,角膜荧光染色(CFS)显著增加,泪流量( TF)、泪膜破裂时间( BUT) 显著减少,且 CUMR 组改变更为明显;( 3) CUMR 组、CURD 组角膜未见明显炎症细胞浸润。 与空白组相比,CUMR 组、CURD 组结膜杯状细胞数量显著降低、泪腺空泡化面积显著增加,且 CUMR 组改变更为明显;(4) CUMR 组与 CURD 组 ELISA 检测比较,CUMR 组血清5-HT 显著降低,cortisol 显著升高、角膜组织 TNF-α、IL-1β 无统计学意义;(5)血清代谢组学分析提示,CUMR组和 CURD 组样本中鉴定出 235 个差异代谢物,呈现显著的分离趋势。 结论 不同的应激造模会影响大鼠代谢,从而造成不同的中医证候和干眼表型。 CUMR 组表现为“肝郁脾虚型”干眼,其病理进程可能与色氨酸代谢有关;CURD 组表现为“肝经郁热型”干眼,其生物学基础可能涉及三羟酸循环。
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2026,34(3):326-338, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 002
Abstract:
目的 构建压力超负荷心力衰竭湿证小鼠模型及评价体系。 方法 将 C57BL / 6 小鼠随机分为假手术组(Sham group)、心衰组(TAC group)和心衰湿证组(TAC-D group),每组 7 只。 假手术组只开胸不缩窄主动脉弓,心衰组采用主动脉弓缩窄术构建心衰模型,两组小鼠均饲养于正常环境;心衰湿证组除缩窄主动脉弓外,每日放置于人工恒温恒湿箱 8 h 进行湿证造模,其余时间饲养于正常环境,持续 8 周。 根据《中医湿证动物模型评价量表》评估小鼠宏观表征,结合现代医学手段检测小鼠心脏功能、心肌组织病理学、免疫稳态、血清 NT-proBNP 及血脂水平,同时进行粪便 16S rDNA 测序和血清非靶向代谢组学,构建心衰湿证小鼠模型新型评价指标。 结果 心衰湿证组出现明显倦怠、乏力、对外界刺激反应降低以及肛周污秽等表征;心衰组与心衰湿证组均出现明显的心脏功能障碍、心肌损伤、免疫稳态失衡、血清 NT-ProBNP 水平升高和血脂水平降低,同时上述改变在心衰湿证组更加明显。 小鼠粪便 16S rDNA 测序和血清非靶向代谢组学结果显示,心衰湿证造模后小鼠体内微生物和代谢物出现明显变化,基于 LEfSe 分析 ( LDA > 2) 发现, Enterorhabdus、Eubacterium、Corynebacterium、Christensenellaceae、Erysipelatoclostridium 等 5 个菌属在心衰湿证组显著富集;代谢组 KEGG 富集分析显示心衰湿证组差异代谢物主要富集在甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢、胆汁分泌等代谢通路;皮尔森相关性分析结果显示,菌属 Eubacterium、Erysipelatoclostridium 与主要富集在花生四烯酸代谢上的代谢物 16R-HETE、 6-keto PGE1、 PE-NMe2 ( 16 ∶ 1 ( 9Z) / 20 ∶ 3 ( 8Z, 11Z, 14Z))、 Prostaglandin F2a、 TXB2、Oxoglutaric acid、12(R)-HETE 存在显著的负相关。 结论 主动脉弓缩窄术联合高温高湿环境饲养模拟外湿侵袭成功构建压力超负荷心衰湿证小鼠模型。 根据《中医湿证动物模型评价量表》评估心脏功能、血清 NTproBNP、心肌组织病理学、免疫稳态等可作为本模型常规评价指标;在此基础上,引入肠道菌属 Eubacterium、Erysipelatoclostridium 和花生四烯酸代谢紊乱,构建压力超负荷心衰湿证小鼠模型创新评价体系。
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2026,34(3):339-351, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 003
Abstract:
目的 对 YQJ 钙锌维生素 D 维生素 K 口服液(简称“YQJ”)及其拆方进行体外吸收率和斑马鱼抗骨质疏松功效检测,基于转录组测序术探讨潜在作用机制。 方法 利用 Caco-2 细胞模拟胃肠道吸收,比较 YQJ 及其拆方钙离子吸收率。 使用地塞米松诱导骨质疏松模型,通过茜素红钙染骨密度及 Tg( ola. sp7:nlsGFP)成骨细胞荧光双重验证药效。 设置 YQJ 250 μg / mL 组、MC 组和 NC 组,均 3 个生物学重复,对斑马鱼进行转录组测序,以| log2fold-change | ≥ 2、Q value ≤ 0. 001 严格筛选 3 组交集的差异基因,进行功能注释和富集分析,筛出 YQJ 抗骨质疏松基因的表达通路,并进行 qPCR 验证。 结果 在 Caco-2 肠屏障体外模型中,YQJ 组钙离子吸收率为 42. 6%,相比为单一柠檬酸钙组吸收率的 1. 70 倍,为柠檬酸钙 + VD3 组、柠檬酸钙 +VK2 组、柠檬酸钙 + CPP 组的 1. 59、1. 58、1. 56 倍,为柠檬酸钙 + 葡萄糖酸锌 + VD3 组的 1. 33 倍,产品 YQJ协同促进钙吸收效果显著。 YQJ 能显著恢复斑马鱼头骨密度、提高成骨荧光强度,且同 125 μg / mL 浓度下YQJ 抗骨质疏松功效较单一柠檬酸钙增加 24% ~ 25%。 测序结果 MC 组/ NC 组、YQJ 组/ MC 组差异基因为340、231 个,3 组交集 58 个重叠。 对重叠基因进行功能富集,YQJ 抗骨质疏松涉及 4 条通路和 11 个关键基因。利用 qPCR 验证,YQJ 可明显恢复 c3a. 1、cp、coro1a、cldni、bmpr1aa mRNA 的表达水平。 结论 YQJ 的体外钙吸收率及抗斑马鱼骨质疏松功效均呈现出了协同增效作用,其中抗斑马鱼骨质疏松功效具体指 YQJ 可增加头骨密度和成骨细胞信号强度。 转录组测序发现 YQJ 主要是通过调节补体和凝血级联反应、铁死亡、吞噬体、氧化应激反应信号通路和其他功能蛋白发挥作用,具体涉及 c3a. 1、c3a. 2、c3a. 6、c9、c5、cfb、coro1a、cp、mpx、cldni 和 bmpr1aa 关键基因调控。
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2026,34(3):352-361, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 004
Abstract:
目的 采用网络药理学与体内实验,探讨补中益气汤(Buzhong Yiqi Decoction,BZYQD)改善化疗肌少症( chemotherapy-induced sarcopenia,CIS) 的潜在活性成分及作用机制。 方法 利用 TCMSP 筛选BZYQD 活性成分及靶点;通过 GeneCards 和 OMIM 数据库筛选 CIS 疾病靶点。 取药物与疾病交集靶点构建蛋白互作网络,识别核心靶点,进行 GO 功能注释及 KEGG 通路富集。 利用 AutodockTools 1. 5. 7 和 PyMOL 2. 7. 1进行分子对接及可视化处理。 通过动物实验验证 BZYQD 改善 CIS 的效果。 结果 药物与疾病交集的核心靶点,包括 Akt1、TP53、TNF、IL-1β、IL-6 等。 分子对接核心靶点与主要活性成分大部分具有较好结合能力。 在SD 大鼠实验中,相较于空白组(C 组),模型组(M 组)体质量、抓力和力竭游泳时间与肌丝横截面积显著降低,ELISA 检测血清中 TNF-α、IL-1β、IL-6 的含量显著升高,Western Blot 检测显示,骨骼肌 p-NF-κB p65 / NF-κBp65 比值显著升高,p-Akt / Akt 和 p-PI3K/ PI3K 比值显著降低;BZYQD 各剂量组大鼠上述指标均有所改善,其中高剂量组(HBYD 组)效果最为显著。 结论 BZYQD 可能通过调节 PI3K/ Akt / NF-κB 信号通路改善 CIS。
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2026,34(3):362-370, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 005
Abstract:
目的 本研究旨在通过 16S rDNA 测序技术比较中国地鼠和金黄地鼠肺部与肠道微生物群落的组成和多样性差异,为理解它们在人类疾病研究中的应用提供新的视角。 方法 选取 6 ~ 8 周龄的 SPF 级中国地鼠和金黄地鼠各 12 只(雌雄各半),在无菌条件下采集肺泡灌洗液、小肠内容物和大肠内容物样本。通过 16S rDNA 测序技术进行物种注释和多样性分析,包括 α 多样性和 β 多样性分析,并使用线性判别分析(linear discriminant analysis effect size,LEfSe)识别潜在的生物标志物。 结果 多样性分析,金黄地鼠(尤其是雄性)的肺部和小肠微生物群落多样性显著高于中国地鼠(P<0. 05),中国地鼠的大肠微生物群落的多样性显著高于金黄地鼠(P<0. 05)。 β 多样性分析,两种地鼠在肺部、小肠和大肠的微生物群落组成上均存在显著性差异(P<0. 01)。 LEfSe 分析,在肺部微生物群落中,金黄地鼠的差异物种是厚壁菌门(Firmicutes),中国地鼠差异物种是拟杆菌门(Bacteroidota) (雌性)和变形菌门(Proteobacteria) (雄性);在小肠和大肠微生物群中,中国地鼠的差异物种是厚壁菌门(Firmicutes),金黄地鼠的差异物种是拟杆菌门(Bacteroidota)。 结论 中国地鼠和金黄地鼠在肺部和肠道微生物群落的组成和多样性上存在显著性差异,这些差异可能与它们在人类疾病研究中的不同应用领域相关。 本研究为理解这两种地鼠在人类疾病研究中的应用提供了新的视角,并为未来通过调节微生物群落提升它们的健康水平及其作为实验模型的价值提供了理论基础。
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2026,34(3):371-381, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 006
Abstract:
目的 通过不同剂量不同频次腹腔注射多柔比星(DOX)建立快速衰老小鼠和心脏衰老小鼠模型,优化模型评价指标,为抗衰老药物评价提供疾病模型支撑。 方法 (1)快速衰老小鼠模型:小鼠分为模型 1 组(5 mg / kg,每 7 d 1 次)、模型 2 组(8 mg / kg,每 10 d 1 次)、模型 3 组(8 mg / kg,每 7 d 1 次)、模型 4 组(10 mg / kg,每 10 d 1 次)和模型 5 组(10 mg / kg,每 7 d 1 次),腹腔注射 3 次,连续观察 60 d,记录小鼠的生存率;(2)心脏衰老小鼠模型:小鼠分为对照组、模型-1 组(2 mg / kg)、模型-2 组(5 mg / kg)、模型-3 组(8 mg / kg) 和模型-4组(10 mg / kg),每 10 d 一次,共注射 2 次,连续造模 30 d,结束后使用小动物高频超声成像技术(UBM)评价射血分数(EF)、缩短分数(FS)和最大血流速度;检测血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、白介素 6 ( IL-6) 和白介素 1β ( IL-1β) 的水平;检测心肌组织超氧化物歧化酶( SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、琥珀酸脱氢酶( SDH)和过氧化氢酶(CAT)含量;检测心肌组织病理、纤维连接蛋白(FN)、β-半乳糖苷酶染色(β-gal)和 p16 蛋白等心脏衰老相关指标。 结果 (1)快速衰老小鼠模型:实验期间各个模型组之间小鼠的体质量和存活率均呈显著下降趋势,且随着 DOX 造模剂量增加和造模间隔时间缩短,体质量和存活率下降愈发明显;(2)心脏衰老小鼠模型:与对照组比较,2、5、8 和 10 mg / kgDOX 可以显著升高 LDH 含量(P<0. 01),降低 GSH-Px 活力(P<0. 05 或 P<0. 01);5、8 和 10 mg / kg DOX 可以显著降低小鼠体质量(P<0. 01),同时小鼠的 EF、FS 和最大血流速度均显著降低(P<0. 05 或 P<0. 01),血清中的 IL-6 含量显著增加(P<0. 05 或 P<0. 01),SOD 含量显著降低(P<0. 05 或 P <0. 01),β-半乳糖苷酶和 p16 蛋白表达显著升高(P<0. 05 或 P<0. 01),心肌组织出现水样和空泡变性;而 8 和 10 mg / kg DOX 还可以显著升高 CK-MB 水平(P<0. 01)和增加心脏纤维化程度(P<0. 01);此外,10 mg / kg DOX 还可以增加IL-1β 和 MDA 含量(P<0. 01)。 结论 腹腔注射 10 mg / kg DOX,每 10 d 注射一次,共注射 3 次可以成功建立快速衰老小鼠模型;而腹腔注射 5 或 8 mg / kg DOX,每 10 d 注射一次,共注射 2 次可成功建立心脏衰老小鼠模型,引起心功能、心肌酶、炎症、氧化应激、衰老标志物、心脏病理及纤维化的改变,符合心脏衰老的生理病理特点。
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赵佳丽，张慧娟，梁夏丽，王燕如，田雅文，张志明，靳晓杰，刘永琦
2026,34(3):382-397, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 007
Abstract:
目的 本研究旨在探讨宣肺化浊丸(XuanFei HuaZhuo Pill,XFHZP)对湿热型肺炎( damp-heatpneumonia,DH)作用,并通过蛋白质组学技术揭示其治疗 DH 的机制,为中医药治疗肺炎提供实验依据。 方法建立 DH 大鼠模型,通过体征观察及评分(一般情况、舌、耳、爪甲、尿液、粪便);肺指数;肺组织苏木素-伊红(HE)染色;肺组织白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定;血细胞计数:白细胞(WBC)、中心粒细胞(Gran)、单核细胞(Mon)、平均血小板体积(MPV);大鼠肺功能检测呼吸频率(F)和分钟通气量(MV)等,明确 XFHZP 治理 DH 的疗效。 利用 Astral DIA 定量蛋白组学技术检测空白对照(control,CON)组、DH 组和 XFHZP + DH 组大鼠的右肺下叶,分析 CON 组和 DH 组、DH 组和 XFHZP + DH组之间的差异表达蛋白(DEPs)。 并通过生物信息学进行 DEPs 的 KEGG 富集分析。 采用免疫组化分析代表性 DEPs 的表达,采用 Western Blot 对 DEPs 及其下游蛋白的表达含量进行检测和验证。 结果 与 CON 组相比,DH 组大鼠出现狂躁、舌色红、耳背血管充盈、尿液色黄及粪便粘滞等症状;肺指数升高,肺组织 HE 染色出现肺泡壁增厚,炎细胞浸润,肺泡毛细血管充血扩等病变,肺组织中 IL-6 及 TNF-α 含量显著升高(P<0. 05),WBC、Gran、Mon、MPV 及 F 显著升高(P<0. 05),MV 显著降低(P<0. 05)。 与 DH 组相比,XFHZP + DH 组肺指数降低,肺组织 HE 染色观察到充血情况及肺组织炎性细胞浸润明显减轻,肺组织中 IL-6 及 TNF-α 含量显著降低(P<0. 05),WBC、Gran、Mon、MPV 及 F 显著降低(P<0. 05),MV 显著升高(P<0. 05)。 蛋白质组学分析,表明 CON 组和 DH 组大鼠肺组织中有 1348 个 DEPs,DH 组和 XFHZP + DH 组大鼠肺组织中有 448 个差异蛋白,其中包括 AAK1、CACNα1δ1、eIF4E、HSD11β1、ROCK1、TDP1 等。 DEPs 的 KEGG 通路富集分析显示,cGMP-PKG 信号通路和胰岛素信号通路可能是 XFHZP 治疗 DH 的关键信号通路。 免疫组化结果显示,DH 大鼠肺组织中 ROCK1 和 MKNK1 的表达均上调,XFHZP 治疗后均下调。 Western Blot 实验进一步表明 DH 大鼠肺组织中 ROCK1 和 MKNK1 的表达均上调,增加了 MLC2 和 eIF4E 的磷酸化;XFHZP 通过抑制 ROCK1 和MKNK1 的表达,减少 MLC2 和 eIF4E 的磷酸化,从而舒张气道平滑肌并抑制炎性因子释放。 结论 XFHZP 对DH 具有显著的疗效,其作用机制可能通过调控 ROCK1 和 MKNK1 的表达,抑制 MLC2 和 eIF4E 的磷酸化,进而舒张气道平滑肌并减轻炎症反应。 本研究为 XFHZP 治疗 DH 提供了分子层面的科学依据,并为中医药治疗肺炎的机制研究提供了新思路。
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2026,34(3):398-410, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 008
Abstract:
目的 本研究旨在探索金银花延缓肾衰老的作用及机制。 方法 采用 D-半乳糖(D-gal)腹腔注射构建小鼠肾衰老模型,同时给予金银花水煎液灌胃。 行为学实验结束后采集各组小鼠肾组织,进行酶联免疫吸附测定实验(ELISA)和 β-半乳糖苷酶染色实验( SA-β-gal)检验造模情况和金银花的作用,然后进行miRNA 转录组学和蛋白质组学测序,鉴定出具有统计学意义的差异表达 miRNA(DEMs)和差异表达蛋白质(DEPs),并利用 GO、KEGG 数据库对这些 DEMs 和 DEPs 进行功能注释和通路分析。 结果 水迷宫和负重游泳实验结果表明,与对照组相比,模型组小鼠表现出学习记忆能力下降及运动耐力降低等衰老相关特征(P<0. 05),金银花干预后,衰老相关特征显著改善(P<0. 05);ELISA 和 SA-β-gal 染色结果表明,模型组小鼠肾IL-6 含量及 SA-β-gal 染色阳性面积百分比较对照组均显著增加(P<0. 001),金银花干预后,小鼠肾 IL-6 含量及 SA-β-gal 染色阳性面积百分比均显著减少(P<0. 01)。 通过 miRNA 转录组学和蛋白质组学筛选出 11 个显著 DEMs 和 8 个显著 DEPs,对这些 DEMs 和 DEPs 的靶基因进行交集处理后,发现 miR-146b-3p / Tmprss13是 1 对关键互作分子,miR-150-3p / Brpf1、miR-1934-5p / Cln8 是两对同时受金银花下调的 miRNA 和蛋白质。GO 和 KEGG 富集分析结果显示,金银花可能通过激活 MAPK 通路中具有显著差异表达的基因 Lonicera japonica-regulated Ecsit(LjREcsit)来干扰肾衰老进程。 结论 金银花能显著延缓 D-gal 所诱导的小鼠肾衰老,其机制可能是通过抑制 miR-146b-3p 进一步激活 Tmprss13 或下调 miR-150-3p / Brpf1、miR-1934-5p / Cln8 以延缓肾衰老,LjREcsit 介导的 MAPK 信号通路的调控也是金银花延缓肾衰老的关键。
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李维佳，凌晨，霍桂桃，杨艳伟，刘甦苏，赵皓阳，王依宁，王思浩，王夏璐，范昌发
2026,34(3):411-423, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 009
Abstract:
目的 本研究拟基于新型非酒精性脂肪性肝炎(metabolic dysfunction-associated steatohepatitis,MASH)-肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)小鼠模型(HRAS-HCC),研究伴随非酒精性脂肪肝炎相关的肝癌发生的肾损伤、功能失调、组织学及分子学特征,以探索 MASH-HCC 诱发肾损伤的潜在机制,旨在为临床研究疾病发生机制及探索诊疗方法提供重要模型工具。 方法 实验采用本课题组自主构建的 HRAS-HCC 小鼠,以同窝隐性小鼠和野生型 C57BL / 6 小鼠为对照组。 5 周龄时通过注射他莫西芬诱导小鼠肝组织中 HRAS基因表达,进而引发 MASH-HCC 的发生与进展。 在 MASH-HCC 进展过程中(1 ~ 4 周),定期监测小鼠的体质量、精神状态等一般特征,并于选择时间点采集血液样本并检测相关指标;通过苏木素-伊红(HE)和 Masson染色分析小鼠肾组织的病变特征。 结果 与 HRAS NON-TAM 组相比,HRAS-HCC 小鼠在一个月内从 MASH 阶段,经肝纤维化进展到 HCC,表现出黄疸、呼吸急促、弓背、便血、肝肿大和脾肿大等临床症状。 4 周时,HRASHCC 小鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)降低(P<0. 05),血清尿酸氮(UREA)、尿酸(UA)和肌酐(CREA)升高(P<0. 05)。 HE 结果显示,HRAS-HCC 小鼠肾组织在不同时期存在程度不一的肾小管嗜碱性变、透明性肾小球、肾小管上皮细胞透明滴样变等多种病变。 同时,Masson 染色观察到 HRAS-HCC 小鼠肾组织还存在纤维化病变,且肾纤维化(2 ~ 3 周)与肝纤维化/ 肝硬化(2 ~ 3 周)的发生时间及严重程度存在相关性。 进一步检测肾损伤相关分子表达发现,3 周时细胞角蛋白 18(KRT18)、SMAD3、纤维连接蛋白 1( FN1)、转化生长因子 β(TGFβ)在 mRNA 水平表达升高(P<0. 05)。 同时,蛋白质互作网络(PPI)分析结果显示人源 HRAS 和 FN1、SMAD3 间存在蛋白互作关系。 结论 本研究结果表明,MASH-HCC 引起的肾损伤与肝纤维化程度呈正相关关系,初步展示了 MASH-HCC 引起的肾损伤病理特征和分子特征,提示 HRAS-SMAD3-FN1 轴可能存在重要的作用。 本研究呈现了特有的 MASH-HCC 伴随肾损伤动物模型,该模型较真实的重现了临床上肾损伤的疾病特征,为制定该疾病的临床治疗策略奠定了基础。
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李昌奇，李昕洋，陈波，张靖宇，王婧文，匡小冰，李柠岑，傅丽媛，马培宏
2026,34(3):424-431, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 010
Abstract:
脓毒症是临床中死亡率较高的危重疾病,后期的免疫抑制状态与患者不良预后密切相关。 建立可靠的动物模型对于深入剖析脓毒症免疫抑制的机制及治疗策略至关重要。 目前,现有模型多用于脓毒症过度炎症的研究,在脓毒症免疫抑制的相关研究中使用较少,并且相关研究的评估标准也不尽相同。 盲肠结扎穿孔(CLP)和脂多糖(LPS)注射是常用模型,其中 CLP 能较好模拟临床病理过程,但模型稳定性较差;LPS操作简单,但与实际感染存在差异。 对于动物模型免疫抑制程度,可通过检测免疫细胞数量、细胞因子水平及免疫器官等指标进行有效地评估。 本文通过系统查阅分析近年文献,总结脓毒症动物模型免疫抑制状态的构建方法与评估指标,分析不同模型的优缺点,以期为脓毒症模型设计提供前期实验依据。
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2026,34(3):432-441, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 011
Abstract:
癌相 关 成 纤 维 细 胞 ( cancer-associated fibroblasts, CAFs ) 通 过 重 塑 肿 瘤 微 环 境 ( tumor microenvironment,TME)显著影响前列腺癌(prostate cancer,PCa)的发展和治疗,解析驱动其重塑的关键分子 对于肿瘤研究具有重要意义。 单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)家族是具有两种亚型 MAOA 和 MAOB的线粒体外膜氧化酶,通过氧化脱氨作用参与单胺类物质代谢,其异常表达与 PCa 的生长、侵袭、迁移及不良预后密切相关,并显著影响 TME 的重塑。 本文基于不同类型的动物模型,系统综述不同 MAO 亚型在 CAFs 中的生物学特性及其在 PCa 中的作用,探讨 MAO 抑制剂(monoamine oxidase inhibitor,MAOI)联合靶向治疗 PCa的潜在价值,重点关注其在 PCa 中差异表达的特征,进一步提出了开发基于不同 MAO 亚型的精准诊疗策略,期望为 PCa 的个体化治疗提供有效的干预靶点。
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2026,34(3):442-450, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 012
Abstract:
慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺间质纤维化(PIF)是两种严重影响肺功能的慢性肺部疾病。COPD 合并 PIF(COPD-PIF)可导致肺组织损伤进一步加重,加速病情进展,并显著影响患者预后。 然而,COPD-PIF 的具体发病机制尚未完全阐明,且目前尚无有效的治疗手段。 近年来,动物模型在 COPD-PIF 的病理机制研究及新药开发中发挥了重要作用。 现有 COPD 模型的构建法主要包括单因素诱导(如香烟烟雾暴露、脂多糖注射)和多因素联合诱导,而 PIF 模型则主要依赖博来霉素诱导,不同给药方式(如气管内滴注、雾化吸入、尾静脉注射)对模型的稳定性和重复性具有重要影响。 尽管已有一定类型的 COPD-PIF 动物模型被用于研究,但仍存在模型建立方法不完善、稳定性不足及难以全面模拟人类疾病特征的问题。 此外,COPD 与PIF 的发生顺序可能影响模型的病理表现,这在现有研究中尚未达成一致。 为更好地研究 COPD-PIF 的病理机制及筛选有效治疗策略,未来应进一步优化造模方法,提高模型的稳定性和可重复性,探索更符合 COPDPIF 临床特征的动物模型,从而推动该领域的基础研究和新药开发。
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2026,34(3):451-458, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 013
Abstract:
预期性恶心呕吐是一种习得性恶心呕吐,当化疗引起的恶心呕吐没有得到有效的控制时,患者往往会在下一次化疗前即出现恶心呕吐称为预期性恶心呕吐,其恶心呕吐的程度与患者焦虑抑郁程度呈正相关,约有 20% ~ 30%的患者在第 4 个化疗周期会出现预期性恶心呕吐。 然而,目前针对预期性恶心呕吐的治疗手段有限,因此深入探究预期性恶心呕吐的发病机制、探寻有效的治疗方法以及开发新型药物已成为当务之急。 在这一过程中,预期性恶心呕吐动物模型的建立发挥着不可或缺的关键作用。 但目前尚无一种理想的预期性动物模型能够全面、准确地复刻化疗患者预期性恶心呕吐的发生与发展的所有特征。 本文系统梳理了近年来预期性恶心呕吐动物模型建立方法的研究进展,详细综述了常见实验动物、常见致吐剂以及使用氯化锂致吐剂建立大鼠预期性恶心呕吐动物模型的方法,旨在为未来设计出更为精准的动物模型提供参考,并为进一步探索其发病机制以及潜在药物治疗提供一定的基础。
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2026,34(3):459-468, DOI: 10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2026. 03. 014
Abstract:
骨骼肌损伤(skeletal muscle injury,SMI)在临床实践中较为常见,中西医对其病理机制和治疗策略存在不同的理解和方法。 开发能够体现中西医临床特征的 SMI 动物模型,对于深入研究其发病机制和探索有效的治疗方法具有重要意义。 本文从 SMI 的中西医病因病机、诊断标准、辨证分型出发,对现有动物模型的构建方法、特点及其与中西医病症的吻合度进行了综合评价。 结果显示,重物坠落打击模型与中西医病症的吻合度最高,其中西医吻合度为 69. 6%,中医吻合度为 49. 4%;其次是运动诱导模型,西医吻合度为 49. 8%,中医吻合度为 44. 1%;而化学刺激和缺血再灌注模型的吻合度最低。 总体而言,本文涉及的 SMI 动物模型在西医吻合度上优于中医吻合度,且现有模型难以与中医辨证分型精准对应。 因此,构建能够准确反映中西医病证特点及中医证型的动物模型仍是未来研究的重要方向。
2026年第34卷第3期
2026年第34卷第3期
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健脾舒胰汤调控花生四烯酸代谢改善慢性胰腺炎的作用机制
Abstract:
目的 探讨健脾舒胰汤调控花生四烯酸（arachidonic acid, AA）代谢改善二丁基二氯化锡（dibutyltin dichloride , DBTC）诱导的大鼠慢性胰腺炎的作用机制。 方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组8只、模型组42只，模型组大鼠经尾静脉一次性注射DBTC诱导慢性胰腺炎模型。造模后第2天，将32只存活模型大鼠随机分为模型组、健脾舒胰汤低剂量（3.4g·kg -1）与高剂量组（17g·kg -1）、辅酶Q10组（5 mg·kg -1），每组8只。各药物组分别予相应药物灌胃，每天1次，连续3周。采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase, ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase, AST）、总胆红素（total bilirubin, TBIL）、直接胆红素（direct bilirubin, DBIL）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）并用ELISA检测血清白介素-1β（interleukin-1 beta, IL-1β）含量；苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin, HE）染色和天狼星红（Sirius red, SR）染色分别观察胰腺组织炎症和胶原沉积情况；Real-time PCR、Western blot及免疫组化染色检测胰腺组织α-SMA、Col-I mRNA与蛋白表达水平；液质联用技术检测血清与胰腺组织中AA类代谢物含量；Real-time PCR检测胰腺组织Ptgs1、Ptgs2、Ptges、Alox5、Alox12、Alox15 mRNA表达。 结果 与正常组相比，模型组大鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL、ALP、IL-1β含量均显著升高（P＜0.01）；胰腺组织中腺泡细胞萎缩，大量炎症细胞浸润，胶原显著沉积；胰腺组织α-SMA、Col-I mRNA与蛋白表达均明显升高（P＜0.01）；血清中AA类代谢物前列腺素D2 （prostaglandin D2, PGD2）、前列腺素E2（prostaglandin E2, PGE2）含量均明显升高（P＜0.05）；胰腺组织中AA类代谢物PGD2、5-羟基二十碳四烯酸（5-hydroxyeicosatetraenoic acid, 5-HETE）、15-羟基二十碳四烯酸（15-hydroxyeicosatetraenoic acid ,15-HETE）、11（S）-羟基二十碳四烯酸［11(S)-hydroxyeicosatetraenoic acid, 11(S)-HETE］含量均明显升高（P＜0.01）；胰腺组织中Ptgs1、Ptgs2、Alox5、Alox15 mRNA表达均明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，健脾舒胰汤低剂量组、高剂量组、辅酶Q10组血清ALT、AST、TBIL、DBIL、ALP、IL-1β水平均显著降低（P＜0.05, P＜0.01）；胰腺组织炎症、胶原沉积均明显改善；胰腺组织α-SMA和Col-I mRNA与蛋白表达均明显降低（P＜0.05, P＜0.01）。与模型组比较，健脾舒胰汤低剂量、高剂量组血清中AA类代谢物PGD2、PGE2均明显降低（P＜0.05）；胰腺组织中AA类代谢物PGD2、5-HETE、15-HETE、11(S)-HETE含量均明显降低（P＜0.05, P＜0.01）；胰腺组织中Ptgs2、Alox5、Alox15 mRNA表达均明显降低（P＜0.05, P＜0.01）。结论 健脾舒胰汤可显著抑制DBTC诱导的大鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化的进展，但高、低剂量组之间无显著差异，其作用机制可能与调控AA环氧合酶（Cyclooxygenase，COX）途径中COX-2表达和脂氧合酶（Lipoxygenase，LOX）途径中5-LOX、15-LOX表达有关。
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利用小鼠原代软骨细胞体外过表达模型探究核糖体蛋白S29在骨关节炎中的作用
唐玉玲, 李斯特, 钱洪安, 王春芳, 李子璇, 崔晶, 黄婧姝, 邱业峰, 王进
Abstract:
目的 建立小鼠原代软骨细胞核糖体蛋白S29(Rps29)过表达的体外细胞模型,探讨Rps29在骨关节炎发生过程的作用。 方法 首先,通过免疫组化(IHC)原位检测半月板切断术(DMM)诱导的骨关节炎(OA)小鼠模型中膝关节软骨中Rps29的表达情况。其次,建立小鼠软骨细胞原代分离及培养方法,构建带有绿色荧光报告基因的对照空载体及Rps29过表达载体,通过细胞转染建立小鼠原代软骨细胞Rps29过表达的体外细胞模型。最后,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(WB)检测Rps29的mRNA及蛋白表达情况,通过Edu掺入实验检测Rps29过表达后软骨细胞的增殖,通过免疫荧光(IF)、RT-PCR、WB等检测II型胶原(Collagen II)、X型胶原(Collagen X)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-13(MMP13)等骨关节炎发生过程中关键分子的表达水平。 结果 DMM诱导的OA小鼠模型中,与对照组相比,实验组(DMM组)膝关节Rps29表达更为丰富。小鼠原代软骨细胞过表达Rps29后,其Rps29的mRNA及蛋白表达水平都显著增加,软骨细胞的增殖减少、Collagen II表达水平下降、Collagen X表达水平增加、TNF-α、IL-6、NF-κB等分子的表达水平亦显著增加。 结论 小鼠原代软骨细胞过表达Rps29后呈现出类似骨关节炎的分子病理变化。本研究揭示了过表达Rps29能够通过激活炎症反应及NF-κB通路进而促进骨关节炎的发生,为解析Rps29在骨关节炎中的作用机制提供新的线索和初步理论基础。
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犬嗅觉能力标准化测试方法的系统综述：从范式解析到体系构建
Abstract:
测试犬的嗅觉能力是开展嗅探犬选育、工作犬训练与使用等方面研究的基础内容。然而，目前犬嗅觉能力的测试方法并不统一，影响了相关研究的科学性与可比性。为弥补这一不足，对国内外涉及犬嗅觉能力测试的研究进行梳理并加以综述，总结成自然探测任务、离散辨别任务与自由搜索任务三大核心范式。分析表明三大行为学范式可以构成涵盖基础筛查、精密测量、真实场景验证的完整测试体系。此外神经成像、生理监测与人工智能等辅助技术的应用，为行为测试提供了更加准确的技术支持。未来应进一步推动方法学共识的形成与标准化进程，以提升犬嗅觉能力测试的系统性与应用可靠性。
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单胺氧化酶A在维持前列腺癌干性中的作用与机制研究
Abstract:
目的 揭示单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)在维持前列腺癌干细胞样特征中的作用与机制，以期为前列腺癌的诊断、治疗提供有效靶点。方法 采用癌基因组图谱(TCGA)数据库进行生物信息学分析明确MAOA在前列腺癌中的表达趋势，以及与疾病恶性程度的关系。使用恩杂鲁胺(enzalutamide,ENZ)诱导前列腺癌C4-2细胞以及前列腺癌患者来源的类器官（PDO）模型，以模拟临床中前列腺癌对药物产生抵抗并伴随干性增强的病理过程。qRT-PCR检测干性标志物变化，Western Blot检测模型中MAOA的表达情况；慢病毒转染敲低MAOA，qRT-PCR及Western Blot检测敲低效率和干性标志物的变化，进一步明确MAOA对干性相关基因SOX2表达的影响，Western Blot检测缺氧信号调节因子HIF-1α可能参与MAOA与SOX2的调控；构建ENZ耐药的细胞系移植模型（CDX）模型，并使用MAOA特异性抑制剂氯吉兰(clorgyline,CLG)观察其对肿瘤生长的影响，qRT-PCR检测干性标志物的变化。结果 MAOA在前列腺癌中高表达，并与肿瘤T分期、N分期和Gleason评分相关。随着耐药前列腺癌细胞模型中干性程度的增加，MAOA表达增强。反之，MAOA低表达可显著降低肿瘤细胞干性特征，并使干性相关基因SOX2的表达下降。进一步实验表明降低MAOA表达，可降低干性相关基因SOX2的表达。体内实验证实使用MAOA抑制剂氯吉兰可显著降低干性标志物的表达。结论 MAOA可通过缺氧信号调节因子HIF-1α提高前列腺癌细胞中癌症干细胞相关基因SOX2的表达，进而增强前列腺癌的干性特征，从而影响前列腺癌的疾病发展。
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复合因素诱导轻中度慢性萎缩性胃炎模型的建立与验证
张文强, 马丽清, 张发福, 黄雪映, 唐瑞欣, 杨威, 郭健敏
Abstract:
目的 建立复合因素诱导的轻中度慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis, CAG)大鼠模型,并评估验证其在药效试验中的应用。方法 采用1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(1-Methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine, MNNG)联合雷尼替丁和饥饱失常三种因素复合诱导建立CAG大鼠模型,于造模14~24周不同节点每次分别剖检空白组和造模组3只大鼠,以进行胃组织病理学检查判断模型进展。于造模成熟节点选取20只大鼠入正常组,选取40只模型大鼠随机均衡分为模型组和叶酸组,分组后对各组动物进行灌胃给药,每天一次,共计28天。试验期间监测各组存活动物体重和摄食量,给药14天和28天分别剖杀各组半数动物进行胃组织病理学检查。结果 与空白组相比,造模组大鼠造模35天起体重明显降低,造模47天起摄食量亦显著降低,造模23周动物胃体和胃窦固有腺体轻度-中度变性/坏死,腺上皮细胞轻度丢失,胃体轻度炎细胞浸润,于24周维持稳定。与正常组比,模型组大鼠给药期间体重和摄食量均显著降低,与模型组比,叶酸组大鼠给药第18天起体重显著升高,给药第15天起摄食量显著升高,给药28天后胃体萎缩评分和胃损伤评分均显著降低,胃体固有腺体萎缩发生率减少,萎缩程度减轻。结论 三种因素复合法造模24周后可诱导出稳定的轻中度CAG大鼠模型,适用于药物药效作用的评价。
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乳头瘤病毒持续感染下生殖道动物模型的构建与评价
陈明丽, 张姣娜, 王舒琪, 阳宇, Jiafen Hu, 李耿, 肖静
Abstract:
摘要 目的 乳头瘤病毒（Papillomavirus，PV）具有严格的物种特异性，现有模型难以模拟自然状态下高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）持续感染及局部免疫微环境。本研究采用鼠源性乳头瘤病毒MmuPV1联合免疫抑制剂环孢素，在免疫活性FVB/N小鼠下生殖道构建持续感染动物模型，从病理学、病毒学及免疫学角度进行系统评价，为HPV持续感染机制研究及抗HPV药物评价提供临床前工具。 方法 将6-8周龄雌性FVB/N小鼠随机分为空白对照组，环孢素对照组，MmuPV1组及MmuPV1+环孢素组（n = 9）。采用MmuPV1下生殖道攻击法造模，环孢素（75 mg/kg，皮下注射，每周5次）于感染前1周开始给药，持续至感染后2周。感染后每周采集阴道灌洗液检测病毒载量；感染6周后处死取材，HE染色观察宫颈阴道组织病理学变化，原位杂交检测MmuPV1 E1^E4转录本，免疫组化检测 E4及L1蛋白表达，流式细胞术检测脾脏及外周血T细胞亚群，ELISA检测外周血细胞因子IFN-γ、TNFα、IL-4、IL-10水平。结果 MmuPV1组病毒载量于感染后第2周病毒载量达峰后迅速下降，至第6周降至基线水平。MmuPV1+环孢素组自第2周起病毒载量持续高水平至实验终点，且显著高于MmuPV1组（P ＜ 0.01）。感染6周后，MmuPV1+环孢素组宫颈阴道组织出现典型CIN1级病变：基底细胞排列紊乱，不成熟的基底样细胞局限于上皮下1/3，中表层可见多个挖空细胞；病变区域的 E4/L1蛋白及 E1^E4转录本均呈阳性表达。单纯MmuPV1组未见明显病理改变，病毒学指标阴性。免疫学检测显示，MmuPV1+环孢素组脾脏及外周血CD3? T细胞比例显著降低（P ＜ 0.01），外周血IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10水平均显著下调（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）；而单纯MmuPV1组外周血CD3? T细胞比例显著升高（P ＜ 0.01），IFNγ、TNFα及IL4水平亦显著上调（P ＜ 0.05）。结论 MmuPV1联合环孢素可在免疫活性小鼠下生殖道成功建立乳头瘤病毒持续感染。该模型通过靶向T细胞免疫应答，成功复现了HPV持续感染的关键免疫特征，具有成模率高、病变窗口期提前、病毒学指标明确的特点，为HPV感染致癌机制研究及抗HPV药物筛选与评价提供了可靠的实验平台。
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类风湿关节炎SD大鼠模型的对比研究
Abstract:
目的 探讨胶原诱导性关节炎（CIA）与佐剂诱导性关节炎（AIA）SD大鼠模型中不同免疫注射部位（尾根部皮下与后足足跖部皮下）及溶剂（生理盐水与3.6%乙酸溶剂）对模型稳定性、炎症反应及病理进程的影响，优化CIA大鼠模型的构建方法。方法 将120只雌性SD大鼠随机分为10组，包括空白对照组、AIA模型组及8种不同CIA建模方案（区分免疫部位与溶剂）。动态观察各组大鼠在致敏后第7、14、21、28、35天的关节炎指数（AI）、血清抗环瓜氨酸肽抗体（抗-CCP）与类风湿因子（RF）抗体水平、踝关节组织病理变化以及IL-6、IL-17的蛋白与mRNA表达情况。结果 HAc-足足组（3.6%乙酸溶剂+双次后足足跖注射）在AI评分、血清抗-CCP与RF抗体水平及关节局部IL-6、IL-17表达方面均显著高于其他CIA组（P < 0.01），且上述指标在整个实验周期内保持高位稳定，踝关节HE染色显示其病理进程呈现典型的慢性、进行性特征，在模拟人RA方面明显优于传统AIA模型。传统AIA模型虽早期反应强烈，但第35天时病理显著缓解，呈现自限性。NS-足足组能诱导持续病理改变，但后期炎症强度有所回落。HAc-尾足组系统免疫应答强，但关节局部病理波动大，稳定性差。结论 HAc-足足方法所建立的动物模型，相较传统的AIA模型及HAc-尾足模型，表现出明显且稳定的类风湿关节炎慢性、进行性症状及病理特征，同时伴有高水平的IL-6、IL-17和抗-CCP、RF抗体，可能是一种较好的 RA SD大鼠模型。
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NLRP3基因敲除对溃疡性结肠炎小鼠血管生成与黏附分子表达的影响
Abstract:
目的 研究NLRP3基因敲除对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）小鼠血管生成及黏附分子表达的影响，并比较健脾化湿颗粒和美沙拉嗪干预后相关指标的表达变化。方法 将40 只野生型（wild type，WT）及40 只NLRP3基因敲除（NLRP3-/-）C57BL/6小鼠分别随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组和健脾化湿颗粒组，每组各10只。除两空白组外，其余6组均自由饮用3%葡聚糖硫酸钠（Dextran Sodium Sulfate， DSS）溶液5 d建立UC小鼠模型，成功造模后，各组给予相应溶液灌胃7 d。计算疾病活动指数（disease activity index， DAI）、记录结肠长度、苏木素?伊红染色评估结肠组织病理学改变，免疫组化法检测结肠组织中CD31、VCAM-1及VEGFR-2的阳性表达水平。结果 1.NLRP3-/-美沙拉嗪组第12天DAI评分显著高于WT美沙拉嗪组（P < 0.01），NLRP3-/-健脾化湿颗粒组第12天DAI评分显著高于WT健脾化湿颗粒组（P < 0.01)。2. 与WT模型组相比，WT美沙拉嗪组、WT健脾化湿颗粒组CD31、VCAM-1、VEGFR-2阳性表达量低于模型组（P < 0.01)。3. 与NLRP3-/-模型组相比，NLRP3-/-美沙拉嗪组、NLRP3-/-健脾化湿颗粒组CD31、VCAM-1、VEGFR-2阳性表达量低于模型组（P < 0.01）。4.两组模型组比较，NLRP3-/-组CD31、VCAM-1、VEGFR-2阳性表达量显著低于WT组（P < 0.01）。结论 敲除NLRP3基因可降低UC小鼠中CD31、VCAM-1、VEGFR-2表达，健脾化湿颗粒和美沙拉嗪可通过NLRP3抑制UC小鼠中血管生成、黏附分子的表达，以改善DSS诱导的UC小鼠结肠组织的病理改变。
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水蛭治疗糖尿病肾脏疾病的作用机制研究进展
韩欣园, 潘晶晶, 陈雅欣, 张凤奕, 张玉, 董树蔚, 刘一凡, 李玉杰
Abstract:
糖尿病肾脏疾病（Diabetic kidney disease，DKD）是糖尿病常见的并发症，是终末期肾病主要原因，尚无明确的具体机制研究。研究发现，DKD的发病机制主要与炎症反应、氧化应激、铁死亡、纤维化、代谢紊乱和血管功能障碍等相关，临床常用治疗药物以血糖控制、血压管理和血脂调控为主，尚无治愈方法，药物治疗有效但不理想。近来研究表明，水蛭可通过调节糖脂代谢紊乱、抑制铁死亡、抗炎症反应、抗纤维化以及调节细胞凋亡等多靶点、多通路治疗DKD。该研究对水蛭治疗DKD的具体途径和作用机制进行总结分析，旨在为未来进一步研究水蛭对治疗DKD提供参考，并对研发新药提供思路。
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焦虑动物模型与行为学评价方法研究进展
Abstract:
焦虑症是一种高发精神障碍性疾病，其病理机制研究及新药开发高度依赖有效的动物模型与行为学评价体系。本文系统综述了社会行为模型、条件反射模型、药物诱导模型及基因编辑模型等四类焦虑动物模型的构建原理、行为表型与神经机制，并分析了高架十字迷宫（elevated plus maze, EPM）、旷场实验（open field maze, OFT）等常用行为学体系操作要点、评价指标及优缺点。文章同时探讨了模型构建与行为评价中需注意的标准化、动物品系、性别差异以及环境控制等因素，并结合中医“病证结合”理念提出了构建证候动物模型的思路，旨在为焦虑症发病机制研究及治疗策略开发提供理论参考与方法学依据。
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跨膜转运蛋白zgc:158423功能缺失导致氧化磷酸化功能紊乱诱发脑出血
Abstract:
目的 探究SLC3A2同源基因zgc:158423对成年斑马鱼脑出血的调控及其机制。方法 利用CRISPR/Cas9技术获得zgc:158423斑马鱼突变体,将血管内皮细胞标记转基因鱼Tg(kdrl:eGFP)与zgc:158423突变体杂交,并通过自交和筛选后得到的zgc:158423-/-;Tg(kdrl:eGFP),使用激光共聚焦显微镜观察4 dpf和10 dpf幼鱼脑血管发育表型,并利用全脑组织透明化光片成像技术观察成年斑马鱼纯合突变体脑血管发育情况,统计不同年龄段的脑出血比例。对成年斑马鱼突变体全脑组织进行转录组测序和生物信息学分析,并利用RT-PCR检测相关基因表达。结果 斑马鱼基因zgc:158423为人类SLC3A2的直系同源基因,不同物种之间在序列保守性上呈现高度相似性。通过生物信息学分析与原位杂交实验,证实zgc:158423在发育过程中的野生型斑马鱼脑部血管内皮细胞呈特异性高表达。利用CRISPR/Cas9技术构建zgc:158423纯合突变体,观察到5、7、9 mpf成年斑马鱼出现脑出血表型,出血率明显升高。RNA-Seq结果显示,共获取2148个差异表达基因,其中上调950个,下调1198个,KEGG代谢通路分析表明,差异基因主要富集在氧化磷酸化信号通路,RT-qPCR检测结果显示该通路关键基因atp5l、atp5f1d、cox8a、cox17、ndufc2表达量明显下调,cox15表达量显著上调,氧化磷酸化信号通路功能发生紊乱。结论 在斑马鱼中zgc:158423基因缺失可导致氧化磷酸化信号通路功能紊乱进而诱发成年斑马鱼脑出血。
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内侧视前区GABA能神经元在抑郁焦虑障碍发病中的作用
马樱花, 李筱涵, 张浩, 李自发, 吴丽丹, 耿希文, 王新宇, 魏盛
Abstract:
抑郁焦虑障碍的发病率逐年攀升，已成为全球主要的公共卫生问题，严重影响了患者及其家庭的生活质量。探究抑郁焦虑障碍的发病机制并为其治疗开拓新的策略成为现代研究的热点和前沿。内侧视前区γ-氨基丁酸能神经元在情感调节方面扮演重要角色，其在该类疾病发病中的作用近年来得到广泛关注。然而，目前关于内侧视前区γ-氨基丁酸能神经元参与该类疾病的具体发病机制尚不清楚。本文系统性梳理了内侧视前区及其γ-氨基丁酸能神经元的生理功能，探讨了内侧视前区γ-氨基丁酸能神经元与抑郁焦虑障碍的关系，剖析了内侧视前区γ-氨基丁酸能神经元参与该类疾病发病机制研究中现存问题，展望以γ-氨基丁酸能神经元为中心，探索新的受体、靶点、通路的未来研究方向，以期为抑郁障碍、焦虑障碍临床治疗提供新策略，为针对该靶点新药开发提供新线索。
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瓜蒌薤白白酒汤通过调节肠道菌群增加NRs活性改善小鼠动脉粥样硬化的实验研究
何莹莹, 陈钰璘, 胡凯, 李闰珍, 蒙衍慧, 聂莎, 陈枝凡, 李宇稀, 唐耀平
Abstract:
【摘要】 目的 探讨瓜蒌薤白白酒汤（Gualou Xiebai Baijiu Decoction，GXB）通过调节肠道菌群（gut microbiota, GM），促进硝酸盐还原酶（nitrate reductase，NRs）的活性，改善动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的作用机制。 方法 将36只8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为四组：对照组（Control）、模型组（Model）、阿托伐他汀组（Ato）和瓜蒌薤白白酒汤组（GXB），每组9只小鼠。除Control组外，其余组高脂高胆固醇饲料喂养16周建模后按组别灌胃干预4周。通过油红O及HE染色观察斑块和血管形态，检测血清TG、TC、LDL-C、HDL-C及血清/肠液硝酸盐（NO3-）、亚硝酸盐（NO2-）、一氧化氮（NO）水平，并应用宏转录组测序分析GM结构与功能，同时，为验证功能分析的结果，进一步检测血清/肠液中的NRs和亚硝酸还原酶（nitrite reductase，NiRs）活性。结果 与Model组相比，GXB组显著改善小鼠AS的病理进展，血清TG、TC、LDL-C水平降低，HDL-C升高，血清和肠液中的NO3-、NO2-、NO水平上升。GM分析显示，GXB降低了AS小鼠GM的丰富度、提高均匀度，且显著降低厚壁菌门丰度，回升拟杆菌门和疣微菌门丰度等厌氧菌丰度。功能分析显示，GXB通过促进NRs活性，激活NO??–NO??–NO通路，提高了内源性NO水平。此外，与Model组相比，GXB组中血清/肠液的NRs、NiRs水平升高，与功能分析的结果一致。 结论 GXB可能通过改善GM结构与功能，增加肠道厌氧菌的丰度，促进NRs的活性，激活NO3--NO2--NO通路，提升内源性NO水平，进而改善血脂紊乱、减轻AS的病理损伤。
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基于cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路探讨酸枣仁抗抑郁的作用机制
Abstract:
【摘要】目的 本研究通过网络药理学、分子对接和动物实验探讨酸枣仁抗抑郁的作用及机制。方法 利用网络药理学构建“化合物-靶点-通路”网络，预测酸枣仁抗抑郁的作用靶点与信号通路，Autodock软件进行分子对接。采用孤养结合CUMS来复制抑郁模型，给予酸枣仁水提液( 1.95、3.9、7.8 g/kg)进行干预，通过糖水消耗实验、悬尾试验、强迫游泳实验观察小鼠行为学。HE染色观察小鼠海马神经元状态；采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β (IL-1β)及脑源性神经营养因子( BDNF)的含量。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马组织蛋白激酶A(PKA)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)和BDNF蛋白表达水平。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测PKA、CREB和BDNF mRNA 的表达。结果 共筛选得到酸枣仁有效活性成分9个，与抑郁症交集靶基因有103个。GO分析获得300条生物过程，53条细胞组分，107条分子功能，KEGG富集结果显示主要涉及神经活性配体-受体相互作用、cAMP信号通路等。分子对接结果显示酸枣仁中潜在活性成分与AKT1、PKA、CREB蛋白结合效果较好。动物实验研究结果显示，酸枣仁可显著改善CUMS抑郁模型小鼠的抑郁样行为，降低血清中TNF-α、IL-6及 IL-1β 水平，升高BDNF水平，改善海马神经元损伤。激活cAMP/PKA/CREB/BDNF 信号通路，提高PKA、p-CREB和BDNF蛋白表达水平，上调CREB和BDNF mRNA表达水平。结论 酸枣仁可改善CUMS模型小鼠的抑郁行为，且其抗抑郁作用可能与抑制促炎症细胞因子水平，激活cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路，保护海马神经元的结构和功能有关。 【关键词】酸枣仁；抑郁症；网络药理学；cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路；炎症因子
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卵巢功能减退肾虚肝郁证病证结合大鼠模型的建立与评价
Abstract:
【】 目的 结合疾病病因造模方法与肾虚肝郁证候造模方法建立卵巢功能减退(DOR)肾虚肝郁证病证结合大鼠模型。方法 采用重复制动应激建立DOR与肝郁证动物模型,结合左甲状腺素钠片灌胃建立肾虚证动物模型。将动情周期正常的8周龄SPF级SD雌性大鼠12只,随机分为对照组与DOR肾虚肝郁证组(模型组),每组6只。另取11月龄SPF级SD雌性大鼠6只作为围绝经期组。模型组予重复制动应激与左甲状腺素钠片灌胃,对照组与围绝经期组予生理盐水灌胃。记录大鼠的一般情况、体质量与阴道脱落细胞涂片情况,检测血清FSH、LH、E2和AMH水平,计算卵巢、子宫指数,卵巢病理切片与卵泡计数,检测卵巢组织FSH、AMH的表达。结果 DOR肾虚肝郁证组大鼠表现出精神萎靡、倦卧少动、情绪易怒易惊的特点,体质量增长速度显著减缓；阴道脱落细胞检查结果显示,动情周期的规律性变化消失；与对照组相比,DOR肾虚肝郁证组闭锁卵泡数、血清FSH、LH水平、卵巢组织中FSH表达显著增加(P＜0.05或P＜0.01),原始卵泡数、血清E2、AMH水平、卵巢组织中AMH表达显著减少(P＜0.05或P＜0.01)；与围绝经期组相比,DOR肾虚肝郁证组成熟卵泡数、闭锁卵泡数、血清FSH、E2水平、卵巢组织中FSH表达无统计学差异(P＞0.05)。结论? 重复制动应激联合左甲状腺素钠片灌胃方法能够成功构建符合DOR肾虚肝郁证特征的病证结合动物模型。
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麦粒灸对围绝经期失眠大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴和雌激素受体的影响
李欣, 张熙, 王甜, 羊璞, 林丽霞, 黄文静, 郑广玫, 黄心雨, 管银玲, 尹丽莉, 黄颖, 许智迤, 韦冈良, 李晓明, 粟胜勇
Abstract:
目的 观察基于阴阳本体结构理论指导下麦粒灸对围绝经期失眠模型（perimenopausal?insomnia,?PI）大鼠下丘脑-垂体-卵巢（hypothalamic-pituitary-ovarianaxis, HPO）轴和雌激素受体表达的影响。方法 将24只雌性Sprague-Dawley大鼠随机均分为3组，即假手术组、模型组和麦粒灸组，每组8只。模型组和麦粒灸组采用双侧卵巢摘除术（OVX）联合对氯苯丙氨酸（PCPA）混悬液腹腔注射（350mg/kg，连续2 d）建立PI大鼠模型。造模成功第2天开始干预治疗，麦粒灸组予麦粒灸“关元”“命门”“绝骨”，每日1次，每次6壮，连续干预14 d。干预结束后采用协同睡眠实验评估各组大鼠睡眠潜伏期 (sleep latency, SL) 和睡眠时间 (sleep time, ST)；苏木素-伊红染色法观察下丘脑、垂体组织形态学变化；酶联免疫吸附试验法分别检测下丘脑、垂体和血清的雌二醇（estradiol, E2）、促卵泡激素（follicle-stimulating hormone, FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone, LH）、促性腺激素释放激素（gonadotropin-releasing hormone, GnRH）水平和血清脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone, DHEA）、雄烯二酮（androstenedione, A4）含量；蛋白质免疫印迹法分别检测下丘脑和垂体的雌激素受体（estrogen receptors, ER）α、ERβ蛋白表达情况；实时荧光定量逆转录PCR分别检测下丘脑和垂体的雌激素受体基因ESR1、ESR2 m RNA和细胞色素P450 19A1（cytochrome P450 19A1, CYP19A1） m RNA表达情况。结果 与假手术组相比，模型组大鼠SL延长（P＜0.05），ST缩短（P＜0.05）；下丘脑细胞分布不均，大小各异，细胞皱缩数目较多；垂体腺细胞胞体肿胀，嗜碱性细胞数量增多，分布聚集；下丘脑、垂体和血清的GnRH、FSH、LH水平显著提高（P＜0.05），E2水平显著降低（P＜0.05）；血清DHEA、A4水平显著下降（P＜0.05）；下丘脑和垂体的ERα、ERβ蛋白表达显著降低（P＜0.05），ESR1、ESR2、CYP19A1 m RNA表达显著减少（P＜0.05）。与模型组相比，麦粒灸组大鼠SL显著缩短（P＜0.05），ST显著延长（P＜0.05）；下丘脑和垂体组织损伤减轻，细胞分布相对均匀，嗜碱性细胞数量较为正常；下丘脑、垂体和血清的GnRH、FSH、LH水平显著降低（P＜0.05），E2水平显著提高（P＜0.05）；血清DHEA、A4水平显著上升（P＜0.05）；下丘脑和垂体的ERα、ERβ蛋白表达显著提高（P＜0.05），ESR1、ESR2、CYP19A1 m RNA表达显著增加（P＜0.05）。结论 基于阴阳本体结构理论麦粒灸对PI模型大鼠具有神经保护作用，可改善大鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间，恢复睡眠-觉醒节律，其机制可能与调节性激素含量和雌激素受体水平、抑制HPO轴亢进有关。
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几种常见心肌闰盘形态观察方法比较
Abstract:
目的 为明确目前常用的几种组织学技术在揭示心肌闰盘（Intercalated Disc, ID）发育特征时的适用性和互补性，本研究对大鼠出生后关键发育阶段的ID结构进行了多维度的比较观察与方法学评价。方法 选取出生后7天7 d（P7）、14天 d（P14）及21天 d（P21）的野生型SD大鼠左心室心肌组织，分别采用常规苏木精-伊红（HE）染色、改良碘酸钠苏木精-伊红染色、免疫荧光（IF）染色及透射电子显微镜（TEM）4种技术，系统比较ID的宏观形态、关键连接蛋白（N-cadherin、Cx43）表达分布及超微结构发育特征。结果 常规HE染色清晰展示了心肌纤维从P7到P21增粗、排列趋于致密的结构变化，适用于组织整体发育评估，但无法辨识ID大体形态。改良碘酸钠苏木精-伊红染色增强染色对比度，使ID在组织切面上可被清晰定位观察，尤其在P21时呈现出典型阶梯状形态。。免疫荧光结果显示，N-cadherin于P14已基本完成向细胞末端的重定位，而Cx43的重定位进程相对滞后，至P21时仍有部分信号分布于细胞侧膜，揭示了不同连接蛋白的异步成熟模式。透射电镜观察证实，ID由初期散在连接逐步发育为结构复杂、连接分区明确的典型阶梯状超微结构，三种连接类型可清晰分辨，并与其功能定位呈高度一致。结论 四种技术在ID研究中优势互补：常规HE染色适用于评估整体组织学特征，但在评估ID形态上无特异优势；改良特染法（碘酸钠苏木精-伊红染色）可有效实现ID的宏观定位，但在辨识ID三种特征性连接结构上欠佳；免疫荧光可揭示ID特征性连接蛋白分子的时空动态与发育时序；透射电镜在解析ID组织形态全貌及其三种特征性连接结构发育特征细节上皆具有特异优势。建议在未来研究中根据研究目标整合多种技术，以实现对心肌连接结构从组织到分子、从形态到功能的系统性解析。
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哈它各其-7联合胡麻油通过调控炎症反应与GSK3β信号通路促进压疮愈合的研究
张心雨, 侯婧, 杨一枭, 魏林林, 刘春燕, 宋鹤天, 吴思元, 张志芳
Abstract:
目的 压疮主要由缺血再灌注机制引发，炎症反应和组织修复异常是其愈合受阻的关键因素。本研究基于网络药理学探讨蒙药哈它各其-7联合胡麻油对压疮创面愈合的作用机制，并采用分子对接与动物实验进行初步验证。方法 通过数据库检索及文献查阅获取哈它各其-7联合胡麻油的潜在活性成分、作用靶点以及压疮创面对应靶点；提取共同靶点构建蛋白质相互作用网络，并进行基因本体 (gene ontology, GO)分析、京都基因与基因组百科全书分析 (kyotoencyclopedia of genes and genomes, KEGG)以及分子对接。构建大鼠压疮模型，随机分为空白组、模型组、哈它各其-7组、胡麻油组、哈它各其-7联合胡麻油组和云南白药组（每组10只），给予相应药物干预14天，观察创面形态变化、创面愈合率、组织病理学变化并检测白介素-1β (Interleukin-1β, IL-1β)、白介素-6 (Interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α (Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α)、糖原合成酶激酶-3β (Glycogen Synthase Kinase-3β, GSK3β)、核因子κB P65亚基 (Nuclear factor kappa-B p65 subunit, NF-κB P65)、β-连环蛋白 (β-catenin)的表达水平。结果 网络药理学共筛选出35个活性成分、644个药物靶点和398个疾病靶点，核心靶点包括BCL2、TNF-α、NFKB1、IL-6、IL-1β和GSK3β，主要涉及TNF、炎症反应及Wnt信号通路。分子对接结果显示主要活性成分咖啡因、雌二醇与GSK3β、TNF-α、IL-1β、IL-6核心靶点具有较好的结合能力。动物实验结果表明，联合组创面愈合率最高且胶原沉积最丰富。联合组IL-1β、IL-6、TNF-α、GSK3β及NF-κB P65表达显著下调（P < 0.0001），且下调幅度优于单药组及云南白药组；单药组及云南白药组虽可下调上述指标，但与联合组相比，呈一定上调趋势（P < 0.05），联合组β-catenin表达显著上调（P < 0.0001），且上调幅度优于单药组及云南白药组（P < 0.05）。结论 哈它各其-7联合胡麻油可显著促进压疮愈合，其机制可能与抑制炎症反应及调控GSK3β信号通路有关。表明联合用药具有潜在的临床应用价值，为蒙药在压疮治疗中的转化提供实验依据。
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蓝花参通过调控 VAMP2 参与Tourette综合征免疫调节的作用及机制研究
Abstract:
目的:研究蓝花参通过调控 VAMP2参与对TS模型免疫调节的作用及机制。方法:3周龄的大鼠通过腹腔注射IDPN(250mg/kg/d)1周构建TS模型，刻板行为及运动行为评分均≥2分，表明造模成功。分为空白组、模型组、蓝花参组、空载组及VAMP2Si组，除空白组和模型组外，给予蓝花参水煎剂灌胃给药，剂量为3.12g/kg，每天1次，干预4周后，取全血分离单核细胞与血清，用于流式检测Th1、Th2、Th17、Treg、Breg、NK的细胞比例与ELISA法检测血清中IgA、IgM、IgE、IgG、lgD的含量，Western blot与RT-PCR检测VAMP2的表达情况。结果:蓝花参治疗与VAMP2低表达对TS大鼠的刻板行为及运动行为无明显影响。与空白组相比，模型组Breg、Th2、Treg含量下降，NK、Th1、Th17细胞含量上升，血清中IgA、IgM、IgE、lgD含量升高；与模型组相比，蓝花参治疗组辅助B细胞、TH2、Treg含量上升，NK、Th1、Th17细胞含量下降且IgA、IgM、IgE含量下降；与空载组相比，VAMP2的低表达使得辅助B细胞、Th2、Treg含量下降，NK、Th1、Th17细胞含量上升且血清中IgA、IgD水平升高。结论:蓝花参可以调节TS大鼠模型体液免疫和细胞免疫功能，而干扰VAMP2逆转了蓝花参对免疫细胞与部分抗体的调节作用，VAMP2可能对TS模型的免疫调节十分重要。
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穴位埋线通过纠正糖脂代谢紊乱和诱导白色脂肪褐变改善大鼠腹型肥胖
Abstract:
目的：观察穴位埋线对腹型肥胖大鼠肥胖程度、糖脂代谢和白色脂肪褐变的影响,探索其减重机制。方法：60只SD大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(50只),高脂饮食建立腹型肥胖模型。将造模成功的30只大鼠随机分为模型组、穴位埋线组和假埋线组(各10只)。穴位埋线组在麻醉下于“中脘”“关元”以及双侧“天枢”“大横”“带脉”“丰隆”“脾俞”行埋线治疗,1周1次,共8次；假埋线组不置入线体；空白组和模型组仅麻醉。检测各组体重、腹围、Lee’s指数、摄食量以及腹股沟白色脂肪(iWAT)质量、附睾白色脂肪(eWAT)质量、血清脂质(TC、TG、LDL-C和HDL-C)和胰岛素相关指标(FGB、FINS和HOMA-IR),Western blot和qPCR测定eWAT中白色脂肪褐变分子(UCP1、PGC-1α、PPARγ和PRDM16)蛋白和mRNA表达。结果：与空白组相比,模型组肥胖指标、脂肪组织质量(iWAT和eWAT)、FGB、FINS、HOMA-IR、TC、LDL-C升高,HDL-C下降,褐变分子表达下调(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。与模型组相比,穴位埋线组肥胖指标、脂肪组织质量(iWAT和eWAT)下降,糖脂代谢指标改善,褐变分子上调(P<0.05或P<0.01或P<0.001)；假埋线组与模型组上述指标差异不显著(P>0.05)。与假埋线组相比,穴位埋线组肥胖指标、iWAT质量下降,糖脂代谢改善,褐变分子表达增加(P<0.05或P<0.01或P<0.001),而eWAT质量差异无统计学意义(P>0.05)。结论：穴位埋线可改善腹型肥胖大鼠的肥胖状态,其机制可能与调节糖脂代谢、促进白色脂肪褐变有关。
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复方地黄颗粒对帕金森病阴虚动风证小鼠肠道菌群的调节作用
Abstract:
【】 目的 探讨复方地黄颗粒对帕金森病（Parkinson’s disease，PD）阴虚动风证小鼠肠道菌群的调节作用。方法 将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（Control group）、模型组（Model group）、复方地黄颗粒组（CDG group），每组10只。采用腹腔注射（30mg/kg）1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine，MPTP），每日1次，连续5 d，构建PD阴虚动风证小鼠模型。对照组注射等体积生理盐水。CDG组灌胃CDG（10 g/kg），对照组、模型组灌胃等量生理盐水，每日1次，共14d。通过旷场试验、爬杆实验评估各组小鼠的运动行为；蛋白免疫印迹法（Western blotting，WB）法及免疫组织化学染色（Immunohistochemistry，IHC）评估PD小鼠黑质病理损伤；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中炎症因子白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及脂多糖（LPS）的含量；免疫荧光染色（Immunofluorescence，IF）检测结肠中闭锁小带蛋白-1(ZO-1）蛋白的表达；16SrDNA测序检测粪便菌群组成丰度。 结果 模型组小鼠运动存在缺陷，血清IL-1β、TNF-α、LPS含量，酪氨酸羟化酶含量及结肠中ZO-1蛋白含量较对照组明显降低（P < 0.05）。给予CDG治疗后能显著改善小鼠的行为学及相关指标（P < 0.05）。16S rDNA显示，在门水平上，模型组中放线菌门、脱硫杆菌门丰度较对照组组显著增加（P < 0.05），同时属水平上脱硫弧菌属、厌氧菌属较对照组丰度明显增加（P<0.05）；CDG组双歧杆菌属及乳酸杆菌属丰度较对照组明显增加（P<0.05）；CDG治疗后杜博氏菌属、Coriobacteriaceae_UCG-002丰度较模型组明显增加（P<0.01），脱硫弧菌属、厌氧菌属丰度较模型组明显降低（P<0.05）。结论 CDG通过调节菌群紊乱，抑制血清炎症，恢复肠道屏障，改善PD阴虚动风证PD小鼠多巴胺能神经元损伤及运动功能障碍。
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慢性皮肤溃疡动物模型评估与构建策略的研究进展
Abstract:
慢性皮肤溃疡（chronic cutaneous ulcer, CCU）发病机制复杂，涉及持续炎症、菌群失调及微循环障碍等多重病理因素交互，在揭示其发病机制及相关药物研究的过程中，动物模型发挥着不可替代的作用，是连接基础研究和临床应用的重要桥梁，其标准化和规范化对提高研究质量、加快医学转化速度具有重要意义。然而，现阶段主流CCU动物模型主要基于以急性损伤修复为特征的单因素构建策略，如全层皮肤切除模型，其在模拟持续性炎症、菌群失调及微循环障碍等核心临床病理特征方面存在明显局限，难以真实再现CCU的慢性化进程与治疗抵抗机制。因此，本文系统剖析CCU动物模型构建策略与局限，提出以多因素复合模型为核心的创新构建体系。该体系突破传统“单因素-急性损伤”的建模范式，遵循“创面基础-病理叠加-慢性化形成”的逻辑顺序，通过时序性整合代谢紊乱、缺血、感染等核心致病因素，实现创面从静态向动态病理的转变，从而高度重现临床CCU的复杂微环境与难愈特征，并进一步构建涵盖物种选择、参数标准化及评价体系的框架，旨在为提升CCU动物模型的病理还原度与临床预测价值提供系统解决方案与理论支撑。
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基于PINK1/Parkin信号通路探讨黄芪甲苷对肺癌癌因性疲乏的改善作用
Abstract:
目的 本研究旨在探讨黄芪甲苷(Astragaloside IV, AS-IV)对肺癌顺铂化疗所致癌因性疲乏(Cancer-related fatigue, CRF)的治疗作用及其分子机制。方法 将18只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和AS-IV组(n=6)。采用Lewis肺癌细胞皮下移植联合顺铂(4 mg/kg)建立CRF小鼠模型,通过综合评估行为学指标、生化指标以及骨骼肌病理学特征,系统评价AS-IV(20 mg/kg)的治疗效果及作用机制。结果 与对照组相比,模型组小鼠表现出典型的CRF特征,表现为体重增长迟缓、旷场实验运动距离减少、力竭游泳时间缩短、悬尾不动时间延长(均P<0.001)。另外,模型组小鼠腓肠肌重量降低(P<0.01),伴有明显的肌纤维萎缩和线粒体结构损伤。与模型组相比,AS-IV有效增加了小鼠体重、腓肠肌重量及旷场实验运动距离,并缩短了力竭游泳及悬尾不动的总时间。AS-IV治疗增加了腓肠肌横截面积、减轻氧化应激状态(SOD水平升高和MDA水平下降,均P<0.01)并增加ATP含量(P<0.001)。Western Blot结果显示,AS-IV组上调线粒体自噬关键蛋白PINK1、Parkin和BNIP3的表达,同时下调TOMM20、p62及HIF-1α(均P<0.05)的表达水平。结论 AS-IV通过PINK1/Parkin通路上调线粒体自噬水平、抑制氧化应激及改善能量代谢障碍,从而有效缓解肺癌顺铂化疗相关性CRF。
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基于电容传感的模拟失重小鼠舔水行为监测装置设计与实验研究
Abstract:
目的 小动物模型，尤其是小鼠，常用于模拟航天飞行过程对机体多系统的影响。本研究旨在开发一种适用于模拟失重环境的舔水行为监测装置，以探索失重状态下中枢调控及奖赏系统的行为学表现。方法 设计并开发一种基于电容感应原理的舔水行为自动记录装置，采用555定时器构建RC振荡电路，利用舌头接触金属壶嘴引起的电容变化生成频率信号，实现舔水事件检测。使用该系统对模拟失重条件下的小鼠进行连续行为监测，分析舔水节律、行为结构、糖水偏好等指标。结果 装置在非接地、低干扰条件下可稳定记录小鼠舔水行为，并识别出行为节律变化。后肢卸载模型（hindlimb unloading, HU）模拟失重导致小鼠夜间舔水减少、日间舔水增加，昼夜节律出现紊乱，且舔水间隔时间延长。HU14 d组小鼠糖水偏好显著下降，提示其奖赏系统功能受抑。结论 本研究建立的舔水行为监测系统适用于模拟失重环境下动物饮水行为的自动化记录，具备高时效、低干扰、无需接地等优势。研究结果揭示了失重环境对饮水节律与中枢奖赏调控的影响，并为空间神经行为研究及健康风险监测提供了新的行为学评价工具。
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家犬作为自然动物模型在癫痫研究中的应用
Abstract:
癫痫是一种在人类和犬中均较常见的神经性疾病，且犬自然发生的癫痫与人类癫痫在流行病学、临床表现及药理反应方面高度相似，这使得犬成为研究人类癫痫理想的转化模型。本文简介了犬癫痫的流行病学特征；概述了犬癫痫脑电图检测、生物标记物诊断、遗传分子机制及神经行为合并症的研究进展；总结了犬癫痫的抗癫痫药物治疗及其他治疗方法研究现状；论述了犬自发癫痫诊断及治疗在人类癫痫研究中的应用借鉴。旨在为我国开展癫痫机制研究及开发诊疗手段提供跨物种理论与技术转化路径参考。
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低滴度流感病毒-金黄色葡萄球菌共感染模型建立及对肺泡气血屏障影响
徐令泽, 林佳坤, 刘孝云, 叶冬雪, 刘美怡, 周万辉, 程世娟, 杨 佳, 容 蓉, 杨 勇
Abstract:
目的 建立低滴度流感病毒-金黄色葡萄球菌(流感-金葡菌)共感染小鼠模型模拟临床常见混合感染状况,并探讨此模型对小鼠肺泡气血屏障的影响。方法 通过对不同滴度的流感病毒、金葡菌致病状况进行筛选,于第0天给予雄性BALB/c小鼠滴鼻流感病毒(0.10 TCID50,每只20 μL),第3天滴鼻感染金葡菌(1 × 106 CFU,每只20 μL),建立低滴度流感-金葡菌共感染小鼠模型,并比较宿主机体损伤及肺泡黏附蛋白/紧密连接蛋白变化。于共感染24 h后连续口服给药3天,H E染色评价肺组织病理损伤,RT-qPCR检测肺组织中流感病毒M基因的相对表达量,涂布法测定小鼠肺组织中细菌载量,并检测肺组织中气血屏障黏附蛋白/紧密连接蛋白的基因及蛋白表达。结果 低滴度流感病毒(0.10 TCID50)和金黄色葡萄球菌(1 × 106 CFU)共感染会导致严重症状,共感染组小鼠体重显著性下降,胸腺指数显著降低(P<0.05),肺指数显著升高(P<0.05),M基因相对表达量与流感组相比显著升高(P<0.05),细菌载量与金葡组相比显著升高(P<0.05)；与空白组相比,共感染组小鼠肺组织中Cadherin 5、ZO 1、Claudin-5和Occludin基因相对表达量显著降低(P<0.05),肺组织中IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等炎性细胞因子的相对表达量明显升高。柴胡桂枝汤干预可有效减轻共感染组小鼠体重下降趋势,并降低小鼠肺部炎性细胞因子表达量,改善肺部炎症。结论 本研究建立了体现临床常见共感染特征的小鼠模型,病原微生物复制及炎症因子损伤都明显高于单独感染组,中药复方柴胡桂枝汤干预能减轻共感染模型的病理损伤。
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肌筋膜疼痛综合症的动物模型的建立及评估方法
Abstract:
肌筋膜疼痛综合征（myofascial pain syndrome, MPS）是发生于肌肉及周围筋膜的肌肉骨骼疼痛，病理特征包括局部疼痛、肌肉组织中出现肌筋膜触发点（myofascial trigger points, MTrPs）以及异常自发放电活动。为深入研究MPS的病理机制并开发新型治疗方法，建立可靠的动物模型至关重要。基于MPS的临床病理特征，研究者已开发出多种动物模型构建方法，包括电刺激、药物诱导、打击结合离心等。本文综述当前主流的MPS动物模型的建立方法及其适用场景，并对现有的模型评估体系的优势及局限性提出了多维客观的分析，以期为未来构建更加符合MPS病理发生的模型以及为深入研究MPS提供参考。
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营养与睡眠研究中的动物模型研究应用与进展
Abstract:
营养与睡眠是维持机体健康的两大核心要素，二者通过复杂的双向调控网络相互影响。然而，由于伦理限制和技术挑战，人体研究难以直接验证其因果机制。因此，本研究系统评述动物模型在该领域的应用，以揭示营养-睡眠相互作用的潜在机制，并为未来研究提供参考。本研究以动物模型类别为框架，整合当前用于研究营养与睡眠相互作用的临床前模型。首先，综述啮齿类动物（如小鼠、大鼠）模型，分析通过饮食干预（如高脂饮食、限时喂食）、物理或化学手段诱导的睡眠障碍模型，并结合具体研究案例，探讨特定营养素（氨基酸、脂肪酸、维生素等）对睡眠的调控作用。其次，评述非啮齿类模型（如果蝇、斑马鱼、线虫）在遗传学和神经环路研究中的优势，重点分析其揭示的跨物种保守信号通路。研究发现，营养状态可通过能量代谢、神经递质系统（如5-HT、GABA）调控网络影响睡眠。啮齿类模型表明，高脂饮食可导致睡眠片段化，而特定营养素（如色氨酸、镁）可改善睡眠质量，并揭示肠-脑轴在营养睡眠调控中的关键作用。非啮齿类模型则中发现了高度保守的营养感应通路。动物模型为营养-睡眠研究提供了重要的因果机制验证工具，但其结果需谨慎外推至人类。未来研究应结合多组学技术、跨物种比较及临床数据，以优化实验模型并提高转化价值。
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肾纤康通过下调COMP防治FGF23-klotho轴依赖的CKD-MBD大鼠的肾骨异常
谭碧玉, 李树玲, 唐伟力, 杜小梅, 粟宏伟, 刘建, 张琼, 胡琼丹
Abstract:
目的：探讨肾纤康对慢性肾脏病-矿物质和骨代谢异常(chronic kidney disease-mineral and bone disorder，CKD-MBD)的防治作用和潜在机制。方法：将30只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、肾纤康高剂量组、肾纤康低剂量组、阳性对照组。除假手术组外，其余各组均行单侧肾切除术，在术后第5天开始予以含0.75%腺嘌呤饲料喂养，并同时予以肾纤康高剂量（34.9 g/kg）、肾纤康低剂量（8.7 g/kg）和阿法骨化醇灌胃（30 ng/kg）给药，假手术组予以等量蒸馏水。术后第26天处死大鼠收集血清、肾脏及股骨标本，检测大鼠血清肌酐（Serum creatinine, Scr）、尿素氮（Blood Urea Nitrogen, BUN）水平；酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中骨碱性磷酸酶（Bone Alkaline Phosphatase, BALP）、全段甲状旁腺激素（intact Parathyroid Hormone, iPTH）、维生素D3（Vitamin D3, VD3）、软骨寡聚基质蛋白（Cartilage Oligomeric Matrix Protein, COMP）、成纤维细胞生长因子23（fibroblast growth factor 23, FGF23）、klotho、FGFR1含量；苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色、天狼星红（PSR）染色观察肾脏组织病理学改变；HE染色、Masson染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察股骨组织形态；显微CT（Micro-CT）分析股骨结构特性；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织中COMP、FGF23、klotho、FGFR1 mRNA及蛋白水平；免疫组化观察肾和骨组织中COMP、FGF23、klotho、FGFR1的表达。结果：与假手术组相比，CKD-MBD模型组大鼠血清中Scr、BUN、BALP、iPTH水平显著增高（P<0.01），VD3水平显著降低（P<0.01）；肾小管扩张、肾间质炎性细胞浸润和肾小球及肾间质可见大量胶原纤维沉积等病理损伤；股骨骨小梁数量减少，骨小梁内胶原纤维增多，骨小梁周围破骨细胞增多，骨质疏松症样病变；与模型组相比，在肾功能和骨代谢方面，肾纤康高、低剂量组血清中Scr、BUN水平明显降低（P<0.01，P<0.05），各用药组BALP、iPTH水平明显回落（P<0.01）且VD3水平显著回升（P<0.01）；在肾脏病理方面，肾纤康高、低剂量组大鼠肾脏损伤减轻、胶原纤维沉积减少、炎性浸润减少，阿法骨化醇组无明显改善；在股骨病理方面，各用药组股骨骨小梁数量不等程度增多、骨小梁内胶原纤维不等程度减少、骨小梁周围破骨细胞数量不等程度减少，骨质疏松病变改善明显；围绕COMP及FGF23-klotho信号轴，与假手术组相比，ELISA检测模型组血清中COMP、FGF23水平明显升高（P<0.01），klotho、FGFR1水平明显降低（P<0.01）；肾组织中，PCR和WB检测发现COMP、FGF23 mRNA及蛋白水平上调（P<0.01），klotho、FGFR1 mRNA及蛋白水平下调（P<0.01）；肾和骨组织中免疫组化染色上述指标表达情况与WB趋势一致（P<0.01）。与模型组相比，ELISA检测各用药组血清中COMP、FGF23 水平明显回落（P<0.01），klotho、FGFR1水平明显回升（P<0.01，P<0.05）；在肾组织中，PCR、WB检测发现各用药组COMP、FGF23 mRNA及蛋白水平回落（P<0.01）、klotho和FGFR1 mRNA及蛋白水平回升（P<0.01，P<0.05），肾和骨组织中免疫组化染色上述指标表达情况与WB趋势一致。结论：肾纤康能有效防治CKD-MBD大鼠的肾骨异常，其机制可能与下调COMP和调控FGF23-klotho信号轴有关，且肾纤康高剂量组效果最佳。
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一种改良的小鼠铜绿假单胞菌慢性肺部感染模型的建立与评价
Abstract:
目的 建立小鼠铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa, PA）慢性肺部感染模型，并对该模型进行系统评价，为药物治疗PA慢性肺部感染提供一种可靠的模型建立方法。方法 通过一种改良的简便可行的方法制备包被铜绿假单胞菌（PA）的藻酸盐微菌珠，采用气管插管滴注法构建小鼠铜绿假单胞菌慢性肺部感染模型。通过观察小鼠生理状态变化，血常规分析，肺泡灌洗液与肺组织载菌量测定、炎症因子表达量测定及组织病理切片分析对模型是否成功进行系统评价并确认。结果 当小鼠经气管内滴注包被铜绿假单胞菌的藻酸盐微菌珠后，与正常组及生理盐水藻酸盐微珠组相比，感染组小鼠生理状态不佳，体重减轻。其肺组织匀浆液及肺泡灌洗液均培养出铜绿假单胞菌，且血液中白细胞和中性粒细胞数目显著增多，同时肺泡灌洗液中促炎因子TNF-α及降钙素原（PCT）含量均显著升高。此外，肺组织病理切片HE染色和Masson染色结果也显示模型组小鼠肺组织有明显的炎症细胞浸润及病理改变。结论 本研究通过改良的方法成功制备了包裹PA的藻酸盐微菌珠，将其通过气管插管滴注法接种至小鼠肺部，成功建立了小鼠铜绿假单胞菌慢性肺部感染动物模型，为PA的药物治疗提供了一种切实可行的实验动物模型。
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巨噬细胞特异性敲除KLF2对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的影响
Abstract:
目的 建立载脂蛋白E（ApoE）和巨噬细胞特异性Krüppel样因子2（Krüppel-like factor 2，KLF2）双基因敲除小鼠模型，观察巨噬细胞KLF2对小鼠动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的调控作用。方法 KLF2flox/flox/ Lyz2-Cre+小鼠与ApoE-/-小鼠的子代通过繁配、多轮筛选得到基因型为KLF2flox/flox/ Lyz2-Cre+/ ApoE-/-小鼠。使用qRT-PCR、Western Blot对KLF2 mRNA、蛋白敲除水平进行验证。高脂饲料喂养诱导AS小鼠模型，观察模型组小鼠（基因型KLF2flox/flox/ Lyz2-Cre+/ ApoE-/-）与对照组小鼠（基因型KLF2flox/flox/ ApoE-/-）斑块水平及脂质代谢差异。结果 建立了KLF2flox/flox/ Lyz2-Cre+/ ApoE-/-基因型小鼠，即ApoE和巨噬细胞特异性KLF2双基因敲除小鼠。病理染色显示，模型组小鼠主动脉根部斑块面积、脂质堆积水平较对照组小鼠显著升高。脂质代谢方面，与对照组小鼠比较，模型组小鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平、肝脏脂质堆积水平显著升高。此外，模型组小鼠主动脉根部斑块巨噬细胞浸润水平较对照组显著升高。结论 巨噬细胞特异性敲除KLF2促进小鼠AS斑块进展，这可能与KLF2调控巨噬细胞代谢、粘附及迁移有关。本研究为进一步挖掘巨噬细胞KLF2对AS相关疾病的调控机制提供有效动物和奠定实验基础。
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低氧间充质干细胞外泌体治妊糖大鼠及机制
Abstract:
目的:探讨低氧预处理的间充质干细胞外泌体（hMSC-Exos）对妊娠期糖尿病（GDM）大鼠模型的疗效、机制及安全性，评估其作为GDM新型治疗策略的潜力。方法:人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）于5% O2条件下培养，采用超滤浓缩结合超速离心法分离外泌体。雌性SD大鼠随机分为四组（每组10只）:正常妊娠对照组（Control）、GDM模型组（Diabetic）、hMSC-Exos治疗组（Exosome）、胰岛素治疗组（Insulin）。妊娠第0天腹腔注射链脲佐菌素（STZ，1%，pH 4.5）建立GDM模型，每日监测体重、血糖，于建模成功日（D0），D5，D10，D15检测糖化血红蛋白（HbA1c）并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。于D0及D15行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)，并计算曲线下面积(AUC)。超声评估妊娠大鼠不同时期胎儿发育。妊娠结束时检测血常规，淋巴细胞亚群（Th17、Treg）及妊娠结局。结果:与Diabetic组相比，Exosome组自D15起体重显著增加（P<0.0001）；自D10起血糖显著降低（P<0.0001），并于D20接近正常水平。Exosome组HbA1c自D10显著降低（P<0.0001），D15时较Diabetic组降低22.6%；妊娠末期，Exosome组HOMA-IR显著低于Diabetic组（P<0.0001）；D15时OGTT-AUC降低46.65%（P<0.0001）；超声显示Exosome组宫内生长受限改善；治疗未引发严重血液毒性或免疫失衡，Exosome组Th17比例显著低于Diabetic组（P<0.0001），Treg比例显著高于Diabetic组（P<0.05），Th17/Treg比值下降3倍；胎儿体重及数量均显著高于Diabetic组（P<0.001）。结论:hMSC-Exos治疗可有效改善GDM大鼠血糖代谢、减轻胰岛素抵抗，并通过调节Th17/Treg免疫平衡改善妊娠环境，促进胎儿发育，安全性良好。
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青春期慢性应激对成年期应激易感性的远期影响：性别依赖的效应
Abstract:
目的 基于小鼠模型探讨青春期慢性应激对成年期心理韧性的影响及其性别差异。 方法 构建青春期慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)联合成年期习得性无助(learned helplessness,LH)评价的小鼠模型。在青春期(4-7周龄),实验组接受慢性束缚应激(CRS,每天2小时,持续21天),对照组(Ctrl)正常饲养。于7周龄时,分别通过旷场实验(open field test,OFT)、高架十字迷宫(elevated plus maze,EPM)、Y迷宫(Y-maze)和强迫游泳实验(forced swim test,FST)评估小鼠的运动能力、焦虑样行为、空间记忆能力和抑郁样行为。在8-11周龄期间,两组小鼠均正常饲养,并于第10周再次进行FST实验,以观察青春期CRS对成年行为的远期影响。进入成年期(11-14周龄)后,对两组小鼠进行习得性无助(LH)训练,通过逃避潜伏期和失败次数评价其对急性应激的敏感性和心理韧性。 结果 青春期CRS导致雄性和雌性小鼠体质量显著降低(P <0.05)。行为学测试显示,实验组小鼠在FST的不动时间显著增加(P <0.05),其他行为(OFT、EPM、Y迷宫)无显著差异(P >0.05)。经过3周恢复期后,实验组体质量仍低于对照组(P <0.05),但FST的不动时间已无显著差异。小鼠成年后通过LH测试发现,雄鼠中,实验组的易感(sus)比例较对照组显著升高(P <0.05),耐受(res)比例无统计学差异；而雌鼠中,实验组的易感比例和耐受比例较对照组均无统计学差异。 结论 青春期慢性应激对小鼠心理韧性的影响存在性别差异：雄鼠表现出长期心理韧性降低,而雌鼠没有显著差异。该实验动物模型可为深入研究青春期应激与成年抑郁症性别差异的机制及开发相应干预策略提供依据。
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金黄色葡萄球菌隐匿预定植（伏邪）序贯感染H1N1流感小鼠模型的建立及发病机制初步探索
孙琳涵, 孙启慧, 杨佳, 周万辉, 程世娟, 刘孝云, 叶冬雪, 容蓉, 杨勇
Abstract:
目的:建立符合中医“伏邪”理论的金黄色葡萄球菌（金葡菌）隐匿预定植（“伏邪”）序贯感染H1N1流感病毒致重症肺炎小鼠模型，初步探索“伏邪”在继发感染H1N1流感病毒重症疾病模型中的致病机制。方法:Balb/c小鼠滴鼻定植金葡菌，分别于第30 d、45 d、60 d序贯感染H1N1流感病毒，染毒7 d后脱颈椎处死并解剖取材。测定肺、脾、胸腺指数评估脏器损伤，H&E染色观察肺组织病理学特征，RT-qPCR检测肺组织中病毒载量及炎症因子表达水平，结合流式细胞术分析肺泡巨噬细胞分型。结果:金葡菌隐匿预定植后，小鼠一般状态良好，体重呈稳定上升趋势。序贯感染H1N1病毒后，流感组及金葡菌+流感组小鼠体重显著下降（P<0.001），其中金葡菌+流感组下降更为明显。脏器指数结果显示，流感组及金葡菌+流感组小鼠肺指数显著升高（P<0.001）。病理学结果显示，流感组及金葡菌+流感组小鼠肺组织均表现出肺泡壁增厚及结构破坏，金葡菌+流感组病变更为严重。随金葡菌定植时间延长，金葡菌+流感组体重及病理损伤程度逐渐趋近于流感组；RT-qPCR结果显示，两组小鼠肺组织病毒载量显著升高（P<0.001），炎症相关因子基因表达水平均上调。流式细胞术结果表明，金葡菌隐匿预定植30 d后，与正常组相比金葡菌组M2型肺泡巨噬细胞比例显著性升高（P<0.05）；流感组、金葡菌+流感组的M1型肺泡巨噬细胞比例显著增加（P<0.001），金葡菌+流感组的M2型巨噬细胞亦显著提高（P<0.01）。金葡菌隐匿预定植45 d及60 d后，正常组与金葡菌组、流感组与金葡菌+流感组间肺泡巨噬细胞分型无显著差异。结论:金葡菌隐匿预定植会导致继发感染H1N1流感病毒时机体损伤加重，随定植时间延长对机体影响逐渐降低。本研究发现，金葡菌隐匿预定植30 d后再序贯感染H1N1流感病毒可建立符合中医“伏邪”理论的重症肺炎小鼠模型；初步机制研究表明金葡菌预定植可调控宿主肺泡巨噬细胞向M2型极化，降低机体免疫应答，进而在序贯感染H1N1流感时出现严重的肺病理损伤。
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中药调控铁死亡干预糖尿病肾病的研究进展
Abstract:
糖尿病肾病(DKD)是糖尿病严重的微血管并发症,它已成为糖尿病和终末期肾病患者死亡的主要原因。铁死亡是一种以铁依赖性脂质过氧化物过度累积为特征的新型细胞程序性死亡方式,在DKD的发生与发展中扮演关键驱动角色。近年来的多种研究表明,DKD在发生与发展过程中通过诱发铁代谢紊乱、抑制System Xc?/GPX4/GSH抗氧化通路、导致脂质过氧化爆发等机制,促进肾脏固有细胞(包括肾小管上皮细胞、足细胞及系膜细胞)的铁死亡,进而导致了肾损伤进程加快。而中医药在防治DKD方面具有多成分、多靶点的整体调节优势。本文系统综述了中药复方(如参芪地黄汤、芪蒡糖肾方等)及活性成分(如黄芪甲苷、马齿苋多糖、红景天苷等)通过调控铁死亡相关通路(如Fe2+、Nrf2/GPX4等),抑制脂质过氧化、调节铁稳态、缓解氧化应激与炎症反应,从而延缓DKD进展的作用机制。现有研究突显了中医药靶向铁死亡在DKD治疗中的巨大潜力,为开发新的肾脏保护策略提供了重要理论依据与研究方向。
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肾虚血瘀型Kümmell病大鼠模型的构建与验证
王东平, 刘畅, 朱一豪, 古淑灵, 成品莹, 高逸涵, 冯紫淇, 李子彬, 李永贤, 张顺聪
Abstract:
目的 建立评价肾虚血瘀型Kümmell病(Kümmell disease, KD)的动物模型以探究其潜在治疗靶点与作用机制。方法 将24只SD大鼠随机分为假手术组、对照组与模型组。模型组行卵巢切除术诱导肾虚状态,2个月后于尾椎制造骨缺损模型,施加4周机械应力。骨缺损术后1周皮下注射盐酸肾上腺素诱导血瘀证。对照组行卵巢切除与骨缺损术,注射生理盐水。监测各组体温、体重、摄食饮水量及舌象变化。建模结束后进行行为学观察,并行影像学、血液流变学及组织病理学检测。结果 模型组较假手术组及对照组呈现体温升高、体重减轻、摄食减少、舌质紫暗伴舌下络脉迂曲、毛发枯槁、精神萎靡及运动障碍。影像学显示模型组皮质变薄、骨小梁稀疏断裂、椎体内真空裂隙征。血液学检测提示模型组全血黏度(低/中/高切)及血浆黏度显著升高,纤维蛋白原上升,凝血酶时间、凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间缩短；血清钙磷降低,骨转换标志物升高；甲状腺激素及雌二醇水平较假手术组显著降低。组织学显示模型组骨小梁结构破坏,新生骨低于对照组。结论 卵巢切除联合肾上腺素诱导及机械应力干预可成功构建肾虚血瘀证候的KD大鼠模型。
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藤黄酸通过调控LRRC8A表达对胰腺癌化疗敏感性的影响
Abstract:
【】 目的 探讨藤黄酸（gambogic acid，GA）对胰腺癌细胞吉西他滨（gemcitabine，GEM）化疗敏感性的调控作用及其潜在分子机制。方法 采用GEM浓度递增法构建胰腺癌耐药细胞株，评估GA对耐药细胞的增殖抑制效应。通过实时荧光定量PCR（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）检测GA对富含亮氨酸重复序列蛋白8A（LRRC8A）表达的影响。进一步构建LRRC8A敲低的胰腺癌类器官（patient-derived organoids，PDOs）模型，利用Cell Titer-Glo发光法测定敲低LRRC8A后GEM的半数抑制浓度（IC50），探究GA联合GEM对细胞活力的协同作用。运用网络药理学与分子对接技术预测GA降低耐药的潜在靶点，并通过Western blot实验进行验证。建立胰腺癌异种移植小鼠模型，观察GA治疗对肿瘤体积的影响，并通过免疫组化（IHC）检测LRRC8A在治疗前后表达水平的变化。结果 GA显著抑制胰腺癌耐药细胞及PDOs的生长，且通过调节LRRC8A/STAT3信号通路有效提高细胞对GEM的敏感性（P<0.01）。体内实验进一步证实，GA干预可显著降低LRRC8A的表达水平（P<0.01），并抑制胰腺癌的生长（P<0.01）。结论 GA可通过抑制LRRC8A的表达，增强胰腺癌细胞对GEM的化疗敏感性。
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基于miRNA转录组学和蛋白质组学探究金银花延缓肾衰老的作用及机制
Abstract:
目的 本研究旨在探索金银花延缓肾衰老的作用及机制。方法 采用D-半乳糖（D-gal）腹腔注射构建小鼠肾衰老模型，同时给予金银花水煎液灌胃。行为学实验结束后采集各组小鼠肾脏组织，进行酶联免疫吸附测定实验(ELISA)和半乳糖苷酶染色实验（SA-β-gal）检验造模情况和金银花的作用，然后进行miRNA转录组学和蛋白质组学测序，鉴定出具有统计学意义的差异表达miRNA（DEMs）和差异表达蛋白质（DEPs），并利用GO、KEGG数据库对这些DEMs和DEPs进行功能注释和通路分析。 结果 水迷宫和负重游泳实验结果表明，与对照组相比，模型组小鼠表现出学习记忆能力下降及运动耐力降低等衰老相关特征(P<0.05），金银花干预后，衰老相关特征显著改善(P<0.05）；ELISA和SA-β-gal染色结果表明，模型组小鼠肾脏IL-6含量及SA-β-gal染色阳性面积百分比较对照组均显著增加（P<0.001），金银花干预后，小鼠肾脏IL-6含量及SA-β-gal染色阳性面积百分比均显著减少（P<0.01）。通过miRNA转录组学和蛋白质组学筛选出11个显著DEMs和8个显著DEPs，对这些DEM和DEP的靶基因进行交集处理后，发现miR-146b-3p/Tmprss13是1对关键互作分子，miR-150-3p/Brpf1、miR-1934-5p/Cln8是两对同时受金银花下调的miRNA和蛋白质。GO和KEGG富集分析结果显示，金银花可能通过激活MAPK通路中具有显著差异表达的基因LjREcsit（Lonicera japonica-regulated Ecsit）来干扰肾衰老进程。结论 金银花能显著延缓D-gal所诱导的小鼠肾衰老，其机制可能是通过抑制miR-146b-3p进一步激活Tmprss13或下调miR-150-3p/Brpf1、miR-1934-5p/Cln8以延缓肾衰老，LjREcsit介导的MAPK信号通路的调控也是金银花延缓肾衰老的关键。
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宣肺化浊丸对湿热型肺炎的作用及机制研究
赵佳丽, 张慧娟, 梁夏丽, 王燕如, 田雅文, 张志明, 靳晓杰, 刘永琦
Abstract:
目的:本研究旨在探讨宣肺化浊丸(XuanFei HuaZhuo Pill, XFHZP)对湿热型肺炎(Damp-Heat pneumonia, DH)作用,并通过蛋白质组学技术揭示其治疗DH的机制,为中医药治疗肺炎提供实验依据。方法:建立DH大鼠模型。通过体征观察及评分(一般情况、舌、耳、爪甲、小便、大便)、肺指数、肺组织HE染色,肺组织白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定,血细胞计数:白细胞(WBC)、中心粒细胞(Gran)、单核细胞(Mon)、平均血小板体积(MPV),大鼠肺功能检测呼吸频率(F)和分钟通气量(MV)等,明确XFHZP治理湿热型肺炎的疗效。利用Astral DIA定量蛋白组学技术检测CON组、DH组和XFHZP+DH组大鼠的右肺下叶,分析CON组-DH组、DH组-XFHZP+DH组之间的差异表达蛋白(differentially expressed proteins, DEPs)。并通过生物信息学分析DEPs的KEGG富集分析。采用免疫组化对上述分析所得的差异表达蛋白,采用Western blot对差异表达蛋白及其下游蛋白的表达含量进行检测和验证。结果:与空白对照(control,CON)组比较,DH组大鼠出现狂躁、舌色红、耳背血管充盈、小便色黄及大便粘滞等症状；肺指数升高,肺组织HE染色出现肺泡壁增厚,炎细胞浸润,肺泡毛细血管充血扩等病变,肺组织中IL-6及TNF-α含量显著升高(p < 0.05),WBC、Gran、Mon、MPV及F显著升高(p < 0.05),MV显著降低(p < 0.05)。与DH组相比,XFHZP+DH组肺指数降低,肺组织HE染色观察到充血情况及肺组织炎性细胞浸润明显减轻,肺组织中IL-6及TNF-α含量显著降低(p < 0.05),WBC、Gran、Mon、MPV及F显著降低(p < 0.05),MV显著升高(p < 0.05)。蛋白质组学分析,表明CON组-DH组大鼠肺组织中有1348个差异表达蛋白,DH组-XFHZP+DH组大鼠肺组织中有448个差异蛋白,其中包括Aak1、Cacna2d1、Eif4e、Hsd11b1、Rock1、Tdp1等。差异表达蛋白的KEGG通路富集分析显示,cGMP-PKG信号通路和胰岛素信号通路可能是宣肺化浊丸治疗湿热型肺炎的关键信号通路。免疫组织化学结果显示,湿热型肺炎大鼠肺组织中ROCK1和MKNK1的表达均上调,XFHZP治疗后均下调。Western Blot实验进一步表明湿热型肺炎大鼠肺组织中ROCK1和MKNK1的表达均上调,增加了MLC2和eIF4E的磷酸化；XFHZP通过抑制ROCK1和MKNK1的表达,减少MLC2和eIF4E的磷酸化,从而舒张气道平滑肌并抑制炎性因子释放。结论:XFHZP对湿热型肺炎具有显著的疗效,其作用机制可能通过调控ROCK1和MKNK1的表达,抑制MLC2和eIF4E的磷酸化,进而舒张气道平滑肌并减轻炎症反应。本研究为宣肺化浊丸治疗湿热型肺炎提供了分子层面的科学依据,并为中医药治疗肺炎的机制研究提供了新思路。
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钙锌维生素口服液抗骨质疏松及转录组研究
夏祖猛, 阚绪甜, 王钦文, 黄炜超, 李观明, 戴明珠, 王丽娟
Abstract:
【摘要】目的 对YQJ钙锌维生素D维生素K口服液（简称“YQJ”）及其拆方进行体外吸收率和斑马鱼抗骨质疏松功效检测，基于转录组测序术探讨潜在作用机制。方法 利用Caco-2细胞模拟胃肠道吸收，比较YQJ及其拆方钙离子吸收率。使用地塞米松诱导骨质疏松模型，通过茜素红钙染骨密度及Tg（ola.sp7:nlsGFP）成骨细胞荧光双重验证药效。设置YQJ 250 μg·mL-1、MC和NC组，均3个生物学重复，对斑马鱼进行转录组测序，以|log2fold-change| ≥ 2、q-value ≤ 0.001严格筛选三组交集的差异基因，进行功能注释和富集分析，筛出YQJ抗骨质疏松基因的表达通路，并进行QPCR验证。结果 YQJ绝对吸收率为42.6%，相对四种拆方为133%~159%，相对单一柠檬酸钙为170%，产品YQJ协同促进钙吸收效果显著。YQJ能显著恢复斑马鱼头骨密度、提高成骨荧光强度，且同125 μg·mL-1浓度下YQJ抗骨质疏松功效较单一柠檬酸钙增加24%-25%。测序结果MC/NC、YQJ/MC差异基因为340、231个，三组交集58个重叠。对重叠基因进行功能富集，YQJ抗骨质疏松涉及4条通路和11个关键基因。QPCR 验证表明YQJ可明显恢复c3a.1、cp、coro1a、cldni、bmpr1aa mRNA 的表达水平。结论 YQJ钙吸收率及抗骨质疏松作用均优于拆方、单一柠檬酸钙；YQJ可增加头骨密度和成骨细胞信号强度，主要是通过调节补体和凝血级联反应、铁死亡、吞噬体、氧化应激反应信号通路和其他功能蛋白，具体涉及c3a.1、c3a.2、c3a.6、c9、c5、cfb、coro1a、cp、mpx、cldni和bmpr1aa关键基因调控，协同发挥抗骨质疏松作用。
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基于网络药理学、分子对接和动物实验探讨补中益气汤改善化疗肌少症的机制
Abstract:
摘要：目的：采用网络药理学、分子对接技术和体内实验，探讨补中益气汤（Buzhong Yiqi Decoction,BZYQD）改善化疗肌少症（chemotherapy-induced sarcopenia,CIS）的潜在活性成分及作用机制。方法：利用TCMSP筛选BZYQD活性成分及靶点；通过GeneCards和OMIM数据库筛选CIS疾病靶点。取药物与疾病交集靶点构建蛋白互作网络，识别核心靶点，进行GO功能注释及KEGG通路富集。利用AutodockTools1.5.7和PyMOL2.7.1进行分子对接及可视化处理。通过动物实验验证BZYQD改善CIS的效果。结果：药物与疾病交集的核心靶点，包括AKT1、TP53、TNF、IL-1β、IL-6等。分子对接核心靶点与主要活性成分大部分具有较好结合能力。动物实验，相较于空白组，模型组体质量、抓力和力竭游泳时间与肌丝横截面积显著降低，ELISA检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量显著升高，蛋白免疫印迹检测显示，骨骼肌p-NF-κB p65/NF-κB p65比值显著升高，p-Akt/Akt和p-PI3K/PI3K比值显著降低；BZYQD各剂量组大鼠上述指标均有所改善，其中高剂量组效果最为显著。结论：BZYQD可能通过调节PI3K/Akt/NF-кB信号通路改善CIS。
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建立稳定的肺动脉高压小鼠模型的新方法
Abstract:
目的 利用野百合碱(monocrotaline, MCT)建立稳定的肺动脉高压(pulmonary hypertension, PH)小鼠模型。方法 选择6到8周龄的雄性C57BL/6小鼠,通过每周腹腔注射一次MCT,连续注射3周。在最后一次注射后的第10天、20天、30天对小鼠进行检测,利用0.55×20 mm一次性输液针头经肋间肌穿刺小鼠右心室,通过medlab生物信号采集系统检测小鼠的右心室收缩压(Right ventricular systolic pressure, RVSP),分离心脏,称小鼠体重(body weight, BW),右心室(right ventricular, RV),左心室加室间隔 (left ventricular + septum, LV+S)的重量,计算右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index, RVHI=RV/ BW)以及富尔顿指数(RV/LV+S),取肺组织病理切片并作苏木精-伊红(hematoxylin and eeosin, HE) ,肺血管内皮细胞标志性蛋白CD31和 α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的免疫荧光(immunofluorescence, IF)染色,观察肺血管结构改变。结果 C57小鼠在三个检测时间点的RVSP、RVHI以及RV/LV+S,均显著高于对照组小鼠,HE染色也可观察到肺血管壁的明显增厚,IF染色观察到CD31的表达量降低,而α-SMA的表达量升高。结论 每周一次,连续三周腹腔注射固定剂量的MCT,可以构建周期30天的稳定的肺动脉高压小鼠模型。
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杜仲皮与杜仲叶对抑郁症模型大鼠血脑屏障损伤的比较研究
刘羽, 王鑫, 陈雨立, 赵洪庆, 易亚乔, 周伟良, 王汝琴, 刘林
Abstract:
目的 探讨比较杜仲皮及叶对抑郁症模型大鼠炎症和血脑屏障损伤的作用及特点。方法 采用慢性不可预见温和应激(CUMS)建立抑郁症大鼠模型,SD大鼠随机分为正常组、抑郁组、杜仲皮组、杜仲叶组,采用旷场、Morris水迷宫实验进行行为学检测分析；HE、Nissl染色观察大鼠海马(HP)病理形态；ELISA法检测大鼠血清、海马中IL-1β、IL-6、TNF-α含量；免疫荧光法检测ZO-1、Occludin的表达水平。结果 与对照组比较,抑郁组大鼠目标象限停留时间、穿越平台、爬格次数明显降低(P<0.05或P<0.01)；海马组织存在明显的炎细胞浸润、尼氏体减少甚至消失；IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P<0.01)；ZO-1、Occludin阳性表达降低,荧光强度减弱(P＜0.05)。与抑郁组比较,杜仲皮组、杜仲叶组大鼠、目标象限停留时间、穿越平台、爬格次数明显升高(P＜0.05或P＜0.01)；病理形态明显改善；杜仲皮、杜仲叶组大鼠血清、海马中IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低(P<0.01或P＜0.05)；海马组织ZO-1、Occludin阳性表达升高,荧光强度升高(P＜0.05)。结论 杜仲皮、杜仲叶均能明显改善抑郁症大鼠行为,调节血脑屏障通透性,减轻炎症反应损伤,从而保护神经功能。
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视网膜下纤维化动物模型的研究进展
Abstract:
视网膜下纤维化（subretinal fibrosis，SRFi）是年龄相关性黄斑变性、葡萄膜炎和增殖性玻璃体视网膜病变等致盲性眼病的终末期病理特征，其导致患者视力预后不良。目前关于抗视网膜下纤维化的治疗手段有限，凸显了其机制研究及治疗开发的迫切性。动物模型作为解析SRFi病理机制和治疗方案研发的核心工具，近年来取得了一定的进展。本文对比分析了小鼠、大鼠、兔、猪及非人灵长类等模型在模拟SRFi病理特征中的适用性，总结了现有的激光光凝、化学损伤、基因工程及复合干预等造模策略。然而，现有模型在病理重现性、时间可控性等方面仍存在局限，未来需进一步建立标准化、高重现性模型以推动抗视网膜下纤维化疗法的研发和突破SRFi治疗的瓶颈。
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猫棒束孢对高脂饮食诱导的肥胖小鼠糖脂代谢紊乱及肝损伤的调节作用
胡湘萍, 赵莉莉, 杨永明, 王靖, 阎磊, 张艺尹, 余国彦, 史晓伟, 罗雅馨, 杨喜花, 陈丽霞
Abstract:
【摘要】 目的 研究猫棒束孢（Isaria felina, IF）对高脂饮食（high-fat diet, HFD）诱导的肥胖小鼠代谢紊乱的干预作用及其机制。方法 30只SPF级雄性昆明小鼠按体质量随机分为5组：空白对照组、模型组、白芸豆组、50 mg/kg IF组和100 mg/kg IF组，每组6只。空白对照组小鼠喂养维持饲料（脂肪供能比10%），其余实验组小鼠喂养高脂饲料（脂肪供能比60%）。空白对照组和模型组每日灌胃给予生理盐水；白芸豆组灌胃给予白芸豆提取物（WKB）（50 mg/(kg·d)）；50 mg/kg IF组和100 mg/kg IF组分别灌胃给予不同剂量IF（50和100 mg/(kg·d)）。连续灌胃6 w后，进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）；检测血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素（Urea）和肌酐（CRE）水平；摘取肝脏和脂肪组织并称重，以计算肝脏指数和脂肪指数；采用苏木精-伊红（HE）染色观察附睾脂肪组织和肝脏组织病理学变化；采用油红O染色对肝脏脂质聚集进行评估。结果 与模型组比较，IF各剂量组小鼠体质量、空腹血糖（FBG）、OGTT曲线下面积（OGTT AUC），血清中TC、TG、LDL-C、异常升高的HDL-C、AST、ALT、ALP、Urea和CRE水平，肝脏和脂肪组织重量及其指数均显著降低（P < 0.05）。此外，IF减轻附睾脂肪组织内脂肪细胞的病理性增大，并缓解肝脂肪变性和脂质聚集。结论 IF具有改善HFD导致的肥胖小鼠葡萄糖耐受不良，降低血清中血脂水平，抑制体内脂肪积累，减轻肝脂肪变性和肝肾功能损伤的作用。
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不同剂量多柔比星诱导衰老小鼠模型的构建
颜宏, 龚吕东, 钟承志, 资志达, 李婷, 吴德松, 郭琰
Abstract:
【摘要】 目的 通过不同剂量不同频次腹腔注射多柔比星（DOX）建立快速衰老小鼠和心脏衰老小鼠模型，优化模型评价指标，为抗衰老药物评价提供疾病模型支撑。方法 （1）快速衰老小鼠模型：将小鼠分为模型-1组（5 mg/kg，次/ 7 d）、模型-2组（8 mg/kg，次/10 d）模型-3组（8 mg/kg，次/7 d）、模型-4组（10 mg/kg，次/10 d）和模型-5组（10 mg/kg，次/7 d），腹腔注射3次，连续观察60 d，记录小鼠的生存率。；（2）心脏衰老小鼠模型：将小鼠分为对照组、模型-1组（2 mg/kg）、模型-2组（5 mg/kg）、模型-3组（8 mg/kg）和模型-4组（10 mg/kg），次/10 d，共注射2次，连续造模30 d，结束后使用小动物高频超声成像技术（UBM）评价射血分数（EF）、缩短分数（FS）和最大血流速度；检测血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、白介素6（IL-6）和白介素1β（IL-1β）的水平；检测心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、琥珀酸脱氢酶（SDH）和过氧化氢酶（CAT）含量；检测心肌组织病理、纤维连接蛋白（FN）、β-半乳糖苷酶染色（β-gal）和p16蛋白等心脏衰老相关指标。结果 （1）快速衰老小鼠模型：实验期间各造模组小鼠的体重质量和存活率均呈显著下降趋势，且随着DOX造模剂量增加和造模间隔时间缩短，体质量重和存活率下降愈发明显。；（2）心脏衰老小鼠模型：与对照组比较，2、5、8和10 mg/kg DOX可以显著升高LDH含量（P < 0.01），降低GSH-Px活力（P<0.05或P<0.01）；5、8和10 mg/kg DOX可以显著降低小鼠体质量重（P<0.01），同时小鼠的EF，FS和最大血流速度均显著降低（P<0.05或P<0.01），血清中的IL-6含量显著增加（P<0.05或P<0.01），SOD含量显著降低（P<0.05或P<0.01），β-半乳糖苷酶和p16蛋白表达显著升高（P<0.05或P<0.01），心肌组织出现水样和空泡变性；而8和10 mg/kg DOX还可以显著升高CK-MB水平（P<0.01）和增加心脏纤维化程度（P <0.01）；此外，10 mg/kg DOX还可以增加IL-1β和MDA含量（P <0.01）。结论 腹腔注射10 mg/kg DOX，每10 d注射一次，共注射3次可以成功建立快速衰老小鼠模型；而腹腔注射5或8 mg/kg DOX，每10 d注射一次，共注射2次可成功建立心脏衰老小鼠模型，引起心功能、心肌酶、炎症、氧化应激、衰老标志物、心脏病理及纤维化的改变，符合心脏衰老的生理病理特点。
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基于16S rDNA测序的中国地鼠和金黄地鼠的微生物群比较
Abstract:
【摘要】目的 本研究旨在通过16S rDNA测序技术比较中国地鼠和金黄地鼠肺部与肠道微生物群落的组成和多样性差异，为理解它们在人类疾病研究中的应用提供新的视角。方法 选取6~8周龄的SPF级中国地鼠和金黄地鼠各12只（雌雄各半），在无菌条件下采集肺泡灌洗液、小肠内容物和大肠内容物样本。通过16S rDNA测序技术进行物种注释和多样性分析，包括α多样性和β多样性分析，并使用LEfSe分析识别潜在的生物标志物。结果 α多样性分析，金黄地鼠（尤其是雄性）的肺部和小肠微生物群落多样性显著高于中国地鼠（P < 0.05），中国地鼠的大肠微生物群落的多样性显著高于金黄地鼠（P < 0.05）。β多样性分析，两种地鼠在肺部、小肠和大肠的微生物群落组成上均存在显著差异（P < 0.01）。LEfSe分析，在肺部微生物群落中，金黄地鼠的差异物种是厚壁菌门（Firmicutes）。中国地鼠差异物种是拟杆菌门（Bacteroidota）（雌性）和变形菌门（Proteobacteria）（雄性）；在小肠和大肠微生物群中，中国地鼠的差异物种是厚壁菌门（Firmicutes）；金黄地鼠的差异物种是拟杆菌门（Bacteroidota）。结论 中国地鼠和金黄地鼠在肺部和肠道微生物群落的组成和多样性上存在显著差异，这些差异可能与它们在人类疾病研究中的不同应用领域相关。例如，中国地鼠的厚壁菌门优势可能与其作为2型糖尿病研究模型的特性相关，而金黄地鼠的拟杆菌门优势可能影响其对新冠病毒的易感性。本研究为理解这两种地鼠在人类疾病研究中的应用提供了新的视角，并为未来通过调节微生物群落改善它们的健康状况和实验性能提供了理论基础。
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基于多组学的压力负荷心力衰竭湿证小鼠模型的构建与评价
Abstract:
目的:构建压力负荷心力衰竭湿证小鼠模型及评价体系。方法：将C57BL/6小鼠随机分为Sham组、TAC组和TAC-D组。Sham组只开胸不缩窄主动脉弓,TAC组采用主动脉弓缩窄术构建心衰模型,两组小鼠均饲养于正常环境；TAC-D组除TAC术外,每日放置于人工恒温恒湿箱8h进行湿证造模,其余时间饲养于正常环境,持续8周。根据《中医湿证动物模型评价量表》评估小鼠宏观表征,结合现代医学手段检测小鼠心功能、心肌组织病理学、免疫稳态、血清NT-proBNP及血脂水平,同时进行粪便16S rDNA测序和血清非靶向代谢组学,构建心衰湿证小鼠模型新型评价指标。结果：TAC-D组出现明显倦怠、乏力、对外界刺激反应降低以及肛周污秽等表征；TAC组与TAC-D组均出现明显的心功能障碍、心肌损伤、免疫稳态失衡、血清NT-ProBNP水平升高和血脂水平降低,同时上述改变在TAC-D组更加明显。小鼠粪便16S rDNA测序和血清非靶向代谢组学结果显示,心衰湿证造模后小鼠体内微生物和代谢物出现明显变化,基于Lefse分析(LDA>2)发现,Enterorhabdus、Eubacterium、Corynebacterium、Christensenellaceae、Erysipelatoclostridium等5个菌属在TAC-D组显著富集；代谢组KEGG富集分析显示TAC-D组差异代谢物主要富集在甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢、胆汁分泌等代谢通路；皮尔森相关性分析结果显示,菌属Eubacterium、Erysipelatoclostridium与主要富集在花生四烯酸代谢上的代谢物16R-HETE、6-keto PGE1、PE-NMe2(16:1(9Z)/20:3(8Z,11Z,14Z))、Prostaglandin F2a、TXB2、Oxoglutaric acid、12(R)-HETE存在显著的负相关。结论：主动脉弓缩窄术联合高温高湿环境饲养成功构建压力负荷心衰湿证小鼠模型。《中医湿证动物模型评价量表》评估、心功能、血清NT-proBNP、心肌组织病理学、免疫稳态等可作为本模型常规评价指标；在此基础上,引入肠道菌属Eubacterium、Erysipelatoclostridium和花生四烯酸代谢紊乱,构建压力负荷心衰湿证小鼠模型创新评价体系。
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基于代谢组学探讨两种慢性应激相关干眼大鼠的表型和中医证候差异
陈泽海, 芮书文, 丁园晨, 裴昱, 施炜, 杨颖, 王畅畅
Abstract:
目的 构建慢性不可预测轻度约束（Chronic unpredictable mild restraint，CUMR）与慢性不可预测节律干预（Chronic unpredictable rhythm disturbance，CURD）两种慢性应激相关干眼模型，比较两种模型的表型与代谢组特征以及与中医证候的关联。方法SPF健康雄性大鼠30只，分为:(1)空白组(2)CUMR组(3)CURD组，CUMR组每日施加单笼饲养+行为约束，CURD组每日施加随机节律干预。造模6周后，评估一般情况、行为学、干眼指标；HE染色观察结膜、角膜、泪腺病理变化；Elisa法检测血清5-HT、Cortisol和角膜组织TNF-α、IL-1β指标水平；UPLC-QTOF-MS技术进行血清代谢组学分析。结果（1）CUMR和CUMD组外观和行为学有显著差异。（2）模型组角膜荧光染色（CFS）显著增加，泪流量、泪膜破裂时间（BUT）显著减少，且CUMR组改变更为明显。（3）模型组角膜未见明显炎症细胞浸润、结膜杯状细胞数量显著降低、泪腺空泡化面积显著增加，且CUMR组改变更为明显。（4）模型组组间ELISA检测，CUMR组血清5-HT显著降低，Cortisol显著升高，角膜组织TNF-α、IL-1β无统计学差异。（5）血清代谢组学分析提示，CUMR和CUMD组样本中鉴定出235个差异代谢物，呈现显著的分离趋势。结论 不同的应激造模会影响大鼠代谢，从而造成不同的中医证候和干眼表型。CUMR组表现为肝郁脾虚型干眼，其病理进程可能与色氨酸代谢有关；CURD组表现为肝经郁热型干眼，其生物学基础可能涉及三羟酸循环。
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非酒精性脂肪性肝炎相关肝细胞癌小鼠模型的肾损伤及其潜在机制
李维佳, 凌晨, 霍桂桃, 杨艳伟, 刘甦苏, 赵皓阳, 王依宁, 王思浩, 王夏璐, 范昌发
Abstract:
目的 非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis, NASH)的恶行进展是引起肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)的主要因素之一,也是慢性肾病的独立风险因素。NASH和HCC进展的协同作用可能会加剧肾损伤。同时,NASH引起的肾病进展程度与肝纤维化/肝硬化程度呈正相关关系。目前,NASH-HCC与肾损伤之间的关系及肾损伤致病机制尚未明确。本研究拟基于新型NASH-HCC小鼠模型(HRAS-HCC),研究伴随非酒精性脂肪肝炎相关的肝癌发生的肾损伤、功能失调、组织学及分子学特征,以探索NASH-HCC诱发肾损伤的潜在机制,旨在为临床研究疾病发生机制及探索诊疗方法提供重要模型工具。方法 实验采用本室自主构建的HRAS-HCC小鼠,以同窝隐性小鼠和野生型C57BL/6小鼠为对照组。5周龄时通过注射他莫西芬诱导小鼠肝组织中HRAS基因表达,进而引发NASH-HCC的发生与进展。在NASH-HCC进展过程中(1-4周),定期监测小鼠的体重、精神状态等一般特征,并于选择时间点采集血液样本并检测相关指标；通过HE染色和马松染色分析小鼠肾组织的病变特征。结果 与对照组相比,HRAS-HCC小鼠在一个月内从NASH阶段,经肝纤维化进展到HCC,表现出黄疸、呼吸急促、弓背、便血、肝肿大和脾肿大等临床症状。4周时,HRAS-HCC小鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)降低(P<0.05),血清尿酸氮(UREA)、尿酸(UA)和肌酐(CREA)升高(P<0.05)。HE病理结果显示,HRAS-HCC小鼠肾组织在不同时期存在程度不一的肾小管嗜碱性变、透明性肾小球、肾小管上皮细胞透明滴样变等多种病变。同时,马松染色观察到HRAS-HCC小鼠肾组织还存在纤维化病变,且肾纤维化(2-3周)与肝纤维化/肝硬化(2-3周)的发生时间及严重程度存在相关性。进一步检测肾损伤相关分子表达发现,3周时细胞角蛋白18(Krt18)、Smad3、纤维连接蛋白(Fn)、转化生长因子-β(Tgf-β)在mRNA水平表达升高(P<0.05)。同时,蛋白质互作网络(PPI)分析结果显示人源HRAS和FN、SMAD3间存在蛋白互作关系。结论 本研究结果表明,NASH-HCC引起的肾损伤与肝纤维化程度呈正相关关系,初步展示了NASH-HCC引起的肾损伤的病理特征和分子特征,提示HRAS-SMAD3-FN轴可能存在重要的作用。本研究呈现了特有的NASH-HCC伴随肾损伤动物模型,该模型较真实的重现了临床上肾损伤的疾病特征,为制定该疾病的临床治疗策略奠定了基础。【关键词】HRAS-HCC小鼠模型；NASH-HCC；肾损伤；SMAD3；TGF-β
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慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化大鼠模型的研究进展
Abstract:
慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺间质纤维化(PIF)是两种严重影响肺功能的慢性肺部疾病。COPD合并PIF(COPD-PIF)可导致肺组织损伤进一步加重,加速病情进展,并显著影响患者预后。然而,COPD-PIF的具体发病机制尚未完全阐明,且目前尚无有效的治疗手段。近年来,动物模型在COPD-PIF的病理机制研究及新药开发中发挥了重要作用。现有COPD模型的构建方法主要包括单因素诱导(如香烟烟雾暴露、脂多糖注射)和多因素联合诱导,而PIF模型则主要依赖博来霉素诱导,不同给药方式(如气管内滴注、雾化吸入、尾静脉注射)对模型的稳定性和重复性具有重要影响。尽管已有一定类型的COPD-PIF动物模型被用于研究,但仍存在模型建立方法不完善、稳定性不足及难以全面模拟人类疾病特征的问题。此外,COPD与PIF的发生顺序可能影响模型的病理表现,这在现有研究中尚未达成一致。为更好地研究COPD-PIF的病理机制及筛选有效治疗策略,未来应进一步优化造模方法,提高模型的稳定性和可重复性,探索更符合COPD-PIF临床特征的动物模型,从而推动该领域的基础研究和新药开发。
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基于代谢组学探究肺纤维化小鼠肺组织中潜在生物标志物及机制
谢云云, 杨 帆, 孙淑仃, 彭云鹏, 孙鑫, 卢瑞龙, 田燕歌
Abstract:
摘要：目的：基于代谢组学技术，明确肺纤维化小鼠肺组织中特异性内源性生物标志物及其机制。方法：16只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、博来霉素（BLM）组。制备肺纤维化小鼠模型，检测各组小鼠肺功能、肺病理、羟脯氨酸（HYP）等指标；进行关键差异代谢物与病理指标相关性分析及价值评估以获得潜在生物标志物，并功能分析及通路富集；结合“生物标志物-疾病相关靶标-通路”多层互联网络阐明生物标志物在肺纤维化的核心机制，采用qPCR技术检测核心靶点mRNA水平。结果：与空白组小鼠相比，BLM组小鼠体重及肺功能明显降低（P<0.01），肺组织结构紊乱、肺泡壁被破坏，肺系数及肺组织胶原水平（HYP）增加（P<0.01）；代谢组学结果显示肺纤维化小鼠代谢谱发生改变，差异代谢物主要富集到花生四烯酸代谢途径；对显著性排名前十的关键差异代谢物进行病理指标相关性分析及价值评估，得到8个生物标志物与肺纤维化特征显著相关（P<0.05）；多层互联网络阐明生物标志物在的核心机制主要涉及炎症反应和细胞增殖；qPCR显示，6个核心靶点在肺纤维化小鼠肺组织中显著升高（P<0.05, P<0.01）。结论：肺纤维化小鼠代谢谱发生改变，Capryloylglycine、S-(PGA1)-glutathione、Corticosterone、Thymidine、3-Oxotetradecanoic acid、3-Hydroxybutyric acid、Uridine、3-Hydroxysebacic acid等生物标志物可能通过IL6、EGFR、CXCL8、MMP9、PTGS2、MAPK3等调控炎症反应和细胞增殖等机制在肺纤维化的进展中发挥重要作用。
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人流刮宫与单纯机械损伤构建子宫内膜损伤大鼠模型的评价与比较
Abstract:
目的 对比单纯机械损伤法和人流刮宫法，探索更符合子宫内膜损伤临床病因和疾病特征的动物模型，并探讨妊娠期宫腔操作更易造成损伤的原因。方法 将42只雌性大鼠随机分为3组，即假手术组6只、单纯机械损伤组（S组）18只、人流刮宫组（A组）18只，除假手术组外其余两组分为3个亚组，分别于术后第一、第二、第三动情期取材。HE染色观察子宫内膜组织病理学改变；Masson染色观察子宫内膜纤维化程度；免疫组化检测大鼠子宫组织CD31、LIF表达情况；免疫荧光检测子宫内膜CD68表达情况。ELISA检测大鼠血清炎性因子及激素水平，Western blotting检测大鼠子宫内膜组织CD68、CD86、TGF-β蛋白表达。结果 （1）术后第三个动情期时，单纯机械损伤组大鼠子宫病理形态变化较小，子宫内膜厚度、上皮细胞及巨噬细胞变化、炎症水平较假手术组无显著性差异，仅纤维化水平和血管再生能力符合子宫内膜损伤临床特征。而人流刮宫组大鼠子宫内膜变薄，腺体数目减少，腔上皮细胞显著减少，巨噬细胞表达增加并伴有明显的炎症反应，子宫纤维化水平大幅增加，血管再生能力下降，四个维度均符合临床特征。（2）两种方法造模后大鼠子宫内膜纤维化水平可随损伤时间增加而增长，血清炎性因子水平随损伤时间增加而减少，但人流刮宫大鼠炎性因子水平下降更缓慢，炎症反应持续时间更长。结论 人流刮宫造模更符合现阶段对人类子宫内膜损伤临床病因和疾病特征的认识，且妊娠期宫腔操作更易损伤的原因可能与巨噬细胞持续高表达导致子宫内膜处于慢性炎症状态有关。
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白内障分级系统在动物模型中的应用研究
Abstract:
白内障动物模型是解析病理机制与筛选药物的重要工具，而晶状体混浊分级的精准性依赖于解剖特征与分级系统的匹配。目前临床分级系统是基于人眼设计的，但动物眼存在明显的解剖差异：小鼠晶状体直径为 1.2±0.1mm（人眼 8.5-9.5mm）、且核区占比也小于人眼；兔眼角膜曲率为 7.2±0.1mm（人眼 8.0±0.2mm）；斑马鱼晶状体缺乏典型的核-皮质分化。这些差异导致临床分级出现“维度冗余、检出偏差和分级失真”。本文综述了白内障动物模型的诱导方法，系统分析了上述解剖差异对分级系统适用性的影响，并提出了定制化策略：对小鼠采用改良的 LOCSⅢ或简化分级、对兔子采用专门针对核混浊的分级，对斑马鱼采用灰度值定量，旨在为白内障动物研究提供精准分级参考。
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含蜂蜜中药制剂的血糖生成指数测定的小鼠实验优化及其应用研究
Abstract:
目的 为了建立适用于含蜂蜜中药制剂血糖生成指数（Glycemic I ndex，GI）测定的小鼠实验方法。方法 参考WS/T 652-2019人体测定标准，对小鼠测试实验方法进行优化，并以不同比例果葡糖浆为样本，验证初选条件的可行性；优化后的方法应用于蜂蜜以及含蜂蜜中药制剂古汉养生精GI的测定中。结果 研究结果显示：在优化条件下，果葡糖浆GI值与理论值最接近，且与果糖比例呈高度线性相关（R2=0.9959）；果葡比不同的四种蜂蜜GI值为60.3，54.3，56.5，59.3，均低于同等果葡比的果葡糖浆；含蜂蜜中药制剂古汉养生精GI值范围为45.2-59.6，并随蜂蜜GI的降低而降低。结论 优化后的小鼠实验法可望成为含蜂蜜中药制剂的GI测定和蜂蜜原料筛选的有效手段。
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干预微生物群调控免疫微环境改善胰腺癌免疫治疗效果的研究进展
Abstract:
胰腺癌(pancreatic carcinoma，PC)恶性程度高、起病隐匿且预后差，现有治疗措施常因肿瘤微环境（Tumor Microenvironment, TME）所具有的免疫抑制特性，易引起复发和耐药。TME的特征常影响肿瘤免疫治疗的效果，尤其在抑制性免疫微环境下常出现肿瘤的免疫逃逸和免疫耐受。微生物群作为宿主和环境之间的桥梁，已被证实对肿瘤的免疫反应具有重要调节意义，通过靶向特定的微生物群调节免疫细胞功能，可以增强免疫检查点抑制剂的治疗效果。本文聚焦胰腺癌的免疫微环境，通过与胃肠道肿瘤相关微生物群的差异性分析，综述了微生物群在影响PC免疫微环境和增强免疫治疗效果方面的研究进展；分析了通过干预微生物及其代谢途径，改善PC抑制性免疫微环境的效能；阐述了微生物群在PC免疫反应中的调控机制，期望为PC患者提供新的个性化免疫治疗策略。
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不同光照模式建立昼夜节律紊乱抑郁症大鼠模型的实验研究
Abstract:
【摘要】目的：探究持续光照（constant light, LL）、频繁光周期调整（circadian misalignment，CM）和倒置光周期（inverted photoperiod,IP）三种光照模式建立昼夜节律紊乱抑郁症大鼠模型的效果差异，明确其诱导抑郁样行为及分子改变的异质性。方法：将80只雄性SD大鼠随机分为对照组（circadian alignment，CA，标准LD 12:12光周期）、LL组（24小时持续光照）、CM组（6天循环周期内频繁调整光照）和IP组（完全倒置光周期），干预28天。通过智能笼系统监测运动节律；行为学检测糖水偏好、强迫游泳及旷场实验评估抑郁表型；ELISA检测血浆褪黑素5个时间点昼夜分泌；qPCR分析下丘脑视交叉上核5个时间点生物钟基因（Bmal1、Clock、Per1、Per2）表达；Western Blot检测海马BDNF、IL-6、TNF-α蛋白水平，免疫组化检测海马BDNF平均光密度。结果：与CA组相比，LL组第28天昼夜节律完全消失，昼夜比降至0.76，褪黑素节律性消失（p<0.01），Bmal1和Per1表达持续低平（p<0.01），BDNF降低，IL-6和TNF-α显著升高（p<0.01）。IP组完成12小时相位转移，昼夜节律翻转，抑郁样行为显著增加（p<0.01）。CM组节律紊乱最严重，抑郁样行为最显著，BDNF表达最低，炎症因子水平最高（p<0.01）。结论：三种光照模式均可诱导昼夜节律紊乱抑郁模型，但CM模式通过引发慢性节律失同步（节律破碎、褪黑素衰减及生物钟基因紊乱），导致最严重的抑郁样行为，其机制与BDNF抑制及神经炎症亢进密切相关。维持节律稳定性（如IP组的相位重置）可减轻抑郁损伤，提示避免频繁光照周期变动对预防抑郁症至关重要。
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溃疡性结肠炎及大肠湿热病证结合动物模型的研究现状及思考
Abstract:
溃疡性结肠炎(UC)作为一种慢性炎症性疾病,病因复杂且尚不明确。近年来,中医药在治疗UC方面显示出显著优势,病证结合动物模型逐渐成为中西医融合研究的重要载体。系统梳理了溃疡性结肠炎动物模型的主要构建方法,并深入分析了其与中医湿热证相结合的造模策略与实施路径；讨论了将现代组学技术(如代谢组、宏基因组等)引入中医病证模型的多维评价体系,以期实现中医证候的客观化与量化。同时,探讨了将基因修饰模型(如炎症通路基因敲除小鼠)与中医“湿热证”造模方法相结合的复合建模思路,以期真实模拟UC的发病机制及其与个体体质的相关性。有望完善构建方法与评价体系,进一步提升模型的科学性与转化价值,为中医药干预UC提供参考与理论支撑。
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PMS/PMDD神经可塑性发病机制及中药调控研究进展
Abstract:
【摘要】 经前期综合征（Premenstrual Syndorme,PMS）属中医“月经前后诸症”的范畴，经前烦躁障碍症（premenstrual dysphoric disorder,PMDD）是其严重亚型，是育龄期妇女常见的一种内分泌紊乱的情感障碍性疾病，严重影响了广大育龄妇女生理、心理以及社会功能，引起国内外专家的关注。近年来的研究表明：神经可塑性的改变是调节情绪的基础，神经元之间的信息传递依赖于神经环路结构的变化即突触可塑性，并且突触可塑性也直接或间接地参与到PMS/PMDD发生发展过程中来，但其具体调控机制和关键作用靶点机制不清。文章重点梳理PMS/PMD发作时存在突触可塑性异常现象所涉及的相关内容，并归纳中药（包括复方、中成药、单体成分）通过调节突触可塑性治疗PMS/PMDD的实验研究成果，阐明中药干预 PMS/PMDD的可能途径在于，通过调节HPA轴活动水平、调控BDNF基因转录及表达、增加神经可塑性相关蛋白质的合成等作用方式达到抑制PMS/PMDD发生的最终目的。
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小型猪脑卒中模型构建的可行性研究
郭鑫旺, 王佳音, 高如玉, 代淑玲, 陈晓晶, 吴保方, 程文杰, 魏太云, 赵耀博, 李开通, 高宏志, 魏红江, 赵红业
Abstract:
目的 本研究旨在构建具有高度临床相关性的缺血性脑卒中和出血性脑卒中小型猪模型,通过监测两种脑卒中术后疾病发生发展的病理生理过程,评估小型猪作为脑卒中体内模型构建的可行性,为脑卒中机制研究和治疗策略开发提供更精确的实验工具。方法 通过注入自体血(两次注血法)和开颅血管电凝法分别构建HS模型和IS模型,术后对模型猪进行行为学评估、生理生化指标检测及脑组织病理学分析和神经细胞标志物免疫组化验证,全面评估模型与临床脑卒中发生发展过程的相似性。结果 IS模型猪表现出严重的偏瘫、运动障碍及意识反应减退,脑组织缺血坏死明显,炎症反应剧烈,神经元凋亡显著,肝肾功能轻度受损；HS模型猪出现轻度行为障碍,血肿形成稳定,伴有脑水肿和机械性压迫,炎症反应活跃,神经元损伤及胶质细胞活化明显。两种模型均表现出良好的稳定性和重复性。结论 本研究成功构建了具有高度临床相关性的IS和HS小型猪模型,验证了小型猪构建脑卒中模型的可行性与准确性,为针对性治疗策略的开发提供了实验基础具备较高的临床相关性和实验价值,有助于促进脑卒中精准治疗的发展。
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大鼠肺炎支原体的分离鉴定及致病性研究
Abstract:
目的 肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)是引起大鼠呼吸道疾病的重要病原之一,本研究从某发生呼吸道病的大鼠养殖场分离鉴定该病原并进行大鼠致病性试验,以期获得目前流行病原体。方法 对疑似MP感染大鼠肺组织PCR检测,扩增得到约为280bp的单一条带。病料接种支原体肉汤培养基,并在支原体琼脂培养基上纯化。通过菌落特征、生化特性、16S rRNA扩增和同源性分析对该菌进行鉴定。分离菌株大鼠致病性试验：用浓度为1×107 CCU/ml菌液对5周龄SD大鼠滴鼻,观察其临床症状和病理变化。结果 通过PCR方法初步确定疑似病例为大鼠肺炎支原体感染,接种肺支原体肉汤培养基生长情况符合该菌培养特点,纯化后菌落呈圆形,经Giemsa染色后呈淡紫色；生化结果为分解葡萄糖产酸、不水解精氨酸和尿素；16S rRNA扩增和测序结果与鼠源MP菌株(AL445565.1)同源性相似度高达99.05％,表明分离获得大鼠肺炎支原体。该病原攻毒SD大鼠后出现呼吸道症状,肺部有出血、肉变,组织有大量炎性细胞浸润且MP PCR鉴定结果呈阳性。结论 本实验成功分离了一株大鼠肺炎支原体,该株MP能致大鼠发生典型肺炎
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天麻芎苓止眩片改善自发性高血压模型鼠肾脏损伤的机制研究
Abstract:
目的: 探究天麻芎苓止眩片对自发性高血压模型鼠肾脏的作用及机制。方法: 购买SHR大鼠作为自发性高血压模型鼠,WKY大鼠作为正常血压对照鼠,大鼠适应性饲养后分为4组,1)Control组(WKY大鼠)；2)Model组(SHR大鼠)；3)Model+TXZT组(SHR大鼠+天麻芎苓止眩片)；4)Model+Valsartan组(SHR大鼠+缬沙坦),3、4组分别以天麻芎苓止眩片、Valsarta灌胃干预,干预前后分别检测各组大鼠血压,分别使用ELISA和生化试剂盒检测TNF-ɑ、GSH,生化仪检测肾功能四项(肌酐、尿素氮、尿素和尿微量白蛋白),HE染色、TUNEL染色检测肾脏组织损伤程度和细胞凋亡情况,免疫荧光检测肾脏组织中NF-κB P65、p-P65、SIRT1和PGC-1ɑ表达情况。结果: 自发性高血压大鼠血清中TNF-ɑ含量升高,GSH含量降低,尿液中肌酐、尿素氮、尿素和尿微量白蛋白含量上升,使用天麻芎苓止眩片和Valsartan灌胃后,大鼠收缩压显著下降,舒张压有下降趋势但不明显,表明天麻芎苓止眩片和Valsartan具有降血压作用；大鼠血清中TNF-ɑ含量下降,GSH含量升高,大鼠尿液中肌酐、尿素氮、尿素和尿微量白蛋白含量下降,表明天麻芎苓止眩片和Valsartan可抑制炎症因子释放,抑制氧化应激,增强肾功能。自发性高血压大鼠肾脏组织中NF-κB P65、p-P65表达上升,SIRT1、PGC-1α表达下降,使用天麻芎苓止眩片和Valsartan干预后,NF-κB P65、p-P65表达下降,SIRT1、PGC-1α表达上升,表明天麻芎苓止眩片和Valsartan可提高SIRT1、PGC-1α表达,抑制NF-κB通路激活,从而抑制炎症反应。结论: 天麻芎苓止眩片可对自发性高血压大鼠肾脏起保护作用,机制为升高自发性高血压模型鼠肾脏中SIRT1、PGC-1α表达、降低NF-κB P65、p-P65表达,抑制炎症反应相关。
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气虚血瘀证慢性荨麻疹复发动物模型建立及评价
Abstract:
目的：气虚血瘀证是慢性荨麻疹（chronic urticaria，CU）临床常见的证型，但关于规范的、科学准确的气虚血瘀证慢性荨麻疹复发动物模型的构建方法研究相对缺乏。本研究旨在运用药物干预及休息后再激发的方法构建气虚血瘀证慢性荨麻疹复发动物模型，并对模型进行评价。方法：将30只BALB/c小鼠随机分为 2 组，空白组12只，模型组18只。正常组采用普通饮食，于正常环境下饲养；模型组采用被动皮肤致敏、利血平股四头肌注射、休息后小剂量激发的方法构建气虚血瘀证慢性荨麻疹复发动物模型。通过小鼠的一般情况、体质量、瘙痒程度、气虚血瘀评分、舌象、旷场实验、机械疼痛、机械痛阈值、血清水平及病理学检测，对该模型进行评价。结果：造模后，模型组小鼠瘙抓显著（P<0.01），第6及第7次免疫后HE、甲苯胺蓝检测呈现典型慢性荨麻疹病理表现。且模型组小鼠精神萎靡不振，对外界刺激反应迟钝，不喜动、嗜睡，体虚无力明显，体型较小而肉脱，毛发枯槁，耳廓、肛周、爪甲暗红，较空白组体质量降低（P<0.01），旷场实验平均速度和总路程下降（P<0.01），实验室指标肾上腺皮质激素、烟碱型胆碱受体α1、二磷酸腺苷显著上升（P＜0.01），三磷酸腺苷降低（P<0.05），机械痛阈值显著降低（P<0.01），舌象R值、G值与B值均显著降低（P<0.01），呈“紫舌”“暗红舌”。结论：被动皮肤致敏、利血平股四头肌注射、休息后小剂量激发的方法能够构建气虚血瘀证慢性荨麻疹复发动物模型，可以将小鼠的瘙痒程度、“气虚血瘀”评估量表评分、舌象、旷场实验、机械疼痛、机械痛阈值、血清水平及病理学检测的变化作为模型评价的关键指标。
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大鼠盲肠结扎和穿孔模型影响因素的研究进展
Abstract:
脓毒症以其高发病率、高致残率和高死亡率严重危害人类健康，动物模型为脓毒症的分子病理机制探索、早期诊断识别、精准治疗策略制定提供实验基础。盲肠结扎和穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）模型仍是目前脓毒症研究中应用最广泛的动物模型，其可重复性与可靠性有赖于对多维度因素的严格控制，包括手术操作、围术期饲养、大鼠品系、年龄与性别、季节与昼夜节律以及药物因素。本文基于2023年12月1日至2024年12月1日83 篇大鼠CLP模型研究，从控制模型严重程度的关键因素，系统性异质化因素，以及药物因素三方面探讨CLP模型的控制要素，旨在明确模型构建的控制要素，提高造模成功率，增加研究可重复性及外部效度，以提升模型数据的临床转化价值。
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糖尿病足溃疡实验动物模型的研究进展
Abstract:
糖尿病足溃疡(Diabetic Foot Ulcer, DFU)是糖尿病最严重的并发症之一,给患者和社会带来沉重负担。构建能有效模拟人类DFU病理生理过程的动物模型,是探究其复杂机制研究并研发有效干预策略的基础。本文从比较医学角度系统梳理了DFU实验动物模型的研究进展,重点对比分析了不同模型的优势与局限性。DFU动物模型主要分为糖尿病模型和溃疡创面模型两大类：糖尿病模型包括1型糖尿病模型(链脲佐菌素诱导)、2型糖尿病模型(自发突变型如db/db小鼠、ob/ob小鼠、ZDF大鼠,以及诱导型如高脂饮食联合STZ)；溃疡创面模型包括缺血性、神经性、感染性和模拟临床症状型模型。本文重点关注了创面愈合的种属差异及其对研究结果向临床转化的影响：啮齿类动物主要通过皮下筋膜层收缩愈合,而人类主要依赖上皮再生和肉芽组织形成。性别、年龄等因素对模型构建和表型表现具有显著影响。展望未来,人源化模型、3D生物打印技术、多基因动物模型等新兴技术将为DFU基础与转化研究提供更精准的实验平台。
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中西医结合导向的肌少症动物模型构建及评价方法探究
闫怡冰, 谢治深, 赵培源, 刘喜红, 高改, 张效威, 张培旭, 张振强
Abstract:
肌少症（Sarcopenia，SP）作为衰老相关骨骼肌退行性病变的典型代表，动物模型的构建在基础和临床研究具有十分重要的意义。目前，SP动物模型存在单一模型无法完全展现多病因的挑战，开发更贴近临床异质性多因素复合模型是解决当下困局的关键。中医基于“痿症”在治疗SP方面具有独特的优势且现代医学目前缺乏特异性治疗方案，基于中西医整合思维的评价标准化研究体系有助于推动SP的研究进展。本文总结了SP的临床病理机制与现有中医治疗肌少症的证型分类得出SP中西医临床诊断标准，并由此创新性提出涵盖表型层、功能层、证候特征层和分子标志物层的多层次肌少症动物模型中西医结合评价体系。通过临床吻合度分析发现现有SP动物模型中衰老模型吻合度最高为70%，诱导模型、手术模型等虽时效性强但临床吻合度较低。基于吻合度分析提出“复合造模法”构建SP动物模型，可同步模拟自然衰老进程与“脾虚”“肾虚”造成肌萎的证候特征。该流程为解析SP“病-证-靶”关联及靶向药物筛选提供了方法论支撑，将推动中医药抗SP研究的国际化进程。
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用于异种移植供体猪的基因编辑策略研究进展
Abstract:
为了解决临床同种器官移植中供体器官短缺问题,研究者们开始探索异种器官移植这一方法的可行性。2002年,全球首例GTKO猪的问世及其表现出的较好的免疫排斥结果效果,证明了基因编辑对异种移植的重要性。目前,随着体细胞克隆技术和基因编辑技术的不断完善,研究者逐步确立了以基因编辑猪为异种移植供体的研究方向。本文综述了近年来全球具有代表性的“猪-人”异种器官移植案例,阐述了每一个案例的实验结果与基因编辑的类型；针对不同类型的免疫排斥反应,分析了不同基因编辑策略对异种移植的影响和机理机制；进一步总结了编辑基因的选择与组合策略,提出用于异种移植的“工具猪”概念,并对相关研究中存在的问题进行了讨论,期望为优化异种移植供体猪的基因编辑策略提供新的思路。
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菲牛蛭提取物JC-17抑制角叉菜胶诱导的小鼠尾部血栓形成
李晓, 李聪, 杨金玲, 黄璋琼, 楼牧梦, 李传印, 牛婷婷, 王启艳, 皮娜, 范胜涛
Abstract:
目的 探讨菲牛蛭（Poecilobdella manillensis）对角叉菜胶（Kappa-carrageenan，KCG）诱导小鼠尾部血栓形成的抑制作用。方法 连续7d以菲牛蛭提取物（JC-17）2.5、25、100 mg/kg和肝素钠50 mg/kg腹腔注射处理昆明小鼠，于末次给药1h后采用0.5 %角叉菜胶诱发小鼠尾部形成血栓。结果 48 h Model组小鼠黑尾率为94.91 ± 3.927，表明造模成功，L、M、H组较Model组的小鼠黑尾率呈梯度下降趋势；提取物显著延长凝血酶原时间（PT）、降低纤维蛋白原（FIB）含量；Model组脾脏TNF-α、IL-1β、IL-6含量升高，其中TNF-α最高，为433.8±12.1 pg/mL，而给药组均显著抑制炎症因子含量。结论 菲牛蛭提取物能有效抑制小鼠尾部血栓形成，同时具有抗炎作用，提示该提取物在炎症相关性血栓疾病的防治中具有潜在应用价值。
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柴胡皂苷D通过抑制LncRNA-gm33782介导的糖酵解改善肾纤维化
Abstract:
目的 探讨柴胡皂苷D(SSD)是否通过调控长链非编码RNAgm33782(LncRNA-gm33782)影响糖酵解途径,从而减轻慢性肾脏病(CKD)模型中的肾损伤和纤维化。方法 建立单侧输尿管梗阻(UUO)诱导C57BL/6小鼠CKD模型。30只小鼠随机分为假手术组、UUO模型组、SSD低剂量组(30mg/kg)、SSD高剂量组(60mg/kg)、厄贝沙坦阳性对照组(20mg/kg),灌胃给药7天后处死小鼠收集肾脏组织,采用HE、Masson和Sirius red染色评估肾脏病理损伤；利用免疫组化和Western blot检测纤维化标志物(Fn、α-SMA、Col-I)的表达。通过RT-qPCR分析LncRNA-gm33782表达；使用试剂盒检测肾组织乳酸浓度,并通过Western blot检测糖酵解关键酶己糖激酶2(HK2)的蛋白表达,评估LncRNA-gm33782与肾纤维化及糖酵解的关联。体外研究采用转化生长因子-β(TGF-β)诱导小鼠肾小管上皮细胞(TCMK-1)构建纤维化模型,通过敲低与过表达LncRNA-gm33782,观察其对纤维化指标(FN,Col-I)、糖酵解关键酶(HK2,PKM2)表达及线粒体功能(细胞耗氧率,OCR)的影响；进一步在LncRNA-gm33782过表达条件下给予SSD干预,评估其保护效应。结果 SSD治疗显著减轻UUO小鼠的肾组织损伤、纤维化程度及乳酸堆积。LncRNA-gm33782在体内及体外纤维化模型中均显著上调(P < 0.05),而SSD干预有效降低其表达(P<0.05)。体外实验显示,敲低LncRNA-gm33782可减轻TGF-β诱导的细胞纤维化,并抑制糖酵解活化；反之,过表达LncRNA-gm33782则加剧线粒体OCR抑制、纤维化程度和糖酵解激活,并削弱SSD保护作用(P<0.05)。结论 SSD通过靶向抑制LncRNA-gm33782的表达,下调糖酵解活化,恢复线粒体功能,从而阻断肾纤维化进程,LncRNA-gm33782是SSD发挥肾保护作用的关键分子靶点。
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肝癌痛小鼠模型的建立与评价
Abstract:
目的 通过肝左叶种植hepa1-6肝癌肿瘤组织，建立肝癌痛小鼠模型，并通过观测行为学、影像学、组织学及分子生物学相关指标，评估模型的有效性。方法 将100 ~ 150 L 每毫升4 × 10*6个hepa1-6细胞悬液缓慢接种于小鼠前肢腋区皮下，待皮下肿瘤凸出体表，取皮下肿瘤切成大小约1 mm × 1 mm × 1 mm的肿瘤组织块。将SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为假种植（sham）组和模型（model）组，每组30只。模型组小鼠于肝左叶种植hepa1-6肿瘤组织块，假种植组开腹后不种植。观察小鼠一般情况；利用弓背疼痛评分进行小鼠肝癌痛行为学评估；超声检测小鼠肝大体形态；苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin, HE）染色观察肝组织结构、细胞构成及炎症细胞浸润情况；免疫组化（Immunocytochemistry, IHC）检测脊髓组织中小胶质细胞活化情况；实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR, qPCR）检测脊髓组织中白细胞介素1β（Interleukin-1β, IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6, IL-6）和肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α, TNF-α）的mRNA表达；Western Blot检测脊髓组织中IL-1β的蛋白表达。结果 与假种植组相比，模型组小鼠一般情况明显异常，体质量降低（P ＜ 0.05）；弓背疼痛评分显著升高（P ＜ 0.05）；超声示模型组小鼠肝肿瘤组织凸出；HE染色示模型组小鼠肝组织结构异常，可见大量肿瘤细胞及炎性细胞浸润；免疫组化结果显示模型组小鼠脊髓组织中小胶质细胞的标志物（Ionized calcium-binding adapter molecule 1, Iba1）的表达显著增多；qPCR结果显示模型组小鼠脊髓组织IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达显著增多（P ＜ 0.05）；Western Blot结果显示模型组小鼠脊髓组织IL-1β的蛋白表达显著增多（P ＜ 0.05）。结论 通过肝左叶种植hepa1-6肝癌肿瘤组织可以有效地建立肝癌痛小鼠模型；该方法建立的肝癌痛小鼠模型存在弓背疼痛行为学异常、肝组织形态及结构异常、疼痛因子和炎症因子活化现象，可作为肝癌痛研究的有效动物模型，为研究肝癌痛的发病机制及药物治疗效果提供有效手段。
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七氟烷诱导术后认知功能障碍的模型建立与机制解析
王沁熙, 薛傲, 张建楠, 朱甜甜, 张毅平, 陈周婷, 蔡靓羽
Abstract:
术后认知功能障碍（Postoperative Cognitive Dysfunction，POCD）是老年患者麻醉与手术后常见的中枢神经系统并发症，表现为多维度认知功能下降，显著延长住院周期并增加医疗与社会负担。近年来，吸入性麻醉剂七氟烷被广泛证实为POCD的重要诱发因素之一。本文系统综述了七氟烷诱导POCD的动物模型构建策略及其多机制作用路径，重点从神经炎症、线粒体功能障碍、突触可塑性损伤、tau蛋白磷酸化、表观遗传调控异常及血脑屏障通透性改变六个维度展开机制解析。研究证据表明，七氟烷可通过激活小胶质细胞、上调促炎因子（如IL-6、TNF-α、IL-1β）、抑制线粒体复合物Ⅰ/Ⅲ功能、诱发氧化应激、破坏突触结构蛋白表达、促进tau蛋白过度磷酸化、诱导BDNF等关键基因启动子高甲基化及组蛋白去乙酰化，最终导致认知功能损伤。此外，七氟烷在特定病理状态下可破坏血脑屏障完整性，加剧外周炎症因子向中枢浸润，形成神经炎症-认知损伤的正反馈循环。七氟烷通过多通路协同诱发POCD，机制交织成网。未来需从“单靶”转向“多通路协同”干预，为老年患者术后认知保护提供新策略。
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糖脂代谢病大鼠模型的构建及评价
Abstract:
目的 本研究旨在通过饲喂Purina 5008饲料诱导Zucker糖尿病肥胖(Zucker Diabetic Fatty,ZDF)大鼠构建糖脂代谢病模型,并系统评估其病理特征,为糖脂代谢病机制研究及药物开发提供临床前模型工具。方法 选取12周龄雄性ZDF大鼠为模型组(n=9),Zucker瘦型(Zucker Lean,ZL)大鼠为正常对照组(n=9)。模型组喂饲Purina 5008饲料,对照组喂饲普通饲料,持续7周。观察大鼠体征评分、体重、Lee's指数、进食量及饮水量变化；测定空腹血糖、口服葡萄糖耐量、血清总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、胰岛素水平及胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)；通过苏木精 伊红(Hematoxylin eosin,H E)染色和油红O(Oil Red O,油红O)染色分析肝脏、胰腺及主动脉的病理改变。结果 与正常对照组相比,模型组大鼠出现多饮、多食、被毛暗淡、粪质变软等体征,且体征评分显著升高(P<0.01)。模型组体重、Lee"s指数、进食量和饮水量均显著增加(P<0.01),空腹血糖、血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST及HOMA-IR水平显著升高(P<0.01)。病理学检测显示,模型组肝脏脂肪变性严重,胰腺胰岛细胞空泡样变,主动脉壁结构紊乱呈不均匀增厚。结论 通过Purina 5008饲料诱导的ZDF大鼠模型可稳定模拟糖脂代谢病的核心病理特征,包括糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗及多器官损伤,为糖脂代谢病的机制研究与药物评价提供了可靠的实验平台。
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糖尿病肾病湿证病证结合动物模型的构建与评价
张家琦, 张朵, 刘文丽, 陈俊辉, 王若冰, 古文化, 沈耀华, 张蕾
Abstract:
目的 构建2型糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN）中医“湿证”病证结合动物模型，并对模型进行宏观表征及微观指标评价。方法 基于自发性db/db小鼠疾病模型，采用60%高脂饲料构建内湿证，探索糖尿病肾病湿证病证结合动物模型的构建。观察各组小鼠的一般情况及体质量；测定小鼠的尿微量白蛋白肌酐比、血糖值、肾功能及糖脂代谢等生化指标；HE、PAS、Masson、油红O染色观察肾脏的病理学改变；PCR技术检测肾脏组织的微炎症和纤维化水平；免疫荧光法检测肾脏组织巨噬细胞极化程度；HE染色和PCR技术检测肠组织黏膜屏障情况；收集小鼠粪便，运用LC-MS技术检测粪便代谢组。结果 与正常组和糖肾组相比，糖肾湿证组出现明显的皮毛滑腻出油、大便稀软、精神萎靡、倦怠乏力、扎堆蜷卧、多尿等现象，体质量明显增加（P＜0.05）提示湿证造模成功构建；在生化指标上，糖肾湿证组的总胆固醇指标明显升高（P＜0.05）；在肾脏组织病理改变上，糖肾湿证组的HE染色提示明显肾小球基底膜均质性增厚，系膜区基质明显增生，PAS染色提示糖原沉积现象明显加重（P＜0.05），Oil red染色见显著的脂滴沉积；在纤维化水平上，糖肾湿证组的Masson染色提示明显的胶原蓝染，肾小球间质纤维增生加重（P<0.001），且促纤维化因子α-SMA、CTGF、FN、TGF-β mRNA表达水平显著升高（P＜0.001）；在微炎症水平上，糖肾湿证组的炎症因子TNF-α、MCP-1、IL-6明显升高（P＜0.001），M1型巨噬细胞极化明显加强（P＜0.05）；在肠道微生态水平上，肠组织HE染色提示糖肾湿证组的肠道损伤加重，糖肾湿证组的肠Zo-1、Occludin mRNA表达水平明显降低（P＜0.001），粪便代谢组学结果表明湿证造模影响相关通路，包括倍他林生物合成、己内酰胺降解、苯丙恶嗪类生物合成、苯乙烯降解、α-亚麻酸代谢、苯丙氨酸代谢、鞘脂代谢、色氨酸代谢、托烷、哌啶和吡啶生物碱的生物合成等。结论 采用60%高脂饮食喂养复合自发性db/db小鼠疾病模型的方法，能够成功构建2型糖尿病肾病“湿证”病证结合动物模型。该研究为后续深入探索2型糖尿病肾病湿证病证结合动物模型的构建及中药复方对DN的药效学提供了较理想的动物模型。
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契合临床路径2型糖尿病大鼠模型建立、维持与评估
Abstract:
【摘要】 目的 对比2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM）模型建成后不同饮食干预方案及二甲双胍联合干预效果，建立及维持更契合临床实际的T2DM大鼠模型。方法 50只雄性SD大鼠随机分为2组：空白对照组（Control，n=10）、模型制备组（n=40），模型制备组大鼠采用高糖高脂饲料喂养，从第3周起联合每日灌胃脂肪乳，4周后两次腹腔注射25 mg/kg链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）诱导T2DM大鼠模型。模型建成后，将模型制备组随机分为高糖高脂-模型组（HSHF - M）、常规饮食-模型组（ND - M）、高糖高脂-二甲双胍组（HSHF - Met）、常规饮食-二甲双胍组（ND - Met），每组10只。给药组大鼠采用饮食联合二甲双胍干预，模型组大鼠仅进行饮食干预，Control组大鼠采用常规饮食，持续12周。饮食干预期间监测大鼠一般状态及生存指标检测；12周干预结束后，进行口服葡萄糖耐量（OGTT）试验，检测大鼠血清空腹胰岛素（FINS）水平并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛β细胞功能指数（HOMA-β），检测大鼠血清中血脂水平、肝功能、肾功能、氧化应激指标及炎症因子水平；并对大鼠胰腺、肝脏、肾脏组织病理变化观察且进行病理学分析。结果 实验表明，T2DM 模型大鼠制备成功后，采用常规饮食，12周内模型稳定，与HSHF-M组相比，ND-M组体质量显著增加（P＜0.05），尿量及血糖显著下降（P＜0.05）；OGTT实验0、60、90、120 min血糖明显低于HSHF-M组(P<0.05)，曲线下面积显著减小(P＜0.05)；血糖相关指标中GSP、FINS、HOMA-IR出现显著差异（P<0.05）；血脂相关指标中TC、TG、FFA、LDL-C水平显著降低（P<0.05），HDL-C水平显著升高（P<0.05）；肝功能相关指标ALT、ALP、AST及肾功能相关指标CRE、BUN指标显著降低（P<0.05）、NO显著升高（P<0.05）；氧化应激指标中MDA水平显著下降（P<0.05）、SOD水平显著上升（P<0.05）；炎症因子TNF-α、IL-6水平显著下降（P<0.05）；组织病理学显示，ND-M 组因未长期摄入高糖高脂饮食，其肝索紊乱、胰岛细胞减少及肾小球空泡等病理变化较 HSHF-M 组显著减轻。与HSHF-M组相比，HSHF-Met组和ND-Met组的生存指标及生化指标均显著改善（P<0.05），其中ND-Met组改善效果更显著，胰腺、肝脏病理损伤较HSHF-Met组较弱。结论 模型建成后喂养常规饮食可有效避免高糖高脂所致糖脂代谢紊乱、氧化应激、炎症反应及多器官病理损伤，成功建立并维持更契合临床路径的T2DM大鼠模型。
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不同亚型的MAO调控前列腺癌免疫微环境
Abstract:
癌相关成纤维细胞（Cancer-associated fibroblasts，CAFs）通过重塑肿瘤微环境（Tumor microenvironment，TME）显著影响前列腺癌（Prostate cancer，PCa）的发展和治疗，解析驱动其重塑的关键分子对于肿瘤研究具有重要意义。单胺氧化酶（Monoamine oxidase，MAO）家族是具有两种亚型MAOA和MAOB的线粒体外膜氧化酶，通过氧化脱氨作用参与单胺类物质代谢，其异常表达与PCa的生长、侵袭、迁移及不良预后密切相关，并显著影响TME的重塑。本文基于不同类型的动物模型，系统综述不同MAO亚型在CAFs中的生物学特性及其在PCa中的作用，探讨MAO抑制剂（Monoamine oxidase inhibitor，MAOI）联合靶向治疗PCa的潜在价值，重点关注其在PCa中差异表达的特征，进一步提出了开发基于不同MAO亚型的精准诊疗策略，期望为PCa的个体化治疗提供有效的干预靶点。
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基于中西医临床病证特点的骨骼肌损伤动物模型分析与评价
Abstract:
骨骼肌损伤（Skeletal muscle injury, SMI）在临床实践中较为常见，中西医对其病理机制和治疗策略存在不同的理解和方法。开发能够体现中西医临床特征的SMI动物模型，对于深入研究其发病机制和探索有效的治疗方法具有重要意义。本文从SMI的中西医病因病机、诊断标准及辨证分型出发，对现有动物模型的构建方法、特点及其与中西医病症的吻合度进行了综合评价。结果显示，重物坠落打击模型与中西医病症的吻合度最高，其中西医吻合度为69.6%，中医吻合度为49.4%；其次是运动诱导模型，西医吻合度为49.8%，中医吻合度为44.1%；而化学刺激和缺血再灌注模型的吻合度最低。总体而言，本文涉及的SMI动物模型在西医吻合度上优于中医吻合度，且现有模型难以与中医辨证分型精准对应。因此，构建能够准确反映中西医病证特点及中医证型的动物模型仍是未来研究的重要方向。
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胃癌前病变动物模型研究进展
Abstract:
胃癌是全球范围内高发的恶性肿瘤，其发病过程通常经历胃癌前病变阶段，包括慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生和不典型增生等。近年来，小鼠胃癌前病变模型在研究胃癌发生机制、病理特征及药物干预中起到了重要作用。本文系统总结了胃癌前病变动物模型的研究进展，涵盖了自发性模型、化学诱导模型、转基因模型、感染模型、饮食诱导模型、细胞移植模型和辐射诱导模型等多种类型。不同模型通过模拟胃癌前病变的组织学特征（如腺体萎缩、肠上皮化生）和分子生物学特征（如NF-κB、Wnt/β-catenin信号通路激活、炎症递质的作用），为胃癌的发病机制研究提供了多维度实验平台。此外，模型研究揭示了幽门螺杆菌感染、基因突变、化学致癌物等多种致病因素与胃癌前病变的密切关联。然而，现有模型在模拟人类胃癌前病变的复杂性、遗传异质性及肿瘤微环境方面仍存在一定局限性。本文为胃癌前病变模型的选择和应用提供了全面的参考，为胃癌的基础研究和临床转化提供了重要的理论支持。
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卡波姆产道凝胶在不同动物分娩模型中的助产作用
王瑞琪, 刘廉杰, 贾艳丽, 李佩云, 霍莹莹, 郭明刚, 孟繁思, 王全军, 韩刚, 陈 瑛, 董延生
Abstract:
目的 本研究通过在产道插入导尿管球囊并施加外力的形式构建SD大鼠、比格犬模拟分娩模型,评价卡波姆产道凝胶于在体、离体试验中对产道的物理保护作用。方法 在体试验中,SD大鼠分为空白对照组(C组)、阴性对照组(NC组)、医用液体石蜡组(MLP 组)和卡波姆产道凝胶低、高剂量组(COG-L组、COG-H组)；离体试验的SD大鼠与在体和离体试验中的比格犬均分为C组、MLP 组和COG-L组、COG-H组。其中C组和NC组不进行给药,MLP 组给予医用液体石蜡,COG-L组、COG-H组分别给予不同剂量卡波姆产道凝胶。在体试验中所有动物给药后在产道内插入导尿管,除C组不做处理外,其他各组通过充盈生理盐水的导尿管球囊并施以外力模拟分娩,苏木素-伊红(HE)染色检测产道组织的损伤程度。离体试验取离体产道,检测平滑肌产道延展率(Ld/L0)。结果 与MLP 组相比,SD大鼠及比格犬的COG-L组、COG-H组产道内球囊脱出所需外力均显著降低(P < 0.05)；比格犬的COG-L组、COG-H组的损伤程度和病变发生率均存在浓度相关性减轻；SD大鼠的COG-H组给药部位病变明显较轻,其他三组给药部位病变未见明显差异。与医用液体石蜡相比,卡波姆产道凝胶能够有效增加离体平滑肌的延展性,且呈剂量正相关。结论 成功构建SD大鼠、比格犬模拟分娩模型；卡波姆产道凝胶在SD大鼠及比格犬模拟分娩过程有助产作用,且药效优于医用液体石蜡。
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无菌中国地鼠模型建立
Abstract:
【目的】使用剖宫产净化(Cesarean section purification)方法建立无菌中国地鼠模型。【方法】供胎母鼠选择SPF级中国地鼠,雌雄按1：1进行交配,见栓后与雄鼠分开饲养。代乳母鼠的合笼时间早于供胎母鼠1～2d。怀孕的中国地鼠临产时在超净工作台内进行子宫摘除术,传入净化用隔离包内,剥离子宫获得待净化乳鼠,使用无菌级ICR小鼠进行代乳,成功离乳后转入饲养用隔离包内。每月对饲养用隔离包进行无菌状态检测。【结果】共实施2次剖宫产手术,第1次代乳失败；第2次代乳成功,获得仔鼠9只,离乳存活率56 %,依照GB /T 14926.41-2001进行无菌中国地鼠状态检测均为合格。【结论】通过剖宫产净化技术,使用无菌级ICR小鼠进行代乳,达到微生物净化目的,获得无菌化中国地鼠模型。
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胸腺移植改善人源T细胞免疫重建小鼠模型的研究进展
Abstract:
人源化造血干细胞（Humanized hematopoietic stem cells，Hu-HSCs）模型是模拟人源T细胞分化和功能的关键模型，然而重建小鼠由于背景为重度免疫缺陷，其胸腺发育受阻或没有胸腺，缺乏T细胞分化成熟的场所，导致重建小鼠人源功能性T细胞不足。尽管移植人胎儿胸腺组织能够支持人源化小鼠体内T细胞的有效发育，但供体组织稀缺和伦理问题限制了其广泛应用。因此，亟待开发新型胸腺组织克服上述局限性。本文系统总结了Hu-HSCs小鼠模型的基本特征及传统胎胸腺移植诱导的人T细胞免疫应答能力；重点综述了新型胸腺移植在促进T细胞发育、调节人类T细胞介导的免疫应答方面的作用，揭示其潜在机制及对提升人体免疫力的重要意义，期望为开发新的人源化小鼠模型提供理论依据和技术支持。
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肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染动物模型实验研究
马骏驰, 靳玮华, 李艳艳, 解学谦, 李艾亦, 杨凤梅, 段素琴, 唐洁, 李明学, 吴雅楠, 和占龙, 赵远
Abstract:
目的 建立肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染动物模型。旨在阐明两种病原体共感染的协同致病机制,为呼吸道混合感染的临床干预提供理论基础。方法 将24只叙利亚仓鼠分为对照组、流感病毒H1N1单独感染组、肺炎支原体单独感染组、肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染组,采用滴鼻和气管注射的方式攻毒。记录14d临床指标,检测生理指标以及排毒情况,感染后7dpi和14dpi选取动物进行组织病理学和病毒抗原与核酸检测。结果 单独和混合感染的实验组叙利亚仓鼠均出现类似人类流感或肺炎支原体感染的临床症状；在鼻拭子、咽拭子、肛拭子、血液和组织中均能检测到两种病原体的核酸；组织病理结果显示,实验组的不同部位均出现不同程度的病理损伤。结论 从临床症状、病毒复制以及病理表现等结果表明成功构建了肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染叙利亚仓鼠的动物模型,该模型可以为阐明呼吸道共感染机制及开展疫苗和药物研究、临床治疗策略提供了重要实验基础。
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斑马鱼失眠模型及其在植物源助眠产品开发中的应用进展
杨 瑞, 王潇潇, 王晓莉, 刘华梁, 姚正颖, 林佳琪, 孙力军
Abstract:
随着人们工作压力增加和生活方式的改变，失眠发病率呈显著上升趋势。斑马鱼作为新型模式生物，与人类基因组具有87%的同源性，其中枢神经系统在结构和功能上与人类保持高度保守，兼具高通量筛选、神经保守性和光学透明性等优势，已成为睡眠研究领域的重要生物评价模型。植物源天然产物因其丰富的助眠活性成分和较高的安全性，在助眠产品开发中展现出广阔前景。本文综述了睡眠调节机制、斑马鱼失眠模型的建立方法、行为学评价体系、助眠产品的开发应用等内容，为斑马鱼模型在助眠产品开发，尤其是在植物源助眠产品的研发与功效评价中的应用，提供理论依据和方法学参考。
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雌激素受体敲除模型在疾病中的应用及其发展前景
Abstract:
雌激素受体（estrogen receptors，ERs）参与调节人体多种复杂的生理过程。异常的ERs信号可能导致各种各样的疾病，包括神经系统疾病、骨质疏松症、心脏疾病和乳腺癌等。雌激素受体α（estrogen receptors α，ERα）、雌激素受体β（estrogen receptors β，ERβ）和新型G蛋白偶联雌激素受体1（g protein-coupled estrogen receptor 1，GPER-1）被认为是最重要的ERs。而ERs敲除模型能够表现出一些疾病表型，其可以作为一种研究ERs相关疾病及其干预措施的新的动物模型。本文综述了雌激素及ERα、ERβ和GPER-1的研究进展和重要作用，以及其ER敲除模型在疾病中的应用。
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3D打印个性化钛网联合GBR对兔ORNJ骨缺损修复效果的影响
Abstract:
目的 研究3D打印个性化钛网（3D printing individualized titanium mesh，3D-PITM）联合引导骨再生技术（guided bone regeneration,GBR）应用于兔颌骨放射性骨坏死（osteoradionecrosis of jaws,ORNJ）骨缺损模型的修复效果。方法18只ORNJ骨缺损大白兔随机分为a,b,c三组，每组6只。a组行清创后缝合，作为对照组，待自行恢复；b组清创后行骨缺损常规GBR术修复；c组清创后行骨缺损3D-PITM联合GBR修复。4周，8周，12周每组各处死2只，行免疫组化染色，检测成骨相关因子碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP）、骨钙素（Osteocalcin，OC）、骨形成蛋白2（Bone-forming proteins-2，BMP-2）；炎性因子白细胞介素-6（interleuker-6，IL-6）,肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）表达水平，评价骨缺损修复效果。结果4周时ALP各组表达水平无明显差异，甚至c组4周时OC表达水平低于b组，但ALP、BMP-2、OC在8周、12周时， c组的表达水平显著高于a组和b组。4、8、12周时IL-6及TNF-α表达水平c组均小于a、b两组，但4周时c、b两组IL-6表达水平差异无统计学意义。结论3D-PITM联合GBR对ORNJ骨缺损的修复效果显著优于单纯应用GBR或自行修复。
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针刺调节vPAG区P2RX7介导多巴胺能系统促醒TBI大鼠作用机制研究
Abstract:
目的 探讨针刺对创伤性颅脑损伤（traumatic brain injury，TBI）后昏迷大鼠的促醒机制。方法 SD大鼠随机分为空白组、模型组、溶剂对照组、针刺组、嘌呤能P2X7受体（P2X purinoceptor 7，P2RX7）拮抗剂组，每组12只。采用控制性皮质撞击造模法（electric controlled cortical impactor，eCCI）造模，溶剂对照组、针刺组和P2RX7拮抗剂组分别于中脑腹侧导水管周围灰质（ventral periaqueductal gray，vPAG）区注射DMSO溶液或P2RX7拮抗剂30min后造模，针刺组和P2RX7拮抗剂组造模后予百会、水沟穴针刺。通过昏迷时间、意识状态、mNSS评分评估行为学，HE和尼氏染色观察vPAG区组织形态，ELISA检测多巴胺（dopamine，DA）水平，免疫荧光、Western Blot和RT-qPCR检测P2RX7和多巴胺转运蛋白（dopamine transporter，DAT）表达。结果 与空白组相比，模型组、溶剂对照组和P2RX7拮抗剂组昏迷时长延长、各时间点的意识状态和mNSS评分升高（P＜0.05），vPAG区出现神经元变性、核固缩及尼氏小体增加等病理改变，且vPAG区DA水平、P2RX7和DAT表达降低（P＜0.05）；针刺组昏迷时长、TBI术后2.5 h和4 h的意识状态得分、TBI术后12 h的mNSS评分升高（P＜0.05），且vPAG区存在部分神经元变性、核固缩及尼氏小体增加等病理改变。与模型组相比，针刺组的昏迷时长缩短、各时间点的意识状态和mNSS评分降低（P＜0.05），vPAG区组织和神经元损伤减轻，DA水平、P2RX7和DAT表达升高（P＜0.05）。与溶剂对照组相比，针刺组昏迷时长缩短，TBI术后12 h、24 h、48 h的意识状态得分及TBI术后24 h、48 h的mNSS评分降低（P＜0.05），vPAG区组织和神经元损伤减轻，DA水平、P2RX7和DAT表达升高（P＜0.05）。与针刺组相比，P2RX7拮抗剂组的昏迷时长延长、各时间点的意识状态得分和mNSS评分升高（P＜0.05），vPAG区组织和神经元损伤增加，DA水平、P2RX7和DAT表达降低（P＜0.05）。结论 针刺百会、水沟穴可能是通过上调P2RX7表达以调控DA系统相关因子DAT和DA，恢复vPAG区病理改变，改善意识状态和神经功能，进而促醒TBI后昏迷大鼠。
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阿格拉宾通过抑制NLRP3炎症小体活化调控创伤性脑损伤小鼠神经炎症
方壹万, 周诗雨, 姬浩鑫, 闫华筝, 高建雄, 李睦融, 吕合作, 周慧芳
Abstract:
目的 探究阿格拉宾对创伤性脑损伤小鼠神经炎症的影响和机制。方法 选择雄性C57BL/6J成年小鼠将其随机分为：(1)假手术组(Sham组),(2)假手术+阿格拉宾组(Sham+Arglabin组),(3)脑损伤组(TBI组),(4)脑损伤+阿格拉宾组(TBI+Arglabin组)。采用控制性皮质冲击模型诱导脑损伤,造模成功后腹腔注射阿格拉宾5 μg/kg,每日一次,直至取材。术后3周水迷宫实验评估神经功能；术后4周HE染色和尼氏染色观察组织病理变化；术后3天WB检测脑组织NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白相对表达量,RT-qPCR检测炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6、iNOS、IL-4和Arg1的mRNA相对表达量；术后7天通过免疫荧光观察M1型和M2型细胞的表达情况。结果 与Sham组相比,TBI组小鼠神经功能下降(P < 0.0001),脑组织损伤面积显著增大(P < 0.01),神经元大量丢失(P < 0.01),脑组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达显著升高(P < 0.05),促炎细胞因子IL-1β、IL-18、IL-6和iNOS的表达显著升高(P < 0.05),抑炎细胞因子IL-4和Arg1的表达显著降低(P < 0.01),M1型细胞表达显著增加(P < 0.01)。与TBI组相比,TBI+Arglabin组小鼠神经功能明显改善(P < 0.01),脑组织损伤面积显著缩小(P < 0.01),神经元丢失显著减少(P < 0.01),脑组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达显著降低(P < 0.05),促炎细胞因子IL-1β、IL-18、IL-6和iNOS的表达显著降低(P < 0.05),抑炎细胞因子IL-4和Arg1的表达显著升高(P < 0.01),M2型细胞表达显著增加(P < 0.01)。结论 阿格拉宾通过抑制NLRP3炎症小体活化改善局部免疫微环境减轻创伤性脑损伤小鼠神经炎症。
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啮齿类动物心肌梗死模型现状及研究进展
Abstract:
心肌损伤是导致全球范围内死亡和残疾的主要原因之一，其病因多样，包括缺血、毒素、炎症等。在心肌损伤的基础研究中，啮齿类动物模型因其独特的优势，发挥着重要的作用。本文系统性地总结目前广泛应用的啮齿类心肌损伤模型的技术特点和研究进展，重点介绍了模拟缺血性心肌梗死的手术模型、非缺血性损伤模型以及药物或炎症诱导的心肌损伤模型，并探讨了基因工程模型在其中的应用。通过分析发现，模拟心肌梗死的冠状动脉结扎模型因其较好的重复性和临床相关性，依然是研究缺血性心脏病最常用的模型之一。然而，诸如药物心脏毒性、炎症反应、心肌修复等其他类型的损伤模型在研究特定病理机制方面具有不可替代的价值。理解各模型的特点与局限...对于提高心血管疾病研究的质量和临床转化潜力具有重要意义。
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无菌金黄地鼠糖尿病粪菌移植模型建立
Abstract:
目的 通过粪菌移植方法建立无菌金黄地鼠糖尿病模型并对模型进行评价。方法 24只雄性无菌金黄地鼠分为对照组(CN)和模型组(DM),每组各12只,分别接种健康SD大鼠和糖尿病SD大鼠粪便混悬液。粪菌移植10周时安乐死动物,取血液、小肠、胰腺和大肠内容物,进行血生化、组织病理学检查和16S rRNA测序。结果 粪菌移植后,血液生化指标检测显示CN组与DM组载脂蛋白A1,载脂蛋白B存在显著性差异(P<0.05)。DM模型组胰高血糖素、空腹血糖水平显著升高(P<0.01),空腹胰岛素显著下降(P<0.001),呈现明显糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗特征。HE染色显示,与CN组比较DM组胰腺出现多灶性脂肪沉积,胰岛萎缩,胰岛细胞减少,胰岛形态不规则及肿胀坏死,胰岛细胞增生,毛细血管增多,基底膜增厚。DM组小肠绒毛上皮增生,小肠绒毛融合、排列错乱,细胞肿胀并伴有变性坏死,小肠黏膜固有层炎性细胞聚集。16S rRNA测序显示CN组与DM组肠道菌群的多样性及特定菌群丰度存在显著差异。DM组α多样性指标中的chao1指数、shannon指数、simpson指数均显著降低(P< 0. 05)。 Unweighted Unifrac距离显著降低(P<0.01),提示β多样性存在差异。两者肠道细菌群落组成存在显著差异,DM组疣微菌门(Verrucomicrobiota)显著增加(P<0.05),厚壁菌门(Firmicutes)显著降低(P<0.05)。结论 通过粪菌移植技术成功建立无菌金黄地鼠糖尿病模型,动物出现与糖尿病相似的临床特征,为深入研究肠道微生物与糖尿病的发生发展关系提供了动物模型。
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基于16S rRNA 测序对小鼠坐骨神经损伤后的肠道菌群分析
Abstract:
目的 通过构建小鼠坐骨神经横断模型,利用16S rRNA测序研究坐骨神经损伤对肠道菌群的影响。方法 将18只C57BL/6小鼠随机分组,分别为假手术组、D1组、D4组、D7组、D14组、D28组。在造模后第0、1、4、7、14、28天收集小鼠结肠内容物进行16S rRNA测序,分析肠道菌群的物种丰度变化和菌群基因功能预测。结果 术后第4天开始,肠道内微生物群落的物种丰富度及多样性明显下降,第7天时物种水平开始回升。Firmicutes 厚壁菌门、Verrucomicrobiota 疣微菌门、Proteobacteria 变形菌门的变化趋势明显,其中且以Akkermansia 阿克曼氏菌属、Kurthia 库特氏菌属、Dubosiella 杜博西氏菌属等细菌表现最为显著。与假手术组相比,实验组Akkermansia 阿克曼氏菌属水平逐渐下降；Kurthia 库特氏菌属、Dubosiella 杜博西氏菌属等水平于第4天开始上升,且第7天达到峰值。另外,通过菌群基因功能预测结果显示： D7组多种代谢通路(如脂质代谢、氨基酸代谢等)水平最低。结论 坐骨神经横断引发小鼠肠道微生物菌群发生显著变化且代谢活动水平随之降低,以期将来可以利用这些肠道菌群促进周围神经损伤后修复与再生。
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怒情志的造模方法及其研究进展
Abstract:
怒情志作为七情五志之一，是人体的正常情志反应，外部因素诱发产生刺激达到阈值就会使内脏、心理趋于各种不定变化之中，如若诱发因素较为突然、剧烈和持续就可能会导致系统疾病的产生。国家发布的《22个专业95个病种中医诊疗方案》将怒作为主症之一则表明了怒致病的普遍性。怒情志动物模型可以模拟人类在不同诱因下所致的怒情志异常并进行症状的治疗性研究，因此对其诱导产生疾病的治疗研究包括发病机制、药物开发和临床疗效评价等都有着重要的参考价值，而目前对怒情志的造模方法尚缺少系统性研究。文章基于病证结合动物模型对以攻击行为表现出来的怒情志展开综述，以期为怒情志相关模型制备、机制研究及药物研发提供参考，为促进人们更为优质的生活提供行为指导。
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生酮饮食模型构建及行为学观察
Abstract:
目的 采用腹腔注射匹罗卡品（pilocarpine，Pilo）建立颞叶癫痫小鼠模型，观察小鼠进食习惯，比较常规饮食和生酮饮食（Ketogenic Diet，KD）干预下小鼠的体重变化、毛发状态和血酮水平差异，建立规范的生酮喂养模型，进而探究生酮饮食对癫痫小鼠的癫痫样发作、抑郁和焦虑相关行为学的调控作用。方法 取31只4周龄20~22g雄性SPF级ICR小鼠，取11只小鼠随机分配至常规饮食对照组（CON+ND组，n=5）和生酮饮食喂养组（CON+KD组，n=6）；取20只小鼠通过腹腔注射匹罗卡品诱导癫痫持续状态（status epilepsy，SE），根据Racine分级评估每只小鼠癫痫发作级别，癫痫造模成功的小鼠随机平均分配至癫痫模型组（SE+ND组）和癫痫模型生酮饮食干预组（SE+KD组）。实验周期设定为28天，CON+ND组与SE+ND组接受标准饲料喂养，CON+KD组与SE+KD组接受生酮饲料干预，构建规范的生酮饮食模型，监测小鼠体重及尾静脉血酮值，采用视频监控系统记录癫痫发作次数，并通过旷场实验（Open Field Test,OFT）、高架十字迷宫实验（Elevated Plus Maze,EPM）及强迫游泳实验（Forced Swimming Test,FST）比较不同组小鼠焦虑和抑郁样行为改变。结果 1.癫痫模型构建：20只小鼠进行造模，4只小鼠未达到Racine 4级，2只小鼠死亡，14只小鼠癫痫造模成功后随机平均分配至SE+KD组(n=7)和SE+ND组(n=7)，SE+KD组在生酮饮食喂养过程中2只小鼠死亡，SE+ND组常规饲料喂养中无小鼠死亡；2.生酮饮食模型构建：癫痫小鼠体重低于正常小鼠，生酮饮食喂养和标准饲料喂养小鼠的体重变化没有显著差异（P＞0.05）；CON+KD组第1、7、14、28天血酮值均≥1.0mmol/l；CON+KD组和SE+KD组小鼠在生酮饲料喂养第2天即出现毛发污染、排泄物附着及腹泻症状（n=9），第3天腹泻严重的小鼠出现直肠脱垂（n=5）；CON+ND组和SE+ND组小鼠在常规饲料喂养期间保持毛发光泽且大便成形。3.行为学实验：监测小鼠癫痫样行为发作频率，与SE+ND组比较，SE+KD组小鼠癫痫发作明显减少（P＜0.05）；强迫游泳实验中，与CON+ND组相比，CON+KD组不动时间明显减少（P＜0.05）。结论 规范化生酮饮食干预可有效维持治疗性酮症水平（血酮≥1.0 mmol/L），且对小鼠体重未产生显著影响（P > 0.05）。值得注意的是，生酮饮食显著抑制癫痫模型动物的异常放电活动（P < 0.05）。
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“化气消浊法”对ZDF大鼠血糖、血脂及细胞因子的调节作用
Abstract:
目的 检测化气消浊中药复方对ZDF（Zucker diabetic fatty）大鼠血糖、血脂及细胞因子的影响，探讨化气消浊法对糖脂代谢的调节作用及机制。方法 雄性ZDF (fa/fa)大鼠采用高脂饲料饲喂造成糖尿病模型后，按血糖水平随机分为模型组（8只）和中药组（8只）；ZDF (fa/+)大鼠为正常组（8只）。采用化气消浊代表方“气化通调方”连续灌胃6周，给药期间监测大鼠血糖变化，第6周进行口服糖耐量试验。6周后取材并留取血清检测血脂四项、游离脂肪酸；Elisa法检测胰岛素水平；HE染色观察胰腺病理改变；蛋白芯片法检测细胞因子表达并绘制聚类热图。结果 与正常组相比，模型组血糖、血脂四项、游离脂肪酸、胰岛素、炎性细胞因子（CXCL3、IL-2、IL-1α等）水平显著升高，中药组血糖、血脂四项、游离脂肪酸、胰岛素、炎性细胞因子水平较模型组降低。模型组胰岛细胞脱颗粒，中药组胰岛病理损害较模型组缓解。结论 化气消浊法代表方“气化通调方”可一定程度上调节ZDF大鼠的糖脂代谢，缓解慢性炎症损伤。
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基于铁死亡与焦亡探讨三叶青总黄酮干预脓毒症急性肝损伤的机制研究
夏晋, 胡文婷, 王子朝, 谢清宇, 丁泽涵, 唐蓉, 吴昊
Abstract:
目的:探讨三叶青总黄酮（Radix Tetrastigma Hemsleyani Flavone，RTHF）通过激活Nrf2信号通路对脓毒症急性肝损伤小鼠焦亡和铁死亡的影响以及分子机制。方法:将昆明小鼠随机分为六组:对照组、模型组、阳性对照组（地塞米松10 mg?kg－1）、RTHF低、中、高剂量组。RTHF低、中、高剂量组腹腔注射RTHF 60 mg?kg－1、90 mg?kg－1、120 mg?kg－1预处理7天，阳性对照组腹腔注射地塞米松10 mg?kg－1预处理7天。采用腹腔注射LPS(10 mg?kg－1)构建小鼠脓毒症急性肝损伤模型，24h后处死小鼠，收集肝脏、血液标本。通过大体标本与组织病理检查、生化检查以及分子生物学检查验证RTHF治疗脓毒症急性肝损伤的药效及药理机制。结果:与模型组相比，RTHF治疗组能显著降低小鼠血清ALT、AST、IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18和肝组织MDA、Fe2+、ROS水平（P<0.01，P<0.05），同时显著提高肝组织SOD、GSH含量（P<0.01，P<0.05）。此外，RTHF干预组小鼠肝脏组织病理损伤与炎症细胞浸润状况均得到显著改善，肝脏指数亦有所降低。在分子层面，RTHF能上调细胞核内Nrf2蛋白的表达，以及Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4 蛋白表达水平（P<0.01，P<0.05），并下调Cleaved-Caspase-1、Cleaved-GSDMD蛋白的表达，以及Keap1、NLRP3、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、GSDMD、Cleaved-GSDMD 蛋白表达（P<0.01，P<0.05）。结论:RTHF可通过激活Nrf2信号通路，有效减少炎性因子的释放，缓解氧化应激，抑制铁死亡以及NLRP3介导的细胞焦亡，从而对脂多糖（LPS）诱导的脓毒症肝损伤小鼠发挥保护作用。
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核受体NR4A1基因前脑特异性敲除鼠的构建及鉴定
王紫君, 张艳杰, 白雁中, 安文好, 秦豪泽, 葛芯雨, 刘丽娜
Abstract:
【摘要】 目的 基于loxP-Cre重组酶系统构建NR4A1前脑兴奋性神经元特异性敲除小鼠模型，并利用该敲除模型探究前脑兴奋性神经元特异性敲除NR4A1基因对小鼠认知及焦虑样行为的影响。 方法 将基因型为NR4A1flox/+小鼠自交，筛选鉴定得到基因型为NR4A1flox/flox的小鼠并与Camk2a-Cre小鼠杂交，通过鉴定得到基因型为NR4A1flox/+-Camk2a-Cre子一代小鼠，并将该基因型小鼠自交，筛选出基因型为NR4A1flox/flox-Camk2a-Cre的小鼠，即为NR4A1前脑兴奋性神经元条件性敲除小鼠。通过新物体识别和Y迷宫等行为学测试评估小鼠的认知功能，并通过黑白箱、旷场及高架十字迷宫等行为学测试来评价小鼠的焦虑样行为。此外，采用蛋白质免疫印迹（western blot，WB）和免疫荧光等技术检测NR4A1在前脑重要脑区海马中的表达情况。 结果 （1）基因鉴定结果：获得基因型为NR4A1flox/flox-Camk2a-Cre的前脑兴奋性神经元特异性敲除小鼠。（2）WB及免疫荧光结果：WB结果显示敲除组小鼠海马NR4A1蛋白水平显著降低；免疫荧光结果也显示敲除组小鼠海马脑区NR4A1的蛋白表达被有效敲低，免疫荧光信号强度低于对照组。（3）认知行为学测试结果：与对照组小鼠相比，敲除组小鼠新物体辨别指数，Y迷宫新异臂中的进入次数、运动距离及停留时间均无显著差异。（4）焦虑样行为测试结果：敲除组小鼠在黑白箱测试中明箱中的停留时间高于对照组，而在明箱的进入次数及运动距离与对照组相比无显著差异；敲除组小鼠在旷场中心区域停留时间高于对照组，但在中心区域的进入次数及运动距离无显著差异；敲除组小鼠和对照组小鼠高架十字迷宫实验中结果差异未达到统计学显著性。 结论 该研究成功构建了NR4A1前脑兴奋性神经元特异性敲除小鼠模型，该敲除小鼠认知水平无显著改变，但焦虑水平显著降低。该模型的建立为深入探究NR4A1基因在前脑脑区生理功能及病理机制中的作用提供了重要的实验工具。
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睡眠剥夺动物模型及其在中国四大慢病中的应用与思考
Abstract:
研究近年国内外主要睡眠剥夺模型,并探讨其在我国四大慢性病中的应用。大小鼠睡眠剥夺模型主要有改良多平台水环境法、轻度电击法、活动轮法、CPW范式法、睡眠剥夺仪法、轻柔刺激法、睡眠片段化等；斑马鱼睡眠剥夺模型主要有光照法、温和刺激法、生态水流法等；果蝇睡眠剥夺模型主要有机械刺激法、重复光刺激法、基因编辑法等。心脑血管疾病、癌症、慢性呼吸系统疾病、糖尿病四大慢病对人类健康的影响日益显著,了解睡眠剥夺模型在四大慢病的应用,为今后四大慢病的研究提供动物模型理论参考。
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大鼠中敲除SOD1导致肌萎缩侧索硬化症（ALS）表型
李新月, 潘烁, 张磊, 贺佳跃, 刘宁, 张旭, 高珊, 齐晓龙, 马元武
Abstract:
目的 建立超氧化物歧化酶1(SOD1)基因敲除大鼠,解析其行为学表型。方法 采用 CRISPR/Cas9技术构建SOD1敲除大鼠,通过PCR及Sanger测序进行基因型鉴定,Western Blot 验证SOD1蛋白表达情况。与野生型大鼠交配,评估基因型遗传稳定性。动态监测体重变化、生存率,系统评估组织病变、行为学异常、脊髓运动神经元数量变化及炎症变化情况。结果 基因型鉴定确认SOD1敲除大鼠模型制备成功。SOD1基因缺失影响大鼠发育及体重。行为学显示敲除大鼠表现出渐进性的运动共济失调,最终导致后肢瘫痪,伴随有脊髓L4区运动神经元丧失,小胶质细胞显著增多、腓肠肌肌细胞数量与横截面积减少等ALS疾病特征。结论 本研究成功构建SOD1敲除大鼠模型,该模型能重现ALS疾病的一些核心病理特征,为深入研究SOD1基因在ALS中的功能提供了重要动物模型。
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酒黄精多糖对AD果蝇模型运动、记忆和抗氧化能力影响的研究
Abstract:
目的 探究酒黄精多糖对AD果蝇模型运动、记忆能力及抗氧化指标的影响，并评估其对AD的治疗效果。方法 将遗传背景相同的w1118果蝇作为对照组，过表达Aβ42蛋白的AD果蝇模型随机分为模型组，低、中、高剂量酒黄精多糖组。干预28 d后，系统评估果蝇寿命、攀爬能力及嗅觉记忆能力；采用ELISA和qPCR技术检测脑组织中Aβ1-42和MDA含量，SOD与CAT的活性，以及keap1/Nrf2信号通路中抗氧化基因的表达水平。结果 行为学结果显示，相较于对照组，AD果蝇模型寿命显著缩短，攀爬与嗅觉记忆能力明显受损。酒黄精多糖干预后，上述行为学指标较模型组均得到显著改善。抗氧化指标分析表明，模型组脑组织中Aβ1-42和MDA含量显著升高，SOD、CAT活性显著降低；中、高剂量的酒黄精多糖可显著降低脑组织中Aβ1-42及MDA水平，提升SOD和CAT活性，增强抗氧化能力，低剂量组呈现改善趋势但无统计学差异。keaP1/Nrf2通路抗氧化基因检测显示，模型组中keap1表达升高，Nrf2、GCL、gsts1表达降低；高剂量酒黄精多糖能显著下调keap1表达，并上调Nrf2、GCL、gsts1表达，而中、低剂量组虽呈现激活keaP1/Nrf2信号通路的趋势，但无统计学差异。结论 酒黄精多糖通过调控Keap1/Nrf2抗氧化通路，增强抗氧化酶SOD和CAT的活性，减少氧化产物MDA的蓄积，从而减轻AD果蝇模型脑中Aβ的沉积，同时改善其运动与记忆功能障碍，发挥治疗作用。
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多房棘球蚴感染导致小鼠中心碳代谢紊乱及免疫细胞糖酵解功能抑制
Abstract:
【目的】阐明多房棘球蚴感染对宿主能量代谢的重编程作用及其免疫调控机制。【方法】采用靶向代谢组学技术检测感染小鼠血清中57种中心碳代谢物水平；使用Seahorse XF24能量代谢分析系统，通过线粒体压力测试和糖酵解压力测试评估外周血单个核细胞（PBMC）和脾脏CD4+T细胞的能量代谢功能。【结果】感染组小鼠血清中L-精氨酸、琥珀酸、异柠檬酸、磷酸二羟丙酮和苹果酸水平显著降低（P<0.05），KEGG分析显示肿瘤中的中心碳代谢等5条通路显著改变。感染组PBMC的线粒体呼吸功能和糖酵解能力均受到抑制（P<0.05）；脾脏CD4+T细胞虽未表现明显的线粒体功能异常，但糖酵解活性显著降低（P<0.05）。【结论】多房棘球蚴感染可导致小鼠血清中心碳代谢紊乱，并显著抑制PBMC和CD4+T细胞的糖酵解功能，提示能量代谢重编程可能在寄生虫免疫逃逸中发挥重要作用。
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酒精性肝病动物模型构建方法及研究进展
Abstract:
酒精性肝病(Alcoholic liver disease,ALD)是包括酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化在内的一系列由长期大量饮酒引起的肝脏疾病的总称。流行病学调查结果显示,酒精性肝病已成为我国最主要的慢性肝病之一。在过去的研究中,已经有许多ALD动物模型被人们熟知。但目前常用的动物模型存在造模周期长、不能大量复制、造模成本高等不足,因此为研究ALD的发生发展机制以及阻断机制,挖掘新型的ALD动物模型十分必要。本文将对酒精性肝病动物模型的构建及研究进展做一综述,以期为未来研究提供参考。
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类风湿关节炎血瘀证大鼠模型的构建及评价
陈美琪, 陈柏臻, 马梦洋, 杨璐, 伍嘉琪, 周颖燕, 黄闰月, 王茂杰, 黄清春, 何羿婷, 何晓红
Abstract:
目的 构建不同血瘀证型的胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis, CIA）大鼠模型，并对不同造模方法进行评价，为建立稳定可靠的类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis, RA）血瘀证大鼠模型提供一定的依据。方法 在CIA大鼠模型的基础上，分别叠加肾上腺素注射、冰水浴刺激、饥饿、脂多糖及高脂饲料喂养等多种因素，建立六种不同血瘀证模型。采用关节肿胀度测量、AI评分、Micro-CT、苏木素-伊红（hematoxylin and eosin, H&E）染色，同时检测血常规、血流动力学，并通过ELISA法检测炎症指标、凝血指标、血瘀相关指标，对各造模方法进行综合评价。结果 与空白组相比，单CIA组表现出炎症指标、血液学指标、血流动力学参数、凝血指标均明显升高，CT显示骨破坏明显，H&E染色可见关节间隙面粗糙及炎性细胞浸润；在此基础上，不同叠加刺激均加重血瘀证相关表现，但程度有所差异：CIA + Adr组和CIA + LPS组表现为炎症、凝血及血管活性物质全面升高；CIA + Adr +冰水浴组除炎症加重外，血流动力学指标出现部分下降；CIA + Adr +冰水浴+饥饿组则在炎症和凝血指标异常的同时，部分因子降低；CIA + LPS +高脂饲料组、CIA +高脂饲料组则主要表现为血液学和血管内皮指标的异常。结论 多种刺激因素可在CIA模型大鼠中成功诱导出不同血瘀证型，并呈现一定差异性。本研究从多维度对RA血瘀证不同造模方式进行了全面评估，为进一步研究该疾病证型的发病机制和治疗策略提供了一定的实验依据。
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粪菌移植治疗慢性腹泻的研究进展
Abstract:
粪菌移植（Fecal Microbiota Transplantation, FMT）是将健康供体粪便中的微生物移植到患者胃肠道中，直接改变患者肠道微生物群，使其成分正常化并达到治疗效果的一种治疗方法。慢性腹泻（Chronic Diarrhea）与肠道微生物群落密切相关，肠道微生物群失衡可导致慢性腹泻的发生和发展，FMT是治疗慢性腹泻的重要有效手段。本文综述了慢性腹泻与肠道微生物群落之间的相互关系、FMT技术在慢性腹泻中的研究及应用进展、存在的问题和对未来的展望，为FMT治疗慢性腹泻的进一步研究提供参考。
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预期性恶心呕吐动物模型的构建策略
Abstract:
预期性恶心呕吐是一种习得性恶心呕吐,当化疗引起的恶心呕吐没有得到有效的控制时,患者往往会在下一次化疗前即出现恶心呕吐称为预期性恶心呕吐,其恶心呕吐的程度与患者焦虑抑郁程度呈正相关,约有20%-30%的患者在第四个化疗周期会出现预期性恶心呕吐。然而,目前针对预期性恶心呕吐的治疗手段有限,因此深入探究预期性恶心呕吐的发病机制、探寻有效的治疗方法以及开发新型药物已成为当务之急。在这一过程中,预期性恶心呕吐动物模型的建立发挥着不可或缺的关键作用。但直至今日,仍没有一种理想的预期性动物模型能够全面、准确地复刻化疗患者预期性恶心呕吐的发生与发展的所有特征。本文系统梳理了近年来预期性恶心呕吐动物模型建立方法的研究进展,详细综述了常见实验动物、常见致吐剂以及以大鼠及氯化锂致吐剂建立预期性恶心呕吐动物模型的方法,旨在为未来设计出更为精准的动物模型提供参考,并为进一步探索其发病机制以及潜在药物治疗提供一定的基础。
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脓毒症免疫抑制小鼠模型的制备、评价及研究进展
李昌奇, 李昕洋, 陈波, 张靖宇, 王婧文, 匡小冰, 李柠岑, 傅丽媛, 马培宏
Abstract:
脓毒症是临床中死亡率较高的危重疾病，后期的免疫抑制状态与患者不良预后密切相关。建立可靠的动物模型对于深入剖析脓毒症免疫抑制的机制及治疗策略至关重要。目前，现有模型多用于脓毒症过度炎症的研究，在脓毒症免疫抑制的相关研究中使用较少，并且相关研究的评估标准也不尽相同。盲肠结扎穿孔（CLP）和脂多糖（LPS）注射是常用模型，其中CLP能较好模拟临床病理过程，但模型稳定性较差；LPS操作简单，但与实际感染存在差异。对于动物模型免疫抑制程度，可通过检测免疫细胞数量、细胞因子水平及免疫器官等指标进行有效地评估。本文通过系统查阅分析近年文献，总结脓毒症免疫抑制动物模型的构建方法与评估指标，分析不同模型的优缺点，以期为脓毒症免疫抑制模型设计提供前期实验依据。
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新型球囊扩张式经导管主动脉瓣膜系统在猪模型中的基础实验研究
Abstract:
目的：本研究旨在通过动物实验,全面评估新型球囊扩张式经导管主动脉瓣膜在生物体内的生物相容性、抗钙化性及长周期植入稳定性。方法：选取27只体重约45kg的健康普通实验白猪作为实验动物。术前对其进行全面体检并给予相应预处理,包括药物治疗和消毒等。在无菌手术条件下,经股动脉血管通路将装载于球囊导管输送系统上的瓣膜原位植入猪主动脉瓣位置,术后密切观察动物生命体征、饮食及活动情况,并给予持续药物治疗。在即刻、30d、90d、180d等时间节点,通过超声心动检查、数字减影血管造影(Digital Subtraction Angiography, DSA)检查评估瓣膜植入后的血流动力学指标、植入位置及对周边心脏结构是否有影响等情况；完成上述检查后,在相应的随访点对动物心脏及主要脏器组织进行取材,通过组织病理学染色,分析组织炎症反应、血栓评分、钙化程度以及内皮化程度。通过X射线拍照和Micro-CT扫描,评价瓣膜支架结构完整性和瓣叶钙化情况。结果：实验最终23只动物纳入有效分析。成功植入瓣膜的动物术后恢复良好,生命体征平稳。随访检查显示,主动脉瓣血流速度、跨瓣压差和瓣叶运动等指标正常或逐渐改善,支架位置稳定,血管保持通畅。组织学分析表明,植入部位组织炎症细胞浸润程度较轻,无血栓形成,钙化面积占比低,支架完整性良好,瓣叶钙化程度低。统计学分析结果显示,各项指标均符合预期,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：新型球囊扩张式经导管主动脉瓣膜系统在动物实验中展现出良好的生物相容性、抗钙化性及植入稳定性,为后续开展临床试验奠定了坚实基础,有望提升经导管主动脉瓣膜置入术(Transcatheter Aortic Valve Implantation, TAVI)对中国患者的治疗效果,推动国产TAVI器械的技术进步,为心血管疾病治疗领域带来新的突破和发展机遇。
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肉桂枝叶水提物不同极性部位对气虚大鼠的补气作用及机制研究
Abstract:
目的 研究肉桂枝叶水提物不同极性部位对气虚大鼠的补气作用及机制,为肉桂补气的药效物质基础提供参考。方法 将90只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、乙酸乙酯部位高剂量组、乙酸乙酯部位低剂量组、正丁醇部位高剂量组、正丁醇部位低剂量组、水部位高剂量组、水部位低剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组均采用“饮食不节+疲劳”法构建气虚动物模型,造模同时,灌胃给药,每天1次,连续给药21 d。末次给药后,记录大鼠的体质量、负重游泳时间,测定血清中抗肿瘤坏死因子-α(anti-tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素-2(interleukin-2,IL-2)、白介素-12(interleukin-12,IL-12)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸(lactic acid,LD)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、白蛋白(albumin,ALB)及肝脏中二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)等指标,测定胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数,使用HE染色法对各组大鼠的肝脏进行病理观察。结果 与模型组比较,各给药组大鼠的气虚症状及肝脏组织损伤均得到了不同程度改善；乙酸乙酯部位、正丁醇部位均可显著延长气虚大鼠的负重游泳时间(P＜0.01)；乙酸乙酯部位高剂量可显著升高胸腺指数、TNF-α、IL-2、IL-12、ADP、ATP、SOD、ALB含量(P＜0.05,P＜0.01),显著降低CK、、LD、LDH、MDA含量(P＜0.05,P＜0.01)；乙酸乙酯部位低剂量可显著升高IL-2、ATP、ADP、ALB含量(P＜0.05,P＜0.01),显著降低MDA、LD、LDH含量(P＜0.05,P＜0.01)；正丁醇部位高剂量可显著升高胸腺指数、IL-2、IL-12、ATP、ADP、ALB、SOD含量(P＜0.01),显著降低TNF-α、CK、LD、LDH、MDA含量(P＜0.05,P＜0.01)；正丁醇部位低剂量可显著升高SOD、IL-1、ALB、ATP、ADP含量(P＜0.05,P＜0.01),显著降低CK、LDH、LD、MDA含量(P＜0.05,P＜0.01)；水部位高剂量显著升高IL-12、ATP含量(P＜0.05),显著降低TNF-α、LDH、MDA含量(P＜0.05,P＜0.01)；水部位低剂量可显著降低LD含量(P＜0.05)。结论 肉桂枝叶水提取物不同极性部位可不同程度改善大鼠气虚症状及保护气虚大鼠的胸腺、脾脏、肝脏,且可调控气虚大鼠多种因子水平,从而提高其免疫力、减少脏器损伤等多种效果以达到补气、延长疲劳发生时间、增强机体的运动耐力等作用。
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微卫星标记在非人灵长类动物亲权鉴定中的研究进展
Abstract:
微卫星标记是由2~6个核苷酸短序列串联重复而成，广泛分布于真核生物基因组中，因其多态性高、数量多、遵循孟德尔遗传定律、且容易进行PCR扩增等特点，已经成为非人灵长类动物亲权鉴定中最常用的方法。丰富的灵长类动物是世界宝贵的遗传资源，但因栖息地破坏、非法狩猎、宠物贸易和保护与管理的不到位造成灵长类动物品种资源数量下降以及生产性能降低，为充分保护灵长类动物，利用分子技术开展对灵长类动物的保护研究已经成为主流。本文系统阐述了微卫星标记的结构特征与遗传特性，明确其优势与不足，为后续研究中工具的合理选择提供理论依据。在此基础上，详细介绍了其在非人灵长类动物中的意义以及在圈养种群亲权鉴定和野生种群遗传评估中的应用，这些应用展示了微卫星标记可精准实现亲权鉴定，有效避免近亲繁殖、保障种群遗传多样性；且通过遗传多样性水平、基因流等指标的评估，为物种保护策略的制定提供科学数据支撑。最后，结合当前研究现状，讨论了其目前发展的局限性与挑战，展望了微卫星标记与新一代测序技术、多组学技术相结合的发展趋势。旨在为灵长类动物的种群管理和物种多样性保护以及未来发展提供科学的帮助。
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原发性胆汁性胆管炎小鼠模型的特点及研究进展
Abstract:
原发性胆汁性胆管炎(Primary biliary cholangitis, PBC)是一种高发于中年女性的自身免疫性疾病，其特征是免疫介导的肝内汇管区淋巴细胞浸润和胆管破坏。PBC的发病机制复杂，病因尚不明确。动物模型对于阐明PBC的发病机制及临床治疗具有重要意义。现有的PBC动物模型虽表现出与人类疾病发展类似的特征，但并未完全模拟PBC的临床表现和病理变化。本文系统比较了不同诱导方式构建的PBC小鼠模型在遗传背景、造模原理、致病细胞以及免疫学等方面的特征；比较了不同PBC小鼠模型免疫调控与疾病表型的差异；初步探讨了基于PBC动物模型的临床前治疗研究策略，有助于理解和优化动物模型，以进一步阐明人类PBC的复杂病理过程，为PBC的精准治疗提供新的思路。
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COPD相关共病动物模型研究进展
Abstract:
慢性阻塞性肺疾病是一种肺部常见疾病,以持续性气流受限为主要特征的一种可预防和治疗的疾病。近年来,慢性阻塞性肺疾病相关共病得到普遍关注,严重影响患者生活质量以及预后,推动了慢性阻塞性肺疾病的恶性发展。实验动物模型是深入研究慢性阻塞性肺疾病以及其相关共病发病机制、探索有效治疗手段的关键工具,本文对近年来慢性阻塞性肺疾病相关共病实验动物模型的造模方法以及研究进展进行了归纳和总结,以期为今后临床研究、筛选相关共病动物模型提供参考和指导。
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子宫内膜异位症啮齿类动物模型的研究进展
Abstract:
子宫内膜异位症（endometriosis，EMs）好发于育龄期女性，影响患者身心健康，然而临床上尚无治愈方法。为深入理解其发病机制并指导临床治疗，适宜动物模型的建立至关重要。目前啮齿类动物因成本低、繁殖周期明确、建模耗时短等优点成为首选。传统的子宫内膜异位症啮齿类模型包括自体移植模型、同种异体移植模型及异种移植模型。研究者还对现有模型进行优化以更好的模拟人体疾病状态或临床症状。本文综述各种啮齿类动物子宫内膜异位症模型和影响造模的因素及评估成功率的指标，探讨未来动物模型的发展方向。
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艾司氯胺酮通过调节脊髓背角星形胶质细胞活化和Wnt / β-catenin通路在小鼠慢性疼痛中的作用机制研究
Abstract:
目的 本研究旨在探讨艾司氯胺酮对慢性疼痛小鼠脊髓背角星形胶质细胞活化的影响，并分析其对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 选取了40只C57BL/6J品系的小鼠，随机分为五组：假手术组（sham组）、疼痛模型组（Model组）、艾司氯胺酮低剂量组（L-Es组）、艾司氯胺酮中剂量组（M-Es组）、艾司氯胺酮高剂量组（H-Es组）。除了sham组外，其他组均采用坐骨神经分支选择性损伤法建立慢性疼痛小鼠模型。各组接受相应药物处理，并测定其机械撤退阈值（Mechanical Withdrawal Threshold，MWT）和热撤退潜伏期（TWL）。此外，通过免疫组织化学方法检测脊髓中抗胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的表达水平；采用免疫荧光技术观察小鼠脊髓背角星形胶质细胞的激活情况；使用酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）检测脊髓中的炎症因子白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的水平；通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应（Real-Time Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction），qRT-PCR）分析小鼠脊髓中Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1的mRNA表达水平；利用蛋白质印迹（Western blot，WB）评估小鼠脊髓中Wnt3a、β-catenin和Cyclin D1蛋白的表达情况。 结果 与sham组相比，Model组小鼠的MWT和TWL显著降低（均P<0.001）；同时，炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的水平、GFAP蛋白的表达水平均升高（均P<0.001），且GFAP与Iba-1存在共表达现象，以及Wnt3a、β-catenin和Cyclin D1的mRNA及蛋白表达均显著升高（均P<0.001）。与Model组相比，艾司氯胺酮各剂量组小鼠的MWT和TWL均显著升高（均P<0.05），同时炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的水平、GFAP蛋白的表达显著降低（P<0.05），且GFAP与Iba-1不存在共表达现象，以及Wnt3a、β-catenin和Cyclin D1的mRNA及蛋白（P<0.05）表达均显著下降。 结论 艾司氯胺酮能够抑制星形胶质细胞的激活和炎症反应，从而减轻慢性疼痛，其作用机制可能涉及对Wnt/β-catenin信号传导途径的调节。
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5×FAD小鼠中神经递质动态变化与淀粉样蛋白沉积及神经炎症的时序关联研究
梁莹莹, 李鑫, 侯雪婷, 刘冰琳, 连丁丁, 陈欢, 侯宏卫, 计敏
Abstract:
目的 探究5×FAD小鼠中神经递质动态变化与β-淀粉样蛋白(amyloid-beta,Aβ)沉积及神经炎症的时序关联。方法 选取1.5月龄(病理早期)、3月龄(病理中期)和6月龄(病理晚期)的5×FAD及WT小鼠,建立阿尔茨海默病(Alzheimer"s Disease,AD)进展的时间窗模型。通过Y迷宫、新物体识别及旷场进行行为学表型量化。利用免疫荧光检测海马和前额叶皮层(prefrontal Cortex,PFC)的Aβ表达和胶质细胞激活水平,HE染色观察海马神经元形态,并采用高效液相色谱法测定海马和PFC的神经递质水平。结果 研究发现,1.5月龄5×FAD小鼠海马中γ-氨基丁酸水平较WT小鼠下降；与WT小鼠相比,3月龄5×FAD小鼠海马部分神经递质如乙酰胆碱、谷氨酸、5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸水平发生显著变化,此时海马和PFC已有少量Aβ沉积,并伴随小胶质细胞激活；在6月龄时,5×FAD小鼠海马和PFC中神经递质水平持续降低,并伴随海马和PFC大量的Aβ沉积,海马神经元损伤以及胶质细胞激活水平的显著增加；同时出现认知行为障碍。结论 5×FAD小鼠在3月龄即出现部分神经递质水平紊乱,并随疾病进展进一步加剧,这一变化与Aβ沉积、神经炎症和神经元损伤密切相关。
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衰老动物模型的最新研究进展及应用前景
Abstract:
衰老是生物体不可避免的生物学过程，伴随着多种生理功能的衰退和疾病风险的增加。随着全球老龄化问题日益严峻，衰老的细胞分子机制研究已成为医学生物领域的研究热点。动物模型在衰老研究中发挥着不可替代的作用。常用于衰老研究的模式动物有线虫、果蝇、小鼠、大鼠、鼹鼠和恒河猴等。基于实验成本和实验周期考虑，小鼠是使用范围最广的实验模式动物。在正常生理和饲养条件下，小鼠在18月龄时具有衰老表型，实验周期长且费用高，科学家已通过多种措施建立小鼠早衰模型来缩减实验进程。衰老表现出明显的组织和细胞异质性，在研究不同组织衰老的时候需要使用不同的早衰动物模型，且同一早衰模型在模拟人类衰老表型、筛选抗衰老靶点及抗衰老药物评价中各有优势与局限性。本文综述了各种不同的方法建立的早衰动物模型的形态、生理和病理表型差异，并对提出这种早衰模型的适用范围和局限性，为衰老机制研究和转化医学提供了系统的模型选择依据及技术展望。
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骨髓间充质干细胞对D-半乳糖所致大脑衰老的作用机制研究
陈晓旭, 袁小霜, 田婷, 黎冰冰, 杨波, 杨姁, 田婷婷, 陈发, 李艳菊, 唐东昕, 刘洋, 王飞清
Abstract:
【】 目的 探究大鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对由D-半乳糖引起的脑组织衰老的影响及其潜在的作用机制。方法 通过注射D-半乳糖建立大鼠大脑衰老模型,实验组予以尾静脉注射MSC,实验结束后评估大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(superoxidedismutase, SOD)活性和丙二醛(Malondialdehyde, MDA)水平,通过HE染色观察脑组织病理切片变化,最后通过PCR与Western blot观察炎性因子IL-1(Interleukin-1, IL-1)和IL-6(Interleukin-6, IL-6)、通路蛋白BDNF(brain-derived neuotrophyic factor, BDNF)-TrkB(Tropomyosin receptor kinase B, TrkB)、生长负调节因子p53和p16以及血管内皮生长生长因子(VEGF)和成纤维生长因子(bFGF)的表达。结果 与模型组相比,实验组大鼠脑组织内的SOD活性显著升高,MDA水平则明显降低(P < 0.05)。HE染色病理图像显示,实验组能够改善大脑皮层和海马区的病理状态,增加脑内神经元数量和核仁比；同时,PCR和Western blot结果显示,实验组相较模型组，其IL-1和IL-6、p53和p16的表达显著降低，BDNF和TrkB、VEGF和bFGF的表达则明显增加（P < 0.05）。结论 综上，我们推测MSC可能通过BDNF-TrkB信号通路抑制氧化应激及炎性途径，同时增加VEGF与bFGF等营养因子的分泌营养从而改善D-半乳糖诱导的大脑衰老。
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线粒体SIRTs在神经退行性疾病中的研究进展
Abstract:
神经退行性疾病是以脑和／或脊髓神经元慢性进行性退变为主要病理特征的一类疾病，其病因不清、发病机制复杂，至今尚无有效的治疗方法。近年来，线粒体定位的沉默信息调节因子（silent information regulators，SIRTs）家族成员SIRT3、SIRT4、SIRT5在神经退行性疾病中的作用日益受到关注。研究表明它们通过调节线粒体功能、炎症反应等参与了神经元变性的许多重要环节。本文综述了线粒体SIRTs在阿尔茨海默病、帕金森病和脊髓侧索硬化症等神经退行性疾病中的研究进展，以期为阐明疾病的发病机制与防治提供新的思路。
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线粒体自噬在阿尔茨海默病的作用及中药调控机制研究进展
赵芳芳, 郭燕可, 王雪可, 庞伯通, 朱艳强, 秦阳, 崔应麟
Abstract:
线粒体自噬是通过一种独特的机制选择性地清除功能失调或过量的线粒体，与阿尔茨海默病关系密切，其共同特征是聚集性神经毒性蛋白和功能失调的线粒体。近年来大量研究证实，中药治疗阿尔茨海默病效果显著，其多靶点、多通路、多作用等优势已成为阿尔茨海默病的重要组成部分，健脑益智方、当归芍药汤、生物碱、黄酮类等中药复方和单体有效成分可通过调节线粒体自噬相关信号通路和靶点，抑制神经元线粒体自噬缺陷，发挥保护神经元作用。本综述阐述了线粒体自噬的基本过程、相关信号通路、在阿尔茨海默病发病过程中的分子机制及相关中药通过调控线粒体自噬改善阿尔茨海默病的最新研究进展，拟为未来基础研究及临床治疗提供思路与参考。
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α-突触核蛋白致病机制及其疾病模型研究进展
Abstract:
帕金森病（Parkinson's Disease，PD）的核心病理特征是α-突触核蛋白（α-synuclein）的异常聚集及其引发的神经元损伤，α-突触核蛋白在形成寡聚体或原纤维的形式时具有毒性作用，通过线粒体功能障碍、囊泡转运障碍、多巴胺自发氧化以及神经炎症等多重途径导致神经元死亡。此外，α-突出核蛋白可在细胞间传播，通过外泌体、胞吞胞吐、隧道纳米管（Carbon Nanotube，CNT）或迷走神经轴突运输扩散，形成级联病理效应。本文系统地综述了α-突触核蛋白的结构功能、毒性作用机制、细胞间传播途径、过表达动物模型，以及针对其致病机制可能存在的治疗靶点的研究进展。
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抑郁与肿瘤共病机制及动物模型研究进展
Abstract:
抑郁与肿瘤共病是当前全球公共卫生领域面临的重大挑战,严重影响患者的生存质量和临床预后。本文系统回顾了抑郁与肿瘤共病的流行病学特征、临床危害及当前研究面临的主要挑战,重点分析了抑郁通过神经内分泌-免疫调控网络对肿瘤发生发展的促进作用及其对免疫功能的抑制作用,详细阐述抑郁相关神经递质(如血清素、去甲肾上腺素)和应激激素(如皮质醇)在肿瘤微环境中的动态变化及其相互作用机制,深入揭示了抑郁通过激活HPA轴和交感神经系统,调控肿瘤免疫逃逸、转移和血管生成等恶性生物学行为的分子机制。同时,本文评述了现有动物模型在抑郁与肿瘤共病研究中的应用价值与发展瓶颈,强调建立更为精准的共病模型对于揭示共病机制和探索共病健康管理策略的重要性和急迫性。通过本综述,旨在提高对抑郁与肿瘤共病的风险预测、临床干预和基础研究的关注,为开发抑郁-肿瘤共病模型提供理论依据和新的研究方向。
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脊髓损伤后神经源性膀胱动物模型研究进展
张彦, 王啸轶, 卓越, 田楚宁, 李芊, 罗小精, 肖露波, 胡栓, 彭佳丽, 张泓
Abstract:
神经源性膀胱(neurogenic bladder, NB)是最具挑战性的泌尿系统疾病之一,脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是其发病的主要原因之一。动物模型是研究SCI后NB发病机制、治疗策略及筛选新药的重要工具。本文通过回顾与整理国内外近年来 SCI后NB动物模型相关的文献,从动物类型、脊髓损伤节段、造模方法、模型评价指标等几个方面归纳和分析 SCI后NB动物模型的研究进展,以期为基于SCI后NB动物模型开展的实验研究提供参考。
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“数挫意阻”致焦虑:一种情志失调新假说探讨
高明周, 胡明会, 董洪玮, 张若萱, 赵月, 王新宇, 李自发, 耿希文, 魏盛, 张浩.
Abstract:
焦虑作为一种主要的情绪障碍,表现为个体对未来威胁的预期,发病率约为7.3%,终生患病率位居首位,且与抑郁存在重叠机制,为多种精神疾病或称中医情志病证典型症状,共病率及致残率高, 严重危害人民健康。动物模型作为研究焦虑的重要载体,对破解焦虑发病机制及研发药物具有重要意义。但传统上的应激致焦虑公认范式却较为局限,本文基于“传统理论+临床数据+动物实验数据”提出一种“数挫意阻”致焦虑新假说,定义为“个体经过多次尝试后自身需求无法满足、需求受限或被剥夺,是一种因愿望受阻又无能为力时所诱发的焦虑状态”,本假说更加契合临床患者绝望放弃、快感缺乏和社交退缩典型表现,并契合“饥而不能食,食而不能得,得而不能饱”传统理论及实验数据支撑,据此建立的造模范式易于操作、重复性好、成本低廉,可用于建立大小鼠焦虑模型,为抗焦虑药物的研发及药效学评价提供理论和模型依据。
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三种化学消毒剂对斑马鱼胚胎表面消毒的评价
Abstract:
【】目的 斑马鱼是科学研究中应用最广的实验动物之一，胚胎期是斑马鱼研究中最重要的应用时期。胚胎的卫生直接影响斑马鱼的发育和存活率，胚胎可能携带的病原更会影响实验数据质量。本研究通过检测不同消毒剂和不同作用时间来获取斑马鱼胚胎消毒的高效方案，促进鱼房管理质量。方法:本研究使用试剂级聚维酮碘、试剂级次氯酸钠和二氧化氯，三种在国内市场上容易获取并可用于胚胎消毒的试剂，从斑马鱼的存活率、畸形率、出膜率等方面评估这三种化学消毒剂在不同浓度和不同消毒时间下对不同年龄的斑马鱼胚胎的毒性影响，并从细菌学角度即消毒后胚胎表面含菌量对三种消毒剂的效果进行比较。结果:本研究发现次氯酸钠和二氧化氯都能较好杀灭胚胎表面细菌，而聚维酮碘消毒效果不佳；30 ppm的次氯酸钠和二氧化氯处理下斑马鱼胚胎的存活率、出膜率、畸形率与对照组无差异；次氯酸钠和二氧化氯处理10分钟比处理5分钟的杀菌效果要更好。鉴于二氧化氯操作使用的复杂性，本研究推荐使用30ppm的次氯酸钠，对6至24 hpf胚胎消毒10分钟的操作方法。
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阿尔茨海默病的动物模型研究进展
Abstract:
阿尔茨海默病（alzheimer's disease，AD）是常见的神经退行性疾病，是导致患者发生认知功能障碍和行为异常的主要病因。构建与人类病变特点相似的动物模型对于更好地研究AD的发病机制和病理特点，开发新的治疗药物至关重要。本文结合最新研究进展，按照衰老模型、基因修饰模型、化学诱导模型的分类，总结了目前国内外常用的AD动物模型，阐述不同AD动物模型的造模机制、病理变化特点，并对其优缺点进行对比，以期为研究者选择合适的动物模型研究AD提供参考。
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围绝经期干眼肝肾阴虚证大鼠模型的建立与评价
田赛男, 刘桂成, 陈瑶, 唐丽, 刘培, 雷峻显, 彭俊, 彭清华
Abstract:
目的 从“以方测证”的中医证候角度,探讨围绝经期干眼肝肾阴虚证大鼠模型的建立。方法 30只SPF级SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、杞菊地黄汤组,每组10只。除假手术组外,其余2组大鼠行双侧卵巢切除,并予以0.1%苯扎氯铵滴眼液滴眼联合激怒法持续10w建立围绝经期干眼肝肾阴虚证模型。造模结束后,杞菊地黄汤组大鼠予以杞菊地黄汤按8.37g/(kg.d)的剂量进行灌胃,空白组和模型组大鼠按1ml/100(kg.d)灌入生理盐水,持续21d。观察并记录各组大鼠的一般情况、网屏实验评分、泪液分泌量、泪膜破裂时间、角膜荧光素染色；酶联免疫(enzyme-linkedimmunoassay, ELISA) 法检测大鼠血清促卵泡生成素(Follicle Stimulating Hormone, FSH)、雌二醇(Estradiol, E2)和孕酮(Progesterone, PROG)水平；苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠角膜、泪腺病理损伤；免疫组化染色检测大鼠角膜中炎性因子白细胞介素-1β( interleukin-1, IL-1β)、肿瘤坏死因子α( tumor necrosis factor-α, TNF-α)；结果 与假手术组对比,模型组大鼠在行为学上表现为行动迟缓、反应迟钝,易激怒,体重减轻,肛温上升(P＜0.05),网屏实验评分下降(P＜0.05),泪液分泌量减少(P＜0.05),泪膜破裂时间缩短(P＜0.05),角膜及泪腺病理损伤严重,血清性激素FSH水平升高,E2、PROG水平下降(P＜0.05),泪腺炎性因子IL-1、TNF-α表达增加；与模型组比较,杞菊地黄汤组上述各指标均显著改善。结论 从“以方测证”的中医证候角度,成功建立了围绝经期干眼肝肾阴虚证病证结合大鼠模型,为今后围绝经期干眼方证对应机制的系统深入研究提供了理论和实验依据。
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基于网络药理学与动物实验探究七味糖脉舒胶囊治疗2型糖尿病的作用机制
张云琪, 许宵钰, 车晓洋, 樊丽娟, 张 伟, 段 银, 罗 云, 孙晓波
Abstract:
目的 基于网络药理学与动物实验探究七味糖脉舒胶囊治疗2型糖尿病的作用机制。方法 利用TCMSP,ETCM等数据库查询七味糖脉舒胶囊中所有成分及其靶点；利用OMIM,Drugbank等数据库搜索2型糖尿病的靶点；通过Venny 2.1.0将2型糖尿病与七味糖脉舒胶囊成分的靶点取交集。利用Metascape网站对交集靶点进行GO与KEGG通路富集分析。建立2型糖尿病小鼠模型,设七味糖脉舒胶囊低,中,高剂量组(234,468,936 mg/kg),二甲双胍组(200 mg/kg)治疗给药干预两周,治疗前后测量小鼠体重,检测空腹血糖。给药2周后,检测空腹胰岛素；ELISA检测血清中炎症因子IL-1β,TNF-a,IL-6,TLR4,NF-kB的含量；苏木精-伊红染色观察胰岛形态,Caspase 3和INS免疫荧光检测胰岛细胞的凋亡及胰岛β细胞的数量。Western Blot实验检测胰腺组织p-Akt,Akt,p-PI3K,PI3K,Bax,Bcl-2等蛋白的表达水平。结果 共筛选出七味糖脉舒胶囊活性成分靶点1260个；2型糖尿病靶点1205个。Venny交集靶点312个,核心靶点涉及Akt1,TNF,IL6,TLR4等；富集分析确定了240条KEGG通路,其中“胰岛素抵抗”和“PI3K/Akt信号通路”是富集到的关键通路。动物实验结果显示：与模型组相比,七味糖脉舒胶囊和二甲双胍治疗型给药干预后的血糖,胰岛素抵抗均显著改善；血清中炎症因子含量降低,胰岛细胞凋亡率显著降低；胰岛β细胞数量显著增加；促凋亡蛋白Bax表达含量降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达含量明显升高,且上调了p-PI3K,p-Akt的表达。结论 七味糖脉舒胶囊可显著降低2型糖尿病小鼠血糖水平、恢复胰岛素敏感性、降低胰岛细胞凋亡,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。
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自然衰老大鼠动脉血管老化情况及黄精的干预作用
Abstract:
目的 观察大鼠在自然衰老过程中动脉血管老化情况及黄精的干预作用。方法 18月龄雄性Wistar大鼠被随机分为老年组、黄精低、中、高剂量组，每组14只；另设14只2~3月龄雄性Wistar大鼠为青年组。青年组和老年组灌胃等量蒸馏水，黄精高、中、低剂量组灌胃黄精水煎液4、2、1 g/kg，每天 1 次，持续12周。在第4、12周时，各组取7只大鼠麻醉处死，分离胸、腹主动脉。观察主动脉弓病理组织并进行平滑肌细胞（smooth muscle cells，SMC）和胶原纤维（collagen fiber，CF）相对含量的分析；检测动脉组织总抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量；采用蛋白免疫印记法检测动脉组织细胞周期相关蛋白的表达水平。结果 随周龄增加，老年组大鼠动脉血管组织各指标均无显著变化； 同周次内，老年组大鼠较青年组动脉组织SMC和CF相对含量显著升高（P＜0.01）；T-AOC、SOD、GSH-Px含量降低且MDA 含量升高（P＜0.01），细胞周期相关蛋白表达均显著上调（P＜0.01）。经黄精干预后，老年大鼠动脉组织SMC和CF 相对含量均显著降低（P＜0.05）；T-AOC、SOD、GSH-Px含量升高且MDA 含量降低（P＜0.05）；细胞周期相关蛋白表达均显著下调（P＜0.01），以黄精高剂量干预效果较好。结论 自然衰老SD大鼠动脉血管老化状态短期内较为稳定，黄精可通过调节氧化应激水平和细胞周期相关蛋白来干预动脉血管老化。
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特发性肺纤维化实验模型研究进展
Abstract:
特发性肺纤维化（Idiopathic pulmonary fibrosis, IPF）是一种以进行性肺实质瘢痕化为特征的致命性间质性肺病，终末期常因呼吸衰竭死亡，患者中位生存期仅为3～5年。实验模型是研究IPF发病机制、药物筛选及疗效评价的核心工具，除了动物模型、细胞模型，随着近年来精准医学与多组学技术的发展，中医病证结合模型及新兴类器官模型的构建也逐渐受到重视。IPF实验模型已从单一病理模拟向整合遗传异质性、微环境互作及中医“痰瘀虚损络”病机演变的多维度建模方向推进。本文系统梳理IPF实验模型的造模策略、检测指标、中医证候研究及评价体系，旨在为IPF相关研究提供参考。
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m6A甲基化修饰与氧化应激在结直肠癌小鼠癌症不同阶段中的作用研究
Abstract:
目的 本研究探讨正常和高脂饮食下结直肠癌小鼠模型Apcmin/+小鼠在癌症早期、中期、晚期m6A甲基化修饰和氧化应激水平变化对结直肠癌(Colorectal cancer, CRC)进展的影响。方法 分别给予C57BL/6J小鼠和Apcmin/+小鼠普通维持饲料和日粮型高脂饲料(60%脂肪)2周(S组)、6周(M组)、12周(L组)。干预后测量小鼠进食量、体重、小肠息肉和结肠肿瘤大小、数量和体积；免疫组化染色检测小鼠结肠组织中癌症标志物Ki-67和PCNA蛋白表达水平；试剂盒检测小鼠血清中抗氧化酶CAT、GSH和脂质过氧化物MDA的活性或浓度；RT-qPCR检测小鼠结肠组织中m6A甲基化相关酶的mRNA表达水平；试剂盒检测小鼠结肠组织中m6A甲基化修饰总水平。 结果 (1)Apcmin/+小鼠癌症早期到中期肿瘤生长迅速；癌症中期到晚期时,正常饮食下肿瘤增殖减慢,而高脂饮食促进癌症进一步发展；(2)正常饮食下Apcmin/+小鼠m6A甲基化水平降低与抗氧化能力增强可能延缓肿瘤晚期发展；(3)高脂饮食可能通过提高Apcmin/+小鼠m6A甲基化总水平促进CRC持续发展, 而此时抗氧化能力增强可能不足以抵抗m6A甲基化对CRC的促进作用。 结论 正常饮食和高脂饮食对CRC作用的不同主要是由于m6A甲基化修饰的差异。两种饮食中抗氧化能力均增强,提示机体可能在癌症进展中利用抗氧化作用启动自我保护机制。
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香烟烟雾所致小鼠慢性阻塞性肺疾病模型的构建及系统评价
张海英, 于晓, 马千惠, 李明赫, 候梦惠, 王楠, 张畅, 何旭
Abstract:
目的 通过香烟烟熏（cigarette smoke, CS）法建立小鼠慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）模型，并对该模型进行系统评价。方法 将40只BALB/c小鼠随机分为正常对照组（Control）和香烟烟雾组（CS组）。采用香烟烟熏法使CS组小鼠被动吸烟20周，建立小鼠COPD模型。通过苏木精-伊红 （hematoxylin-eosin staining，HE）和马松三色染色（masson’s trichrome stain，MASSON）观察小鼠各脏器的形态学变化及肺、心、肝、肾的纤维化程度；利用肺功能仪、小动物超声和Morris水迷宫实验评估小鼠肺功能、心功能及脑认知功能；采用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法检测小鼠肺、脑组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）的水平；采用生化方法检测小鼠的肝功能和肾功能。结果 CS组小鼠肺泡间隔变窄，部分肺泡间隔断裂，相邻肺泡腔扩大融合，符合COPD病理改变；脑组织海马区可见神经元变性、坏死；其他脏器未见明显形态学改变。MASSON染色可见CS组小鼠的肺、心、肝、肾组织均无明显纤维化。肺功能检测结果显示，与Control组小鼠相比，CS组小鼠第0.1s用力呼气量/用力肺活量（forced expiratory volume in 0.1s / forced vital capacity，FEV0.1/FVC）和肺动态顺应性（dynamic compliance，Cydn）明显降低，而气道阻力（airway resistance，RI）则显著增加。水迷宫实验证实CS组小鼠出现认知障碍。CS组小鼠的肺和脑组织中TNF-α、IL-6及IL-1β的水平均明显高于Control组。CS组小鼠的心、肝、肾功能无明显改变。结论 采用香烟烟熏20周可建立小鼠COPD模型，肺组织形态学变化、肺功能、脑认知功能及炎症因子水平可作为模型成功与否的评价指标。
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三种药物诱导特应性皮炎样小鼠模型的铁死亡初探
Abstract:
【】? 目的 利用卡泊三醇（MC903）、2,4-二硝基氯苯（DNCB）、恶唑酮（OXA）三种药物诱导BALB/c小鼠特应性皮炎（AD）样改变，并初步探索不同小鼠模型的铁死亡情况。 方法 根据不同造模部位（耳朵及背部皮肤），将健康7周龄雌性BALB/c小鼠随机分为8组，即对照耳/背组、MC903耳/背组、DNCB耳/背组、OXA耳/背组，每组8只，分别给予相应浓度药物涂抹至相应部位造模。MC903连续诱导14天；DNCB与OXA连续致敏3天，致敏完成后间隔4天，于实验第8天起，每2天于小鼠造模区域涂抹药物激发，共激发12次，于实验第30天时完成激发。观察小鼠造模后的皮损情况，测量皮肤厚度，检测血浆中ROS、IL-4、IFN-γ、MDA细胞因子，对皮肤进行病理组织学染色和电镜超微结构观察，Western blot检测铁死亡有关蛋白（GPX4、FTH1、 ACSL4、TfR1）的表达情况。结果 与对照组相比，三种药物造模后小鼠皮肤均出现明显红肿、抓挠脱屑、皮肤粗糙增厚；模型组小鼠皮肤厚度均极显著增加（P﹤0.01）；模型组小鼠ROS、IFN-γ、IL-4、MDA水平均不同程度升高（P﹤0.05）；病理结果显示模型小鼠皮损表皮增厚，表皮细胞变性、坏死、真皮层增厚且伴不同程度毛细血管淤血扩张、淋巴细胞和肥大细胞浸润等病理改变；透射电镜观察到皮肤细胞内线粒体质膜断裂，膜密度增加，膜嵴减少和断裂等铁死亡改变；铁死亡相关蛋白GPX4、FTH1表达量显著下调（P﹤0.05），ACSL4、TfR1表达量显著上调（P﹤0.05）。结论 三种药物不同造模部位均成功构建出AD样改变小鼠模型，铁死亡参与了AD样小鼠模型的病理过程，但不同药物诱导及造模部位之间存在异质性。
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不同剂量腺嘌呤诱导的肾纤维化小鼠模型的建立与评价
Abstract:
目的 比较不同剂量腺嘌呤（adenine，ADE）灌胃口服诱导的小鼠肾纤维化（Renal fibrosis，RF）模型的影响，为进一步研究RF提供更为适用的小鼠模型。 方法 30只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、ADE低剂量组（ADE-L组，50 mg/kg）和ADE高剂量组（ADE-H组，100 mg/kg），造模后观察小鼠一般状态、死亡情况、体重变化，第30天检测小鼠血清肌酐（creatinine，CREA）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）和尿酸（uric acid，UA），评估肾功能；HE、MASSON染色观察肾脏组织病理变化；蛋白免疫印迹法检测肾脏组织纤连蛋白（Fibronectin，FN）、胶原蛋白I（Collagen I，COL I）、α平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin，α-SMA）表达。 结果 ADE-L组与ADE-H组累积的存活率分别为91.7%和58.3%。ADE-L组体重与空白组无显著性差异（P＞0.05）。第3~30天ADE-H组体重显著低于空白组和ADE-L组（P＜0.01）。与空白组比较，第30天，ADE-L组肾功能CREA、BUN无显著差异，ADE-H组CREA、BUN显著升高（P＜0.01），而各组小鼠UA水平均无显著性差异。ADE-L组在第30天可观察到炎性浸润、肾小管出现扩张，伴随有小管上皮坏死，ADE-H组在可观察到显著肾小管腔和间质中出现晶体积聚，肾间质纤维化表达程度显著高于空白组（P＜0.01）。第30天，ADE-H组肾间质纤维化相关蛋白表达均显著高于空白组和ADE-L组（P＜0.01）。 结论 50 mg/kg与100 mg/kg的ADE均可成功制备RF小鼠模型，不同剂量腺嘌呤诱导可以产生不同程度肾脏损伤。ADE-L组在第30天形成轻度肾间质纤维化，ADE-H组形成中重度肾间质纤维化。
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2型糖尿病食蟹猴焦虑抑郁样行为评价研究
Abstract:
摘要 目的 评价分析2型糖尿病 (type 2 diabetes mellitus, T2DM) 食蟹猴是否存在焦虑抑郁样行为，并在此基础上探讨生化指标与焦虑抑郁样行为的相关性。方法 筛选3只空腹血糖（fasting plasma glucose, FPG）≥5.6 mmol·L-1的食蟹猴纳入T2DM组和3只FPG < 4.2 mmol·L-1食蟹猴纳入正常组。检测各组年龄、性别、体重、BMI、FPG、血脂、动脉粥样硬化指数（atherosclerosis index, AI）、TNF-α 水平；采用人类入侵者测试（human intrude test, HIT）评估食蟹猴的焦虑样行为，冷漠喂养测试（apathy feeding test, AFT）评价食蟹猴的抑郁样行为。通过Pearson分析焦虑抑郁样行为与血生化指标、炎症因子水平的关联。结果 （1）T2DM组FPG、AI、TNF-α 水平高于正常组（均P<0.05），T2DM组高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C）水平低于正常组（P<0.05）。（2）HIT实验中，T2DM组在焦虑行为-正面、笼后-正面的行为持续时长高于正常组（P<0.05）；T2DM组在运动-基线、运动-侧面、运动-背面的行为持续时间显著短于正常组（P<0.05）。（3）AFT实验中，T2DM组对食物的拿取时间显著高于正常组（P<0.05）。（4）Pearson相关分析显示：HIT实验中，笼后-正面的持续时长与AI水平呈正相关（r=0.828, P=0.042）；运动-背面的持续时长与AI水平呈负相关（r=-0.842, P=0.035）。结论 T2DM食蟹猴表现出焦虑抑郁样行为，AI与焦虑样行为密切相关，为 T2DM与焦虑抑郁行为的关联机制研究提供新的证据。
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衰老与特发性肺纤维化的相关性及关联的分子机制
Abstract:
目的 探讨衰老与特发性肺纤维化(IPF)的相关性,挖掘二者关联的潜在分子机制。方法 构建青年(2月龄)和老年(18月龄)C57BL/6J小鼠IPF模型,分别随机分为青年对照组(Ctrl-Y)、青年模型组(IPF-Y)、老年对照组(Ctrl-A)和老年模型组(IPF-A)。采用HE和Masson染色评估组织病理改变,免疫组化检测COL1A1、α-SMA及FN表达水平,SA-β-Gal染色评估衰老程度。基于全转录组测序筛选差异基因,进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,并经qRT-PCR验证核心基因表达。结果 IPF-A组纤维化评分均显著高于IPF-Y组(P<0.05)。IPF-A组COL1A1、α-SMA和FN蛋白表达较IPF-Y组分别显著增加16 %、36 %和25 %(均P<0.05),且SA-β-Gal衰老阳性面积显著高于IPF-Y组。鉴定出55个衰老-IPF交互基因,其中Cdkn1a、MMP3、Pdcd1等在IPF-A组协同上调(P<0.05)。KEGG分析显示ECM-receptor interaction、Phagosome、Cytokine-cytokine receptor interaction、Efferocytosis和PI3K-Akt等信号通路激活(FDR<0.05)。结论 衰老会促使IPF进展,IPF会诱发肺组织衰老,其机制可能与免疫衰老、炎症累积及代谢紊乱驱动的ECM重构相关。
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脂肪源外泌体在小鼠脂肪代谢中的作用与机制研究进展
Abstract:
脂肪源外泌体作为细胞间通讯的重要媒介，近年来在脂肪代谢调控中的作用逐渐成为研究热点。脂肪代谢与能量平衡及多种代谢性疾病（如肥胖、糖尿病、心血管疾病）密切相关。脂肪源外泌体通过调节脂肪细胞的分泌功能、能量代谢途径，并在脂肪组织与其他器官间传递信号，可能在维持代谢稳态中发挥重要作用。它们在胰岛素抵抗和脂肪沉积调节中尤为关键，且在代谢疾病的发生发展中起到重要作用。尽管已有大量研究探讨脂肪源外泌体的潜在机制，但其在不同生理和病理状态下的具体作用尚不明确。本文综述了脂肪源外泌体在脂肪代谢性疾病中的研究进展，重点探讨其在脂肪细胞功能、能量代谢及代谢性疾病发生中的潜在机制。这些研究为未来的基础研究与代谢性疾病干预策略提供了新的视角和思路。
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不同方式诱导的干眼小鼠模型差异研究
Abstract:
目的比较苯扎氯氨溶液滴眼、氢溴酸东莨菪碱皮下注射、苯扎氯氨溶液滴眼联合干燥箱培养及单纯干燥箱培养四种方式诱导小鼠干眼模型的异同。方法采用随机数表法将50只SPF级C57BL/6J小鼠分为4组。正常组小鼠不予以任何干预；东莨菪碱组小鼠每日采用氢溴酸东莨菪碱溶液皮下注射；苯扎氯氨组小鼠每日予以苯扎氯氨溶液滴眼；干燥箱组小鼠置于干燥环境的可控干燥系统中饲养；苯扎氯氨联合干燥箱组小鼠每日予以苯扎氯氨溶液滴眼并置于可控干燥系统中饲养。造模前、造模后观测并记录各组小鼠的体质量、肛温、行为学变化、基础泪液分泌试验(SIT)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(FLS)、HE染色观察小鼠角膜泪腺形态；TUNEL染色检测角膜及泪腺组织细胞凋亡情况；RT-qPCR法检测小鼠泪腺中NF-kB、IL-1β、TNF-α等炎症因子表达情况。结果与正常组相比,苯扎氯氨组在造模后SIT试验和BUT有明显降低(P<0.01),小鼠体温升高(P<0.01),体质量减轻,细胞凋亡数量增多,炎症因子含量升高(P<0.01)；与正常组相比,东莨菪碱组造模后,SIT试验和BUT有明显降低(P<0.01),小鼠呈现高度紧张焦躁状态,且全身干燥症状明显,毛发干枯、大便少而干燥,矿场实验得分升高(P<0.01),高架十字迷宫实验中OE%和OT%值降低(P<0.01),炎症因子含量升高(P<0.05)；与正常组相比,苯扎氯氨联合干燥箱组在造模后体重增加量减少,体温升高(P<0.01),SIT试验和BUT有显著差异(P<0.01),角膜损伤严重,泪液分泌显著减少,炎症因子含量升高(P<0.01)；干燥箱组造模后,各项指标与正常组相比,差异小。结论 苯扎氯氨溶液滴眼、东莨菪碱皮下注射及苯扎氯氨联合干燥箱培养三种方式均可诱导小鼠干眼模型,单纯干燥箱培养28d差异无统计学意义,诱导小鼠干眼模型效果不明显。东莨菪碱法诱导的干眼小鼠模型全身干燥症状较眼表症状更重,更适合干燥综合征模型的构建；苯扎氯氨溶液滴眼联合干燥箱培养法诱发的小鼠干眼模型更为稳定、持久,干眼眼表临床症状典型,操作可行性高且重复性好,是干眼教学、临床与科研实验较为理想的干眼动物模型复制方法。
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小鼠骨髓衰老的功能特征分析和主要靶点发掘
Abstract:
目的 本研究旨在建立一种基于RNA测序阐明衰老过程中小鼠骨髓组织参与主要功能活动和细胞过程的特征性变化的研究方案，发掘用于衰老预测和干预的代表性潜在靶点。方法 提取来自2月龄、10月龄和18月龄的各三只C57BL/6J雄鼠双侧胫骨和股骨的骨髓细胞，经过红细胞裂解处理后提取RNA用于RNA测序分析。结果 基因表达量和Venn分析的结果显示2月龄到10月龄基因的表达变化以下调为主，10月龄到18月龄则以上调为主，在小鼠成熟发育的过程中基因表达经历了由下调为主向上调为主的变化。通过京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）的功能和富集分析以及基因集富集分析（Gene Set Enrichment Analysis, GSEA）关注到的不同年龄阶段小鼠骨髓组织在“免疫系统”、“发育和再生”、“运输和分解代谢”、“细胞生长和死亡”等通路存在显著的表达差异，其中在炎症反应、细胞骨架连接以及DNA损伤修复相关的通路中调控水平持续上调，而在造血功能维持方面则表现不断下调的趋势，同时在免疫调节功能方面表现出波动性变化的特征。通过富集通路筛选出的差异表达上调的基因Bmpr1a和 Inhba之间、差异下调的Dntt和Ccnd1之间以及Col1a1、Col1a2、Fcgr1、Fyn, Lgmn、Ctsl、Ctsk、Ctss、Gnail、Myl4和Ccr5之间分别建立的蛋白互作图谱均存在连接和相互作用关系。结论 研究提供了不同年龄阶段骨髓组织转录水平基因表达变化的数据,为探究小鼠衰老中骨髓组织发生的主要特征性变化提供研究策略，发掘揭示衰老相关基因和信号通路，为延缓衰老和预防衰老相关疾病提供新的策略。
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基于尾静脉高压注射-转座子介导的原发性小鼠肝癌模型方法及其应用进展
Abstract:
小鼠因其基因组与人类高度相似、繁殖能力强、模型构建成本低以及易于基因操作等优势,被广泛应用于原发性肝癌的研究中,包括发病的分子机制和潜在的药物靶点等方面。传统动物模型因无法复现肿瘤微环境互作、控制分子亚型特异性等缺陷,日益难以满足精准医学研究需求。本文系统比较尾静脉高压注射联合转座子系统(HTVI-TS)的技术与传统模型在肝癌研究中的技术优势,并重点探讨HTVI-TS模型在肿瘤发生发展机制研究、免疫治疗响应预测、靶向药物个体化评估中的应用价值,揭示其通过模拟肝癌异质性进化过程为精准诊疗提供的全新研究平台。本文为优化肝癌临床前研究模型选择提供理论依据,并展望该技术在肝癌研究中的拓展潜力。
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化疗药物诱导的胃肠黏膜损伤动物模型研究进展
Abstract:
在全球癌症发病率逐年增加背景下，化疗药物诱导的胃肠黏膜损伤已成为影响患者治疗预后的重要因素，且缺乏有效治疗药物。因此，亟需建立更加理想的化疗药物诱导的胃肠黏膜损伤动物模型，以研究其发病机制，开发相关治疗药物。本文对2019-2024年期间发表的相关文献进行综述，从实验动物的选择、化疗药物及造模方式、模型评价指标及应用等方面进行总结分析，并提出当前模型存在的问题：缺乏统一标准的造模方法、缺少肿瘤背景的模型研究、新型细胞死亡机制的研究尚浅。此外整理文献后发现中医药治疗逐渐成为研究热点，在治疗胃肠黏膜损伤中展现出潜力，未来应继续挖掘有效药物，以丰富化疗后胃肠黏膜损伤的干预治疗手段。
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生物医学检测犬在人类与动植物疾病筛查领域的应用研究综述
Abstract:
生物医学检测犬（biomedical?detection?dog，BMDD）能够依靠灵敏的嗅觉对病变产生的挥发性有机化合物（volatile?organic?compounds，VOCs）进行判断并据此对人类与动植物的各类疾病进行筛查。目前国内对这一领域研究较少，为弥补这一不足，丰富生物医学检测技术，对生物医学检测犬在这些疾病筛查领域的应用研究进行了梳理与分析，探讨其背后的科学依据、应用现状、要点及未来发展趋势并加以综述。研究显示，生物医学检测犬在人类癌症、传染病、代谢病等多种疾病，畜牧动物、野生动物疾病以及植物病虫害筛查领域具有较大的发展空间与应用潜力，有望在未来展现出更显著的经济价值和社会效益。
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放射性心脏病动物模型研究进展
Abstract:
放射性心脏病（Radiation-Induced Heart Disease, RIHD）是胸部肿瘤患者放射治疗后的一种严重并发症，对接受放射治疗的癌症患者的远期生存造成明显的影响。RIHD的发病机制研究及开发有效的治疗药物是亟待解决的问题，而建立优质的RIHD动物模型是解决这一问题的关键。本文综述了RIHD模型构建的关键因素，包括动物种类选择、射线类型、照射剂量、照射次数、辐射部位和造模时间，以及模型评估方法与成模标准；同时立足DNA损伤、氧化应激、炎症反应、线粒体损伤、RAAS系统激活、心肌纤维化等机制总结了RIHD的潜在的发病机制及各机制之间内在关系，为构建RIHD动物模型及RIHD的机制研究提供了参考依据。
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咪喹莫特诱导银屑病动物模型的应用现状与展望
Abstract:
银屑病(Psoriasis)作为一种在全球范围内广泛流行的慢性炎症性皮肤病,以表皮过度增生、异常角化以及免疫细胞浸润为主要特征,对患者的生活质量和心理健康造成显著负面影响。该病的发生与遗传易感性、免疫失调以及环境因素紧密相关。尽管目前在银屑病发病机制的研究上已取得了重要进展,但现有的治疗手段仍存在疗效有限和副作用明显等问题,因此深入剖析其病理网络并开发新型干预策略迫在眉睫。在此背景下,咪喹莫特(Imiquimod)诱导的银屑病动物模型凭借其高度的可重复性和良好的病理模拟性,成为研究银屑病的关键工具。本综述系统梳理了咪喹莫特诱导银屑病模型的核心作用机制,详细阐述了其通过核心免疫炎症轴的级联反应、下游协同机制的多元调控网络以及宿主与环境因素的交互作用等途径发挥作用的分子基础；基于该模型的研究已成功验证了多种靶向疗法和天然产物对银屑病的治疗效果,充分彰显了其在治疗干预研究中的重要应用价值；此外,对咪喹莫特诱发银屑病模型存在的局限性进行了探讨,并对其未来的研究方向进行了展望,以期为银屑病的深入研究和治疗提供参考。
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斑马鱼模型在炎症性肠病中的应用及研究进展
徐丽艳, 李方珍, 王宇欣, 靳梦, 张云, 刘可春, 王荣春
Abstract:
炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病，克罗恩病（crohn’s disease，CD）和溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是其中两大主要疾病。炎症性肠病容易反复发作，其发病机制与免疫功能失调、肠道微环境稳态失衡、饮食、环境或遗传等多种因素有关。目前，其具体发病机制仍不明确。斑马鱼（Danio rerio，zebrafish）作为一种新兴的模式动物，由于其独特的生物学优势，近年来被广泛应用于炎症性肠病的机制研究、模型构建及抗炎症性肠病化合物的活性评价和筛选研究。本文综合近年来国内外斑马鱼在炎症性肠病领域的最新研究进展，系统介绍了斑马鱼肠道发育特点、组织结构、肠道免疫、炎症性肠病模型及其在药物筛选中的应用，以展现斑马鱼在炎症性肠病研究中的应用价值。
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基于数据挖掘的抑郁共病动物模型分析
Abstract:
目的 了解抑郁共病动物实验研究现状,提供相关抑郁共病动物模型制备和评价方法。方法 检索中国知网和PubMed数据库,收集抑郁共病动物研究文献,总结并分析动物种类、共病类型、造模方式、模型评价指标等数据。结果 本研究共纳入了100篇中文文献和143篇英文文献。从2011年起,国内外论文发表的总数量呈上升趋势,论文发表数量前三的共病模型是抑郁-疼痛(97, 39.91%)、抑郁-癫痫(37, 15.23%)和抑郁-糖尿病(20, 8.23%)。抑郁-神经性疼痛模型是最常见的抑郁疼痛共病类型,其最常用制备方法是坐骨神经分支选择性损伤模型,多选用C57BL/6J小鼠。抑郁-急性癫痫模型是最常见的抑郁癫痫共病类型,其最常用的制备方法是氯化锂-匹罗卡品模型,多选用SD大鼠。抑郁-糖尿病模型最常用的制备方法是腹腔注射链脲佐菌素,多选用C57BL/6J小鼠。最终,系统性总结了以上共病模型的评价方法。结论 学者们对抑郁共病动物实验研究的关注日益增多。只有少数抑郁共病动物模型制备和评价方法逐渐趋于成熟,绝大多数抑郁共病动物实验研究还处于萌芽阶段,需要投入更多的时间和精力进行探索。
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不同性别CUMS模型大鼠的肠道菌群差异与抑郁症发病关系
朱抗洪, 高雨萌, 黄梦雪, 杨柳, 高子瞻, 储浩, 邓楠, 胡 玲, 吴子建
Abstract:
目的：观察慢性不可预测性温和刺激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）致抑郁模型大鼠的肠道菌群在不同性别中的表现，为探讨抑郁症发病的性别差异提供实验依据。方法：32只健康SD大鼠根据不同性别随机分组，分别为雄性空白组、雄性模型组、雌性空白组和雌性模型组，共4组，每组8只；空白组不采取任何刺激方法进行普通饲养，模型组采用28天CUMS致郁方法进行模型复制，模型制备成功后采集所有大鼠的新鲜粪便，进行16SrRNA高通量测序；制备模型前后均采用行为学观察。结果：在蔗糖偏嗜实验、旷场实验和强迫游泳实验中，空白组与模型组存在统计学差异；蔗糖偏嗜实验显示，模型大鼠存在性别差异，而旷场实验和强迫游泳实验未呈现性别差异。肠道菌群类属分析表明，与空白组对比，模型组alpha与beta多样性均呈现上升趋势；模型组雄性大鼠厚壁菌门/拟杆菌门比值、罗氏菌属、毛螺菌科-NK4A136 组丰富度下降，而雌性呈上升趋势。结论：肠道菌群中不同性别的厚壁菌门/拟杆菌门比值可能是抑郁症发病的关键因素，罗氏菌属、毛螺菌科-NK4A136组可能成为纠正肠道菌群改善抑郁症症状的潜在因素。
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丁香酚联合中医五行音乐疗愈调节肠-脑-皮肤轴改善特应性皮炎症状及引起的焦虑抑郁样行为
Abstract:
目的：本研究旨在探索丁香酚联合中医五行音乐疗愈对2,4-二硝基氟苯（2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB）诱导的特应性皮炎小鼠模型的皮肤炎症、行为学特征、神经递质与激素水平及肠道菌群的改善。方法：通过连续21 d 使用 DNFB 诱导建立小鼠 AD 模型，期间记录小鼠背部皮损变化及瘙痒次数。第 19 d、20 d 进行旷场实验、高架0迷宫实验、悬尾实验和强迫游泳实验。第 21 d 处死并解剖小鼠，计算脏器指数。同时，采用ELISA法测定血清中 IgE、IL-4和IL-10 水平，取背部皮肤切片进行 HE 染色、甲苯胺蓝染色观察皮肤病理变化，测量小鼠脑中皮质酮、多巴胺和5-羟色胺水平。此外，采用 16S rRNA基因测序分析小鼠肠道菌群组成。结果：与 DNFB 诱导的 AD 小鼠相比，丁香酚联合中医五行音乐疗愈（EUG+MUSIC）组显著降低了皮损评分，减少了皮肤炎性细胞浸润。在行为学测试中，EUG+MUSIC 组小鼠表现出更活跃的运动状态，增加了对陌生环境的探索欲望，同时增加了在压力情境下的挣扎时间。神经递质与激素检测结果显示，该联合疗法提高了小鼠脑内5-羟色胺、多巴胺和皮质酮的水平。此外，16S rRNA 基因测序结果显示，DNFB 诱导的AD小鼠肠道菌群多样性发生变化，而 EUG+MUSIC 重塑了肠道微生物组成，某些肠道微生物如利基乳酸菌属(Ligilactobacillus)和毛螺菌属(Lachnospiraceae)的相对丰度增加，而副拟杆菌属(Parabacteroides)和拟杆菌属(Bacteroides)的相对丰度减少。Spearman 相关性分析发现，改变的肠道微生物群、AD 相关的皮肤表现和共病产生的焦虑抑郁样行为之间存在显著的相关性。结论：丁香酚联合中医五行音乐疗愈通过调节AD小鼠肠道菌群、改善行为学表现，对共病焦虑和抑郁样行为产生了积极影响，为AD及其焦虑抑郁样行为的改善提供了新的思路和方法。
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流感风热证小鼠模型的建立方法与优化
Abstract:
【】 目的 以气候法叠加流感病毒滴鼻,筛选建立甲型 H1N1 流感风热证小鼠模型。方法?将72只BALB/C小鼠随机分为9组,对照组(Control组),风热组(FR-3Day组、FR-5Day组),模型组(1LD-3Day组、2LD-3Day组、3LD-3Day组、1LD-5Day组、2LD-5Day组、3LD-5Day组,每组8只。对照组正常环境饲养,风热组和模型组风热条件干预7天后,第8天进行PR8流感病毒滴鼻感染,对照组、风热组小鼠使用等量生理盐水滴鼻。攻毒后各组均在正常环境下饲养,并分别在第3、5天取材。观察记录小鼠外观及行为状态以及大便、体温,检测各组小鼠肺指数、血常规、肺部组织病理、血清IL-6水平及病毒滴度。结果 与对照组对比,FR组小鼠风热干预7天后,外观、大便、体温、血常规及肺组织病理均无明显异常；Model组与各组对比,随着攻毒量的增加及时间的延长,小鼠外观、肺指数、RBC、HGB、HCT、病理结果、体温各指标进行性加重；同一攻毒量时,NEUTP、LYMPHP、病毒滴度、血清中IL-6严重程度在攻毒后第3天达到顶峰,攻毒后第5天略有减轻。结论 风热气候干预7天后予PR8滴鼻攻毒制备流感风热证小鼠模型具有可行性。
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高原缺氧环境大鼠深静脉血栓模型的建立与思考
邓鑫凯, 李啸, 高家威, 柴雅豪, 吴家林, 李国祥, 韩小丽, 韩红伟, 赵胤杰, 刘志学, 张雷, 杨曦, 敖其, 韩小博
Abstract:
［］ 目的：建立高原低压缺氧环境大鼠静脉血栓模型,同时探讨高原缺氧环境对高原静脉血栓形成的影响。方法：雄性健康 SD 大鼠144只,随机分组,每组36只。为平原假手术组(A组,n=36)、平原手术组(B组,n=36)、高原海拔6000m+假手术组(C组,n=36)；高原海拔6000m手术组(D组,n=36)。A组和B组置于平原常氧环境,C组和D组置入高原环境；手术组采用“定量缩窄”,不全性阻断下腔静脉血流；每组再按照时间点分为1d,3d,5d,7d,14d,21d亚组(n=6),定时监测血管超声；取血进行全血粘度检测；炎症指标：ET-1、TAT、IL-6检测；凝血功能：APTT、PT、D二聚体、TAT检测,观察期结束后处死实验动物后取下肢血栓HE染色和测量血栓湿重。结果：高原D组的血栓形成显著高于B组,且伴随血液粘稠度和红细胞压积的显著增加(P<0.01),内皮素-1、白介素-6和组织因子的水平也显著升高(P<0.05)；凝血功能紊乱。结论：下腔静脉不全性定量缩窄结合特殊环境舱模拟高原缺氧环境可以成功构建模型,研究提示高原缺氧环境促进静脉血栓形成。
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Srebp-1基因促进WSHc大鼠非酒精性脂肪肝形成
张中华, 张倩, 吕涛, 丁月, 方明笋, 蔡月琴, 凌云, 张利棕
Abstract:
目的 通过高脂饮食诱导Wistar-SD高脂血症易感(WSHc)大鼠建立非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型,从Srebp-1基因揭示该大鼠NAFLD的发病机制。 方法 取30只6周龄的 WSHc 大鼠,高脂饲喂2周后,分为高脂对照组、高脂+AAV空载组、高脂+AAV组,每组10只。高脂+AAV空载组、高脂+AAV组分别于门静注射不含病毒的载体和含shRNA(short hairpin RNA)病毒的载体。另取 10 只同周龄的WSHc大鼠饲喂正常饲料作为对照。每两周检测血清ALT、AST、TBIL、ALP、TBA、GLU、CHOL和TG水平。继续饲喂8周后处死动物,取肝脏行HE、油红“O”染色、Masson和天狼星红染色,观察各组大鼠肝组织形态、脂质沉积和纤维化情况。利用RT-PCR检测肝Srebp-1、Aacs、FASN、LDLR等脂质代谢相关基因的表达；分离培养WSHc大鼠肝细胞,分为空白对照组和高脂对照组,RT-PCR检测Srebp-1基因表达；并构建Srebp-1 KO组,检测肝细胞TG含量,油红“O”染色观察脂肪聚集。 结果 高脂饲喂10周后,WSHc大鼠血清ALT(P＜0.001),ALP(P＜0.001), TBA(P＜0.05),GLU(P＜0.001),CHOL(P＜0.001)显著升高,肝脂质异常沉积形成大泡性脂滴并见纤维化病变,Srebp-1表达水平显著升高(P＜0.001)；与高脂组WSHc大鼠相比,WHSc＋AAV组ALT(P＜0.05),GLU(P＜0.01)降低,肝脂质沉积情况减轻,视野下未见大泡性脂滴,FASN(P＜0.05),LDLR(P＜0.01)等基因表达明显升高。此外,高脂对照组肝细胞Srebp-1表达明显升高(P＜0.001)；Srebp-1基因敲除以后,细胞TG降低,且脂滴聚集程度减轻。 结论 WSHc大鼠NAFLD模型肝Srebp-1基因能影响血脂代谢和肝脂质沉积,还能调控肝脂代谢相关基因的表达；体外实验表明,Srebp-1低表达可减轻肝细胞脂毒性损伤,这表明WSHc大鼠NAFLD形成与Srebp-1基因异常高表达密切相关。
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调和阴阳针刀对膝骨关节炎大鼠关节功能及下肢力学的影响
Abstract:
目的 观察调和阴阳针刀干预对膝骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）模型大鼠膝关节功能及下肢力学的影响，探讨针刀治疗KOA的效应机制。方法 将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刀组和药物组。除空白组外均于左侧膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶与0.03 mol/L L-半胱氨酸混合溶液建立KOA模型。大鼠采用调和阴阳针刀法，在内、外侧副韧带及髌韧带进行操作，药物组大鼠每日通过灌胃方式连续给予塞来昔布（10 mg/kg·d）。针刀组与药物组大鼠分别在造模后第7天进行干预，每周1次，持续4周。所有大鼠干预前及干预结束1周后参照改良Lequesne MG膝关节级别评估法评分并完成转棒疲劳试验。干预结束1周后进行活体DR检查膝关节腔隙，经HE、番红固绿染色观察软骨细胞形态，行韧带力学拉伸测试，分别取血清、软骨组织采用ELISA、WB法检测基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）蛋白表达。结果 ①与空白组相比，模型组大鼠改良Lequesne MG的膝关节级别评分增高，转棒疲劳试验时长下降，关节腔隙减小（P＜0.01）；②与模型组、药物组相比，针刀组大鼠改良Lequesne MG的膝关节级别评分降低，转棒疲劳试验时长上升（P＜0.05），膝关节的关节腔间隙增大（P＜0.05）；③针刀组大鼠韧带弹性模量与模型组相比无显著差异，与药物组相比增高。与模型组、药物组相比，针刀组大鼠屈服强度、最大应变、屈强比增高（P＜0.05）；④HE+番红固绿染色显示与模型组相比，针刀组仅有少量炎细胞浸润；与药物组相比，针刀组大鼠软骨表面较为平整，仅有轻微不连续。⑤ELISA检测与模型组相比，针刀组大鼠血清MMP-13含量下降（P＜0.01）；药物组和针刀组大鼠血清MMP-13无明显差异。⑥与模型组相比，针刀组大鼠软骨MMP-13含量显著降低（P＜0.01）；与药物组相比，针刀组大鼠含量下降（P＜0.05）。结论 针刀干预可以提升KOA模型大鼠膝关节稳定性，改善下肢力学结构，减少MMP-13表达。
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小鼠脑图谱及其分析技术应用研究进展
Abstract:
小鼠作为神经科学研究中的核心模式生物，其全脑图谱构建正经历由传统解剖学向多维分子层面解析的技术跃迁，标志着脑科学研究方法正迈向更高分辨率与系统性的新阶段。空间转录组学技术突破显著提升脑科学研究的生物学内涵，为神经环路动态演变及脑细胞多样性提供新范式。应用传统解剖学定位、分子连接组学单细胞解析及功能成像宏观动态追踪，脑图谱研究实现“分子-环路-行为”三级整合，构建了神经环路动态重塑的分子调控网络。但当前仍然面临技术整合挑战。脑参考图谱在脑稳态机制解析、神经疾病（如焦虑症）异常环路代谢特征定位及药物靶点筛选等方面具有重要应用前景。未来脑图谱的研究需推动多模态技术融合与跨维度数据整合，实现从静态结构到动态功能网络的精准解析，为神经科学研究提供革命性工具。
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不同浓度柯萨奇病毒B组3型诱导幼龄大鼠感染模型的组织与免疫病理研究
张卓, 刘学武, 陈相池, 肖洒, 杨柳, 姜德建, 彭冬冬
Abstract:
目的 探究不同浓度柯萨奇病毒B组3型(Coxsackievirus B3,CVB3)诱导幼龄SD大鼠体内感染模型,考察病毒在宿主组织分布、免疫系统对病毒应答以及炎症因子的反应情况,有助于了解病毒感染的免疫病理机制,为药物筛选和疗效评价提供实验依据。方法 选用10日龄幼龄SD大鼠经腹腔注射感染不同剂量的CVB3(TCID50=10-3.34/100 μL),分别于造模后D3、D7采用流式细胞检测全血中淋巴细胞亚群比例(CD4+、CD8+),利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测心、肝、脾、脑、肾及胃肠道等组织CVB3载量,采用大鼠ELISA试剂盒检测组织中TNF-α、IFN-γ水平,并采用HE染色观察组织形态学变化。结果 幼龄SD大鼠经腹腔注射感染不同剂量的CVB3,各组幼龄大鼠出现不同程度的腹泻,且体质量均显著减轻；CVB3未分布在幼龄大鼠心、肝、脾、脑、肾组织,但在胃、小肠、大肠组织有一定的分布定植,其中在大肠组织分布最高,原液组幼龄大鼠全血中CD8+T比例增加和CD4+/CD8+淋巴细胞比值减少(P＜0.05,P＜0.01),可见原液组幼龄大鼠大肠组织中TNF-α高表达和IFN-γ低表达(P＜0.05,P＜0.01),且可见大肠组织(盲肠、直肠)粘膜下层水肿及炎症细胞浸润,而10-1组、10-2组、10-3组幼龄大鼠全血中淋巴细胞亚群比例、TNF-α、IFN-γ含量及形态学变化与正常组比较均无明显差异(P＞0.05)。结论 不同剂量的CVB3诱导幼龄SD大鼠感染模型,其中原液CVB3可引起幼龄大鼠大肠(盲肠、直肠)病理损伤、病毒大量复制、炎性因子水平及免疫细胞失调,但未引起心脏、肝脏、肾脏、肺脏、脑组织病变,提示CVB3病毒对幼龄大鼠的特异性致病机制,揭示在未来研究中应更加关注病毒与宿主之间的相互作用以及病毒的靶向性。
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基于ASM/ER stress探究养脉通络方治疗Hcy诱导微循环障碍的作用机制
熊胜涛, 廖玮嫣, 赵倩, 宣悦, 陈泽屿, 李东霖, 王萧, 陈扬
Abstract:
【】 目的 探讨养脉通络方通过调节酸性鞘磷脂酶(ASM)及内质网应激(ER stress)通路改善高同型半胱氨酸(Hcy)诱导的微循环障碍的作用机制。 方法 将50只C57/6J雄性小鼠随机分为对照组、Hcy模型组、养脉通络方低/高剂量组(5.3、10.4 g/kg)及叶酸组(0.08 g/kg)。除对照组外,其余小鼠通过饮用含1.8 g/L Hcy的水6周诱导微循环障碍模型,并于造模2周后灌胃给药,持续4周。检测血清Hcy浓度、下肢微血管血流灌注量,并采用免疫荧光法分析心脏微血管内皮ZO-1、ZO-2、ICAM-1、VCAM-1、ASM、GRP78及CHOP蛋白表达。 结果 与对照组相比,Hcy模型组血清Hcy水平显著升高(P < 0.05)。与Hcy模型组相比,养脉通络方组未显著降低Hcy水平,但高剂量组显著增加下肢血流灌注量(P < 0.01),并恢复心脏微血管内皮的ZO-1、ZO-2表达(P < 0.001),同时抑制ICAM-1、VCAM-1、ASM、GRP78及CHOP表达(P < 0.05),效果与叶酸组相当。 结论 养脉通络方通过抑制ASM活性、减轻内质网应激,改善Hcy诱导的微循环障碍及内皮功能损伤,其作用机制与调控内皮炎症及屏障稳定性密切相关,为中医药治疗微血管疾病提供了实验依据。
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基于A53T转基因小鼠注射α-突触核蛋白纤维加速建立帕金森病模型
Abstract:
目的 通过在A53T转基因小鼠脑内注射α-突触核蛋白预形成纤维(α-syn PFF),促进帕金森病病理改变的快速出现,从而加快帕金森病小鼠模型的建立。方法 选择C57BL/6J背景的α-Syn A53T转基因小鼠作为模型组,同系C57小鼠为对照组,通过脑立体定位技术将α-syn PFF注射至小鼠双侧纹状体内。造模后,通过旷场实验评估小鼠的自主活动能力和焦虑行为；转棒、抓力及爬杆实验测定其运动协调性和四肢肌张力；埋藏食物实验评价小鼠的嗅觉功能；通过免疫组织化学染色法探究小鼠脑内炎症和α-syn病理发生。结果 与对照组比较,模型组小鼠α-syn PFF脑内注射后1月旷场实验中运动距离增加；转棒、抓力与爬杆实验无统计学差异；埋藏食物实验中寻找食物时间增加。造模后2月模型组旷场实验中运动距离减少；转棒、抓力与爬杆实验中运动协调能力以及肌张力减弱；埋藏食物实验中寻找食物时间增加。模型组小鼠黑质、皮层、海马体的磷酸化α-synuclein增加；小胶质细胞增加,路易小体沉积；黑质多巴胺能神经元显著减少。结论 A53T小鼠脑内注射α-syn PFF后更快出现嗅觉功能受损及运动功能障碍；并产生明显的病理改变,表现为α-synuclein/LBs于黑质、皮层、海马体聚集,黑质多巴胺能神经元丢失。可作为一种快速建立的α-突触核蛋白相关帕金森病的动物模型。
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番泻叶灌胃联合慢性束缚应激诱导腹泻型肠易激综合征小鼠模型的研究
李艳秋, 何悦, 侯雨君, 罗芳丽, 鄢香芸, 李瑛, 周思远
Abstract:
目的 对比不同浓度的番泻叶灌胃联合慢性束缚应激法构建的腹泻型肠易激综合征（（Diarrhea-Predominant Irritable Bowel Syndrome，IBS-D）小鼠模型差异性，以确定适宜的番泻叶灌胃浓度。 方法 根据相关研究中构建IBS-D小鼠模型使用的番泻叶灌胃浓度，制定浓度梯度，并开展实验。雌性C57BL/6小鼠随机分成空白组（N组）、低剂量组（0.25 g/mL番泻叶，L组）、中剂量组（0.50 g/mL番泻叶，M组）和高剂量组（1.0 g/mL番泻叶，H组），每组10只。连续造模14 d后，观察并记录各组小鼠排便情况、腹泻指数、内脏敏感性及结肠组织形态学变化，比较不同番泻叶浓度构建的模型差异。 结果 与N组小鼠（42.9%±12%）相比，L组（80.3%±5.8%）、M组（80.5%±3.4%）、H组小鼠（81.9%±2.7%）的6 h粪便含水率显著增加（P＜0.01）；与N组小鼠（0.00±0.00）相比，L组（0.57±0.16）、M组（0.62±0.23）、H组小鼠（0.60±0.23）的腹泻指数也均显著增加（P＜0.01）。与N组小鼠（0.65(0.60, 0.65)）相比，M组（0.32(0.24, 0.39)）和H组小鼠（0.34(0.27, 0.47)）的最小内脏痛阈值显著降低，内脏敏感性增高（P＜0.05）。此外，M组小鼠首粒蓝便时间(（98.15(93.41, 100.44)）min)较N组(（186.81(109.28, 192.05)）min)显著缩短（P＜0.01）且M组的6 h粪便总粒数（22.4±3.73）也较N组小鼠（17.90±4.48）相比明显增加（P＜0.05）。 结论 与0.25 g/mL和1.0 g/mL相比，0.50 g/mL浓度的番泻叶灌胃联合慢性束缚应激能更好的模拟IBS-D的临床症状。
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基于CORT-BDNF-ERK1/2信号级联介导的海马损伤探讨舒郁胶囊对慢性温和应激大鼠子代的作用机制
张媛媛, 周苗苗, 徐凯勇, 刘彦锋, 张浩, 吴丽丹, 郑智勇, 陈凯, 李园, 吕世盟, 李自发
Abstract:
【摘要】目的 以孕前慢性温和应激方式（CMS）模拟现代社会应激，通过CORT-BDNF-ERK1/2信号级联介导的海马损伤探讨孕前肝气郁结母鼠所产雄性子代情绪、行为、神经发育改变的机制，阐释母代遭受生活负性事件对后代的影响及舒郁胶囊的干预机制。 方法 采用CMS应激诱导母鼠孕前抑郁情绪反应（肝气郁结状态），予以舒郁胶囊及氟西汀胶囊干预，经筛选后与雄性大鼠交配，每组各挑选12只雄性子代，对其进行行为学测试及采用ELISA检测各组雄性子代大鼠血清CORT含量；WB检测海马BDNF、ERK1/2、p-ERK1/2、CREB、p-CREB蛋白含量；RT-PCR检测海马BDNF mRNA、ERK1 mRNA、ERK2 mRNA、CREB mRNA表达；验证孕前CMS对子代BDNF-ERK1/2-CREB信号通路的影响，及舒郁胶囊干预母鼠孕前肝气郁结证对其所产雄性子代情绪和学习记忆相关行为的关键微观机制。 结果 母鼠孕前肝气郁结证所产雄性子代大鼠行为评价及机制探索实验结果。行为学检测结果显示：模型组子代旷场实验中央区路程、中央区进入次数及中央区停留时间显著降低（p<0.05，p<0.05，p<0.05）；水迷宫实验探索期逃避潜伏期显著延长（p<0.05），游泳路程、目标象限持续时间、平台穿越次数减少（p<0.05，p<0.05，p<0.01）；强迫游泳实验悬浮不动时间及次数增加（p<0.05，p<0.01），潜伏期缩短（p<0.05）。经舒郁胶囊及氟西汀预防性给药治疗后，模型组子代抑郁样行为及认知受损得到改善和纠正。生化检测结果显示：CMS模型组子代皮质酮含量升高（p<0.05）；子代海马BDNF、p-ERK1/2、p-CREB蛋白含量下降（p<0.05，p<0.05，p<0.05），BDNF mRNA、ERK1 mRNA、ERK2 mRNA、CREB mRNA表达均显著降低（p<0.01，p<0.05，p<0.01，p<0.05)。经舒郁胶囊及氟西汀干预治疗后的母鼠雄性子代CORT含量、BDNF、ERK1/2、CREB蛋白及mRNA表达结果显示出不同程度的增高趋势。结论 子代高水平CORT会选择性作用于海马，通过下调BDNF-ERK1/2信号级联对大鼠情绪及学习记忆功能产生不利影响。中药舒郁胶囊可通过纠正糖皮质激素水平及通路异常，降低宫内不良环境对子代发育的影响。
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不同剂量IDPN对多发性抽动症小鼠的影响
Abstract:
目的 探究不同剂量3,3-亚氨基二丙腈（3,3-iminodipropionitrile，IDPN）对多发性抽动症（Tourette S yndrome，TS）小鼠的影响，旨在优化造模剂量建立稳定TS模型。方法 32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组和造模组，造模组给予IDPN并分为低剂量组（300 mg/kg）、中剂量组（350 mg/kg）和高剂量组（400 mg/kg），正常组给予等体积生理盐水，腹腔注射7 d。造模结束后第0天和第7天利用刻板印象评分、头体抽搐次数和旷场实验分析小鼠造模效果；ELISA检测小鼠血清及脑组织中多巴胺和TNF-α 含量；苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠的纹状体和海马组织形态。结果 刻板印象评分表明中、高剂量组小鼠造模成功；旷场实验中，与正常组小鼠相比仅高剂量组小鼠行为有显著变化（P < 0.05）；ELISA结果表明，与正常组小鼠相比，造模组小鼠血清多巴胺含量均显著升高（P < 0.05），中、高剂量组小鼠血清TNF-α含量显著升高（P < 0.05），各组间脑匀浆中多巴胺及TNF-α含量均无显著性差异（P > 0.05）；HE染色结果显示，正常组小鼠纹状体和海马组织的神经元及胶质细胞形态正常，造模组小鼠纹状体和海马组织均出现少量神经退行性病变和少量的神经元胞体肿胀，其中高剂量组小鼠纹状体和海马体有明显的淋巴细胞浸润。结论 本研究通过系统比较不同剂量IDPN对TS小鼠模型构建的影响，明确400 mg/kg为更优的造模剂量。研究内容为TS小鼠造模剂量研究提供了数据支持，对保证实验前期顺利进行具有一定参考价值，有助于评估后续药物干预的治疗效果。
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围绝经期抑郁动物模型研究进展
Abstract:
【】 围绝经期抑郁症因为性腺功能减退,严重影响女性的身心健康,以情绪低落、焦虑不安、思维迟钝、兴趣减退为主要特点,并伴有自主神经功能紊乱和内分泌功能障碍。其发病机制尚不明确且存在争议,诸多学者以围绝经期抑郁动物模型为基础进行科学研究,而良好的围绝经期抑郁动物模型是研究其病理生理机制的基本前提,是可靠科研结果的保障。因此,本文结合国内外围绝经期抑郁的现代研究机制和动物模型的研究现状,对造模方法、原理、结果进行概述、评价和归纳,为科研实验选择合适的动物模型提供科学基础和参考依据。
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涡虫作为模式动物的研究进展
Abstract:
涡虫具有强大的再生能力,在进化上占有重要地位。涡虫是用于实验研究理想的模式动物,在再生医学、毒理学、免疫学、遗传学等方面都有研究报道。本文将对涡虫作为模式动物研究取得的进展进行总结,为未来涡虫研究提供参考。
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MMTV-PyMT乳腺癌小鼠不同周龄肿瘤微环境动态变化
Abstract:
目的 研究不同周龄MMTV-PyMT乳腺癌转基因小鼠的致瘤特性及肿瘤微环境中免疫细胞的组成变化。方法 准备8组周龄在4、6、8、10、12、14、16、18周龄的MMTV-PyMT雌性小鼠（以FVB小鼠为背景）以及1组8周龄FVB雌性小鼠，对其血常规进行检测，通过组织病理学切片观察乳腺的病理变化及肺转移情况，通过流式细胞术分析血液、脾脏、肿瘤中的免疫细胞。结果 MMTV-PyMT小鼠4-6周龄时乳腺导管出现腺管样病变，8-9周龄时导管部分长至生长边界，此后逐渐突破腺体边界，在8-12周龄时形成早期乳腺癌，在10-14周龄时出现晚期乳腺癌的特征。在12周龄时部分小鼠肺部分出现可见转移病灶，14周龄肺部转移灶明显增多；随着周龄增长，小鼠血液中白细胞、中性粒细胞、血小板逐渐增多，而淋巴细胞、红细胞则呈逐渐下降趋势；流式细胞术提示随着周龄增长，小鼠脾脏、肿瘤中T细胞比例逐渐下降，血液、脾脏、肿瘤中MDSCs逐渐增加，肿瘤中NK细胞也逐渐增加。结论 本研究对不同周龄MMTV-PyMT小鼠模型的血常规、病理及组织中的免疫细胞进行分析，为乳腺癌恶性进展过程中肿瘤免疫微环境的动态变化提供新视角。
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冠状动脉微血管疾病实验动物模型的研究进展
Abstract:
冠状动脉微血管疾病(coronary microvascular disease,CMVD)指在动脉粥样硬化性或非动脉粥样硬化性致病因素作用下,冠状前小动脉、小动脉和毛细血管结构或功能异常引发心肌缺血的临床综合征。因CMVD发病机制复杂,临床诊断困难,发病率日益攀升,故构建能多方面反应疾病特征的动物模型并利用该模型开发针对性治疗药物便显得尤为迫切。目前构建CMVD动物模型主要通过增加压力负荷、扰乱代谢等方式以模拟高血压、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病引起的继发性微血管病变,或通过手术结扎冠脉、注射致栓剂等方式直接诱导微血管栓塞。本文系统综述了CMVD模型常用实验动物的相关特点,概述其造模方法、适应症及优缺点,以期为CMVD基础研究提供参考。
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皮质酮诱导小鼠静息能量代谢率变化及补肾方剂干预的线粒体机制研究
Abstract:
目的 探究皮质酮(Corticosterone,CORT)诱导小鼠静息能量代谢率(Resting metabolic rate,RMR)改变的趋势和相关机制,观察经典补肾方剂知柏地黄丸和金匮肾气丸的干预作用。方法 64只实验小鼠随机分为短期和长期2批,每批随机分为4组：空白对照组、模型组、知柏地黄丸组、金匮肾气丸组。模型组、知柏地黄丸组、金匮肾气丸组小鼠给予含皮质酮无菌饮用水,空白对照组小鼠给予含1 %无水乙醇的无菌饮用水。知柏地黄丸组、金匮肾气丸组小鼠给予知柏地黄丸、金匮肾气丸混悬液灌胃,空白对照组及模型组小鼠给予等量生理盐水灌胃。造模及中药干预期间动态监测各组小鼠RMR,实验结束后,留取各组小鼠血清、肝脏、肌肉。透射电镜观察各组肝脏、肌肉组织线粒体形态；免疫荧光观察各组肝脏、肌肉组织甲状腺素受体(Thyroid hormone receptor, TR)表达水平,检测各组肝脏、肌肉组织丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)水平,各组血清促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotropic hormone,ACTH)、促甲状腺素(Thyroid stimulating hormone,TSH)、胰岛素(Insulin,INS)、三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)、甲状腺素(Thyroxine,T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(Free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(Free thyroxine,FT4)、8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)、成纤维细胞生长因子-21(Fibroblast growth factor 21,FGF-21)、生长分化因子-15(Growth differentiation factor 15,GDF-15)、L-乳酸(L(+)-Lactic acid)、丙酮酸(Pyruvic acid)水平。结果。与空白对照组比较,模型组小鼠肝脏、肌肉组织线粒体形态受损、TR表达量降低。短期批次(Day8),模型组小鼠RMR、肝脏组织ATP含量、血清T4、ACTH、INS水平显著升高,血清FGF-21、TSH水平、肝脏组织MDA含量显著降低,长期批次(Day56),模型组小鼠RMR、血清8-OhdG、INS水平、肝脏、肌肉组织ATP含量显著降低,血清FGF-21、GDF-15、T3、T4、FT3、FT4水平、肝脏、肌肉组织MDA含量显著升高。与模型组比较,短期批次,知柏地黄丸组肌肉组织TRα表达量升高；金匮肾气丸组肌肉组织线粒体形态改善,肌肉组织TRα表达量升高。长期批次,金匮肾气丸组肌肉组织TRα表达量也明显升高。与模型组比较,短期批次,知柏地黄丸组小鼠RMR、血清L-乳酸水平显著降低,血清8-OHdG水平显著升高。金匮肾气丸组小鼠血清FGF-21水平显著升高,血清L-乳酸、FT4、肝脏组织ATP水平显著降低。长期批次,知柏地黄丸组血清FGF-21显著降低。金匮肾气丸组RMR、肝脏组织ATP水平显著升高,血清FGF-21、GDF-15、T3、FT4水平、肌肉组织MDA水平显著降低。 结论 CORT诱导小鼠RMR随干预时间出现先升高、再降低的趋势。CORT短期应用时,知柏地黄丸显著降低小鼠RMR,长期应用时,金匮肾气丸显著升高小鼠RMR。其机制可能与组织线粒体损伤、甲状腺素分泌、甲状腺素受体表达相关。
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卵巢型子宫内膜异位症大鼠模型的建立与评价
马艺鸣, 刘慧敏, 孟鑫, 齐嘉泽, 安铭立, 付欣平, 陈景伟
Abstract:
【摘要】目的 采用子宫角返折法建立卵巢型子宫内膜异位症（Endometriosis，EMS）大鼠模型，评估子宫角返折法建立卵巢型EMS大鼠模型的可行性，为探究EMS发病机制和治疗方法等提供理想的动物模型。 方法 将50只SPF级雌性SD大鼠随机分为5组，分别为假手术组、1周组、2周组、3周组、4周组，每组10只，除假手术组外采用子宫角返折法建立卵巢型EMS模型，分别在造模后第1、2、3、4周观察造模成功率、异位灶体积及重量，初步评价模型。采用苏木精-伊红（HE）染色观察异位灶形态，免疫组化法检测子宫及异位灶组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞增殖核抗原（Ki67）、上皮细胞钙黏蛋白（E-Cadherin）、神经钙黏附蛋白（N-Cadherin）蛋白的表达，进一步评价模型并分析造模后不同时间点异位灶细胞增殖及上皮间质转化程度。结果 造模后第1、2、3、4周造模成功率分别为80%、90%、100%、100%（P>0.05）。与造模后1、2周相比，3、4周异位灶体积明显增大，重量明显增加（P<0.01）。HE染色可见异位灶中有子宫内膜上皮细胞、间质细胞和少量腺体。免疫组织化学染色结果显示，与假手术组相比，造模后1、2、3、4周大鼠子宫组织中Ki67、PCNA、N-Cadherin表达水平显著升高（P<0.05，P<0.01）；E-Cadherin表达水平显著降低（P<0.05，P<0.01）。与造模后1周相比，造模后2、3、4周大鼠子宫及异位灶组织中Ki67、PCNA、N-Cadherin表达水平显著升高（P<0.05，P<0.01）；E-Cadherin表达水平显著降低（P<0.05，P<0.01）。结论 通过子宫角返折法可以建立大鼠卵巢型EMS的模型，术后1周可以观察到异位灶形成，造模成功率随造模时间延长而提高。PCNA、Ki67、N-Cadherin在子宫及异位灶中均有显著性表达，表达强度随造模时间延长而递增。E-Cadherin在子宫及异位灶中的表达强度随造模时间延长而降低。结果表明，子宫角返折法构建EMS大鼠模型成模率高，可作为一种稳定的EMS建模方法。 【关键词】子宫内膜异位症；大鼠；动物模型；返折法
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一种慢性肝衰竭大鼠动物模型的制备方法研究
王娜, 陆正峰, 王明刚, 吴凤兰, 张日云, 张荣臻, 冯雯倩, 杜洋, 舒发明, 蓝艳梅, 毛德文
Abstract:
目的 制备稳定的慢性肝衰竭大鼠动物模型，为开展相关基础研究提供造模方法。方法 将66只SPF级SD大鼠分为正常组（18只）与造模组（48只），造模组通过腹腔注射50% CCl4橄榄油溶液（1.5 ml/kg，每周2次），分别于第8、16、24周进行多维度评估。评估内容包括：超声检测肝脏形态、硬度、门静脉直径及腹水；采集血清、血浆及肝组织检测肝功能（AST、ALT、TBIL）、凝血功能（PT、INR）及血氨水平；通过HE染色和Masson染色观察肝组织损伤及纤维化程度；水迷宫实验评估认知功能；同步记录生存率及肉眼肝组织病理变化。结果 与正常组相比，模型组大鼠逐渐出现活动减少、食欲减退、尿液黄染及腹围增大。超声显示随时间推移，模型组肝实质回声增强增粗，继发腹水形成、门静脉扩张及门脉高压。24周时水迷宫及血氨检测证实模型组存在认知功能下降（记忆力、定向力减退）及肝性脑病。大体观察显示模型组肝脏外观渐呈粗糙凹凸不平且体积萎缩。组织学方面：HE染色显示肝细胞肿胀、脂肪变性和坏死；Masson染色证实纤维化进展伴假小叶形成。肝功能指标AST、ALT、TBIL及血氨持续升高，凝血功能异常（PT延长、INR升高）随建模进程逐渐加重。结论 采用50% CCl4橄榄油溶液（1.5 ml/kg/周）腹腔注射24周构建的大鼠模型，可稳定模拟持续性慢性肝损伤，并在肝硬化失代偿期基础上引发慢性肝衰竭的典型病理改变及并发症。该模型完整复现人体肝炎→肝纤维化→肝硬化代偿期→失代偿期→慢性肝衰竭的病理演变链，为慢性肝衰竭机制研究提供可靠建模参考。
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基于铁脂代谢的AS动物模型的比较分析
Abstract:
动脉粥样硬化（AS）是一种慢性炎症性疾病，其发生和发展涉及脂质代谢紊乱和铁代谢紊乱。建立理想的动物模型是研究AS病因、发病机制、预防及治疗措施的重要手段。AS动物模型铁脂代谢紊乱的主要研究对象是小鼠和小型猪。小鼠由于体型小、繁殖快、饲养方便、成本低廉等优势，成为基础研究中应用广泛的实验动物，且以雄性ApoE-/-小鼠更为常见。单因素高脂饲料诱导AS铁脂代谢紊乱是常用的模型建立方法，其会引起脂质代谢紊乱和铁代谢紊乱，具体表现为血脂水平升高、主动脉可见大量斑块与铁沉积、血清铁与肝脏铁增加明显。本文通过比较分析不同干预因素对AS动物模型铁脂代谢的影响，分析总结饮食诱导、化学物质干预、基因修饰等方式构建AS动物模型的方法，以期为AS与代谢性疾病的研究及新药开发提供参考与借鉴。
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慢性脑缺血气虚血瘀证病证结合大鼠模型的建立与评价
刘倬秀, 郝阳晶, 付豪, 李钦青, 张建军, 楚世峰, 张钊, 曹卓青, 贺文彬
Abstract:
目的：建立一种慢性脑缺血气虚血瘀证病证结合大鼠模型并对其评价。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（sham）、双侧颈总动脉结扎组（2-VO）与睡眠剥夺联合双侧颈总动脉结扎组（SD + 2-VO），每组10只；运用力竭游泳和舌色采集评价动物气虚血瘀证体征，通过巴恩斯迷宫检测动物认知能力，激光散斑血流成像比较动物脑血流量，HE染色和髓鞘染色观察海马和白质病理学变化，透射电镜观察海马CA1区神经元超微结构改变，Western blot及IF检测NeuN、VEGFA、CD31蛋白表达。结果：与sham组相比，2-VO组大鼠表现出脑血流量降低，但并不能完全模拟气虚血瘀的临床表现。与2-VO组相比，SD + 2-VO组大鼠表现出活动量减少，脑血流显著下降，游泳时间显著缩短，舌色黯淡的特点；巴恩斯迷宫显示，SD + 2-VO组动物学习记忆能力显著降低；HE染色、透射电镜和髓鞘染色显示，SD + 2-VO组神经元及白质损伤显著。结果表明SD + 2-VO模型能够体现慢性脑缺血气虚血瘀证的临床表现。结论：睡眠剥夺结合双侧颈总动脉结扎手术能够建立慢性脑缺血气虚血瘀证大鼠模型，与2-VO模型相比，气虚血瘀体征更显著，更符合临床慢性脑缺血气虚血瘀证的表现，为慢性脑缺血中医药研究提供了动物模型基础。
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结肠炎相关结肠癌小鼠模型不同阶段病理变化的动态评估
黄莉莉, 肖凡, 陈桂蓉, 邓贵方, 宋锦彬, 杜群, 李燕舞
Abstract:
目的 探讨结肠炎相关性结肠癌（Colitis-Associated Colon Cancer，CAC）小鼠模型不同时间点肠道病理发展的动态变化特征。 方法 采用偶氮甲烷（AOM）/葡聚糖硫酸钠（DSS）构建C57BL/6 小鼠结肠炎-癌模型，分别在造模后的第7、10、14周三个时间点取材，观测小鼠脾脏指数、结肠长度、重量及结肠单位长度质量；苏木素-伊红(HE) 、Masson染色观察小鼠结肠病理学变化特征；实时荧光定量PCR法检测不同病理阶段肿瘤干细胞标记物CD44及Wnt信号通路Wnt2b、Lrp5、Axin2、Znrf3基因表达；多重免疫荧光组化（mIHC）和细胞免疫荧光（IF）检测成纤维细胞活化蛋白(cancer-associatedfibroblasts,FAP)、CD44、增殖标记物Ki67、杯状细胞MUC2蛋白表达。同时，体外分离培养第10、14周模型小鼠来源的结肠类器官，观察类器官的形态及特征标记物变化。结果 AOM/DSS诱导7周模型小鼠结肠病理表现为隐窝结构减少、扭曲、分支等变化，伴随少量胶原纤维沉积，10周、14周模型小鼠结肠呈现不同程度上皮内瘤变，并随着时间延长出现高级别上皮内瘤变的比例增加，胶原纤维沉积范围增多，伴随结肠长度缩短、肠壁增厚，脾脏增大等现象。与正常组相比，第14周模型小鼠结肠CD44、Wnt2b表达显著升高（p＜0.05），Axin2表达下降（p＜0.01）。与第7周相比，Wnt2b、Lrp5、Znrf3表达升高（p＜0.01、p＜0.05、p＜0.01），Axin2表达下降（p＜0.01）。多重免疫荧光组化染色显示：第10、14周模型小鼠结肠FAP、CD44表达增多，而MUC2表达降低。其来源的体外类器官呈现囊球样扩张，尤其以14周模型来源的类器官更为突出，Ki67和CD44在14周模型来源的类器官中表达明显增强。 结论 AOM/DSS诱导的小鼠模型在7、10、14周可分别呈现结肠慢性炎症、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变为主的动态病理改变，病变区域以成纤维细胞激活及上皮细胞异常增殖为特征。
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先天性纯红细胞再生障碍性贫血实验模型研究进展
蔡威威, 甘嘉颖, 余靖斌, 李慧伶, 吴佳卉, 王雪, 熊东花, 王学耕, 梁芳
Abstract:
先天性纯红细胞再生障碍性贫血（Diamond-Blackfan anemia，DBA）是一种罕见的遗传性疾病，其特征为骨髓衰竭、先天性畸形和严重的红细胞发育异常。目前研究已确定包括RPS19、RPL5、RPL11在内的24个核糖体蛋白（ribosomal protein，RP）基因，以及GATA-1、EPO、TP53等6个非核糖体蛋白基因的突变与DBA的发生密切相关。鉴于DBA的发病率较低，患者群体有限，且缺乏足够的研究模型，对于基因突变如何导致DBA的具体病理机制仍存在许多未知，临床上针对DBA的治疗手段也相当有限。本文综述了研究者在DBA研究中所开发的斑马鱼模型、小鼠模型和人类细胞模型，这些模型不仅阐明了DBA的病理机制，并对进入临床试验的药物进行了追踪，为深入探究DBA的发病机制和药物开发提供了重要参考。
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SPF级和无菌级金黄地鼠生物学特性比较分析
Abstract:
【目的】对8周龄SPF级和无菌级金黄地鼠的生理生化、组织病理学及脂代谢相关指标进行比较分析。【方法】8周龄SPF级和无菌级金黄地鼠雌雄各10只。采用全自动血液细胞分析仪、全自动血液生化分析仪、ELISA试剂盒分别测定血常规、血生化及脂代谢相关血清细胞因子指标。并对盲肠、小肠、肺脏、脾脏、前胃、腺胃进行组织病理学观察。【结果】 8周龄SPF级金黄地鼠和无菌级金黄地鼠比较。(1)血液生理指标中白细胞数(WBC)、血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞血红蛋白 (MCH)、平均血小板体积 (MPV)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、平均红细胞体积(MCV)、血小板分布宽度(PDW)、淋巴细胞(LYM)、嗜中性粒细胞(NEUT)、嗜碱性粒细胞(BAS)、嗜碱性粒细胞百分比(BAS%)、淋巴细胞百分比(LYM%)、嗜中性粒细胞百分比(NEUT%)等13项的测量值差异性显著。(2)血液生化指标中低密度脂蛋白胆固醇(low -density lipoprotein,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)等、C-肽(C-Peptide)等7项的测量值差异性显著。(3)脂代谢相关血清细胞因子指标中白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、脂联素(adiponectin,ADP)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等5项的测量值差异性显著。(4)HE结果显示与SPF级金黄地鼠相比,无菌金黄地鼠盲肠肌层变薄,附着于黏膜皱裂的隐窝数量减少；回肠管腔增大,杯状细胞数量增多；肺泡隔增宽；脾脏白髓中免疫细胞增多,血窦中含血量增加；前胃黏膜层变薄；腺胃管状腺嗜碱性强度减弱。【结论】通过对8周龄SPF级和无菌级金黄地鼠的生理生化、组织病理学及脂代谢相关指标的比较分析。初步得出其血液生理、生化、组织病理学及脂代谢相关细胞因子参数的参考范围。
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斑马鱼模型在骨骼遗传病中的研究进展
Abstract:
骨骼遗传病(Skeletal genetic diseases)是一类影响骨骼系统的遗传性疾病,其特征为全身骨骼生长发育障碍。临床上,这些疾病常表现为头颅四肢畸形、脊柱侧弯等异常病理表现,严重影响患者的生活质量。根据2023年修订的遗传性骨骼疾病分类学,可分为41大类,涉及552个基因。尽管许多骨骼遗传病的研究已取得进展,但约一半疾病的致病机制尚未完全阐明。斑马鱼(Zebrafish)作为一种新型模式动物,其骨骼发育过程和调控机制与哺乳动物高度保守。斑马鱼的小型个体、强大繁殖力、繁殖周期短和胚胎透明等特点,为利用该模型研究人类骨骼遗传病的发病机制提供了独特优势。本综述聚焦于斑马鱼模型在人类骨骼遗传病研究中的应用进展。通过广泛文献回顾,我们选取了包括FGFR3相关软骨发育不全、2型胶原病和11型胶原病在内的9大类骨骼遗传疾病进行详细讨论。本文从疾病概况、斑马鱼模型构建及其研究意义等方面进行总结,旨在为深入研究人类骨骼遗传病的发病机制提供参考。
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月桂酸钠诱导脑小血管病大鼠模型的建立与评价
陈炎森, 林浩伟, 张予菲, 林雨星, 曹长源, 许欣婷, 吴钰婷, 蔡巧燕, 张 铃
Abstract:
目的 通过颈内动脉单侧、单次注射月桂酸钠，建立脑小血管病（cerebral small vessel disease，CSVD）大鼠模型，并通过检测行为学、血清相关指标、脑梗死体积、脑微血管密度、血流动力学、脑组织病理学及血脑屏障相关指标，评估模型的有效性。方法 将12只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组（Control组）和模型组（Model组），每组6只。模型组经颈内动脉，单次注射100 μL的月桂酸钠（2 g/L），对照组行相同手术，注射等体积的生理盐水。利用Longa评分及姿势反射实验进行大鼠神经行为学评估；Elisa检测大鼠血清同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）含量；核磁共振成像检测脑梗死体积、脑血管成像观察脑血管密度改变；超声检测颈动脉血管阻力指数（resistance index，RI）及血液灌流量指数（perfusion Index，PI）；HE染色观察大脑组织病理变化；免疫组化检测脑组织脑微血管密度CD31及紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin）的表达。结果 与对照组相比，模型组Longa评分与姿势反射评分均显著升高（P<0.05），脑梗死体积显著增加（P<0.05），脑血管密度明显下降，颈动脉RI、PI值及血清中HCY的含量均显著升高（P<0.05）；HE染色结果发现模型组的脑皮质区神经元核固缩，血管周围间隙变大；免疫组化结果显示脑皮质区CD31、ZO-1、Occludin的表达显著减少（P<0.05）。结论 通过颈内动脉单侧、单次注射高浓度月桂酸钠可以快速、有效地建立CSVD模型；该方法建立的CSVD大鼠模型，存在神经行为学异常、认知功能障碍、脑梗死、脑供血不足、血管密度减少和血脑屏障破坏现象，可作为CSVD研究的有效的动物模型。
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体表慢性难愈创面动物模型制备及研究进展
Abstract:
体表慢性难愈创面是一种创面不愈合状态,建立一种与人类相似的慢性难愈创面动物模型是防治和了解人体慢性创面形成复杂性及相关病理机制的重要工具。一般来说,创面动物模型是通过一定外界损伤干预引起机体创面形成,诱发分子生物学异常来进行构建的,常用的造模方法有手术切除法、加压缺血处置法、药物处置法、放射线处置法等,通常模型建造是否成功可通过常规治疗后创面能否恢复、创面大小测量、体征观察、体质量测定、脏器指数、红外成像等方法进行评判。尽管当前存在着多种多样的慢性创面动物模型构建与评价方法,但目前这一领域仍缺乏统一的标准。鉴于此,研究者们需高度重视造模方法及模型评价手段的选择,务必依据自身的实际研究需求,精心挑选最为合适的方案。这一举措对于确保实验结果的准确性和可靠性至关重要,是获取最佳科研成果不可或缺的一环。
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骨癌痛动物模型及中医药作用机制研究进展
Abstract:
骨癌痛（cancer-induced bone pain,CIBP）不仅给癌症患者带来巨大痛苦，也降低其生活质量和自信心。导致CIBP的机制是复杂的，并随着癌症的进展而发生演变。目前治疗手段效果有限且存在不良反应。中医药在治疗CIBP方面具有一定优势，但相关镇痛机制有待深入探讨。建立典型、稳定、易重复的动物模型是进一步研究疾病发病机制和验证干预措施有效性的前提和基础。本文总结近3年常用的CIBP动物模型造模方法，并总结CIBP动物模型在中医药相关镇痛机制研究的应用，以期为今后的CIBP研究提供方向。
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槟榔碱对慢性不可预知温和应激小鼠抗抑郁作用及机制研究
Abstract:
目的：以槟榔碱为研究对象，采用慢性不可预知温和应激（chronic and unpredictable mild stress,CUMS）所致小鼠抑郁模型，探究槟榔碱的抗抑郁活性及可能的作用机制，为槟榔健康功效挖掘提供数据支持并为槟榔资源的开发利用奠定理论基础。方法：选取60只检疫合格的SPF级C57/BL6小鼠，根据体重随机分为空白组、模型组、盐酸氟西汀组（20mg/kg）、槟榔碱低、中、高剂量组（10、20、40mg/kg），每组10只。采用旷场、悬尾和强迫游泳等行为学方法评价槟榔碱对抑郁小鼠的行为影响；采用酶联免疫法检测分析小鼠血清皮质酮（corticosterone，Cort）含量、血清和脑组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、过氧化氢酶(catalase，CAT）水平以及脑组织中5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）、多巴胺（dopamine，DA）、γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、白介素-10（interleukin-10，IL-10）和白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）等生化指标；Western blot检测脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）、酪氨酸激酶受体B（tropomyosin receptor kinase B,TrkB)、环磷腺苷效应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein，CREB）的表达。结果表明，槟榔碱能显著降低模型小鼠在旷场活动中总路程、平均速度，增加小鼠活动次数；显著降低模型小鼠在悬尾和强迫游泳实验的不动时间。槟榔碱显著降低小鼠血清皮质酮水平，提高SOD、CAT水平同时降低MDA水平；显著增加神经递质5-HT、DA、NE、GABA水平；显著降低细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平；以及显著上调小鼠脑组织内BDNF、TrkB和CREB的表达水平。结论：本研究表明槟榔碱具备显著抗抑郁活性，其作用机制与对抗氧化应激损伤、抑制神经炎性反应、调节神经递质水平以及BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。本研究首次挖掘了槟榔碱的抗抑郁功效并初步揭示其可能的调控机制，可为槟榔发挥神经活性提供数据支持并为槟榔的药用开发奠定理论基础。
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LPS诱导的小鼠急性肺损伤后肺纤维化模型构建与机制研究
Abstract:
肺纤维化的进展是ALI后临床上常见的预后问题,本实验通过脂多糖多次反复打击筛选构建模拟临床上ALI后肺纤维化的模型,观察急性肺损伤后到肺纤维化的发展过程,并探索介导炎症损伤向纤维化转化的可能机制。方法:采用1、2、4、8mg/kg等不同剂量的脂多糖不同次数经鼻腔滴入造成急性肺损伤,分别于造模后7、14、21、28、35、42日,通过肺组织中α-SMA、COI-1的表达,肺组织中羟脯氨酸含量,MASSON染色观察肺组织胶原纤维沉积,比较不同造模方法肺组织纤维化形成过程及纤维化程度,检测各节点肺组织中IL-1β、TNF-α、TGF-β1的表达变化,探讨纤维化形成的机制。结果:结果显示,以1mg/kg、4mg/kg、4mg/kg LPS连续三天进行打击的M-1组小鼠可以构建稳定的ALI后肺纤维化模型。MASSON染色结果显示,M-1组小鼠肺组织中α-SMA、COI-1的表达、羟脯氨酸含量和胶原纤维沉从7d后开始随时间依赖性增加,造模后21d肺组织间质出现明显的胶原沉积,第28天纤维化指标显著性升高,与Con组小鼠比较有显著性差异。MASSON染色结果显示,胶原沉积持续增加到观察的42d。其余不同剂量、不同打击次数的各模型组小鼠肺组织HYP、胶原纤维与Con组小鼠比较没有增加或增加不显著。WB结果显示:M-1组小鼠肺组织中的转化生长因子TGF-β1在打击后的14d开始表达逐渐增加,到28d显著高于Con组,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β在第7天(急性期)均显著增加,TNF-α的表达至观察的28d持续增加,IL-1β则在第7天急性期后表达逐渐下降。其余未形成纤维化的各模型组小鼠肺组织中TNF-α、IL-1β在急性期后表达均持续降低。结论:LPS以1mg/kg、4mg/kg、4mg/kg剂量连续三次打击可成功构建ALI/ARDS后肺纤维化模型,其机制主要可能与TNF-α持续高表达调控TGF-β1诱导成纤维细胞活化与增殖有关。
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桑寄生水煎液对先兆流产模型大鼠影响的研究
Abstract:
目的 探讨桑寄生水煎液对先兆流产大鼠的安胎作用及其机制。方法 将72只SPF级雌雄比例为2:1的SD大鼠合笼后，将48只孕鼠分为正常组、先兆流产模型组、阳性对照组、桑寄生水煎液高、中、低剂量组，每组8只。阳性对照组给予灌胃3.02 mg/kg的地屈孕酮，桑寄生水煎液低剂量、桑寄生水煎液中剂量、桑寄生水煎液高剂量分别给予2.5 g/kg、5 g/kg、10 g/kg灌胃，正常组和模型组灌胃等体积生理盐水，每天1次，连续给药10天。第10 d灌胃相应药液后，除正常组，其余各组加灌3.75 mg/kg的米非司酮混悬液，观察桑寄生对阴道出血率、流产率等的影响；ELISA法检测大鼠血清促卵泡生成素（follicle-stimulating hormone，FSH）、促黄体生成素（luteinising hormone，LH）、雌激素（estrogen，E）、孕酮（progesterone，P）、睾酮（testosterone，T）、芳香化酶（aromatase）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和大鼠卵巢雌激素（E）、孕酮（P）含量；免疫荧光法观察孕鼠子宫蜕膜组织雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕酮受体（progesterone receptor，PR）、血管内皮细胞生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2，VEGFR2）、血小板内皮细胞粘附分子（platelet endothelial cell adhesion molecule-1，CD31）阳性表达情况，并进行半定量分析。结果 米非司酮造模后，各组孕鼠阴道出血率和流产率均极显著升高，桑寄生治疗组能够有效降低大鼠的阴道出血率和流产率，能够升高血清E、P、VEGF和卵巢E、P的含量，降低血清LH含量、维持FSH的分泌，增强蜕膜组织中ER、PR、VEGFR2、CD31的表达活性。结论 桑寄生水煎液对先兆流产大鼠有明显的安胎作用，作用机制与调整子宫上游HPG轴的正常生理功能、增强P/PR/VEGF/VEGFR2、E/ER/VEGF/VEGFR2通路的下游表达有关。
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