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何嘉玲,暴 国,王天奇,张长勇,李 楠,孙德明.斑马鱼幼鱼整鱼石蜡切片制作[J].中国比较医学杂志,2020,30(8):35~41.
斑马鱼幼鱼整鱼石蜡切片制作
Preparation of paraffin-embedded sections of zebrafish larva
投稿时间:2020-06-18  
DOI:10. 3969 / j.issn.1671-7856. 2020. 08. 006
中文关键词:  斑马鱼幼鱼  石蜡切片  固定剂  脱水剂
英文关键词:zebrafish larva  paraffin-embedded section  fixative solution  dehydration reagent
基金项目:
作者单位E-mail
何嘉玲 国家卫生健康委科学技术研究所实验动物中心,北京 100081 missu329@ aliyun.com 
暴 国 国家卫生健康委科学技术研究所实验动物中心,北京 100081  
王天奇 国家卫生健康委科学技术研究所实验动物中心,北京 100081  
张长勇 国家卫生健康委科学技术研究所实验动物中心,北京 100081  
李 楠 国家卫生健康委科学技术研究所实验动物中心,北京 100081  
孙德明 国家卫生健康委科学技术研究所实验动物中心,北京 100081 sundemingnet@ 163.com 
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中文摘要:
      目的 探讨斑马鱼幼鱼整鱼的石蜡切片制作。 方法 以 4 d 斑马鱼幼鱼为材料,探讨使用不同固定 剂和脱水剂的切片效果。 结果 4% PFA 过夜不适合幼鱼脑组织和肌肉固定,组织脆裂严重,但对肠道影响较小。 Bouin’s 液适合幼鱼固定,后续使用叔丁醇脱水稍优于乙醇。 Bouin’s 液固定的幼鱼脑组织脱水 1 min,肌肉组织脱 水 4 min 能获得良好的切片效果。 结论 在优化条件下,制作的切片基本达到了切片完整,薄厚均匀,无褶无刀痕, 裂痕;染色核质分明,红蓝适度,透明洁净等要求。可供需进行斑马鱼幼鱼石蜡切片的研究者参考。
英文摘要:
      Objective To develop a method of paraffin-embedded section preparation of whole zebrafish larva. Methods At 4 days post-fertilization, zebrafish larvae were used to explore the effect of two kinds of fixative solution and dehydration reagent on paraffin-embedded sections. Results Overnight 4% PFA fixation was not suitable for brain or muscle tissues of zebrafish larva. The tissue was severely brittle, but it had little effect on the intestines. Bouin’ s fixative solution was suitable for fixation of zebrafish larva, and subsequent use of tert-butanol or ethanol showed little difference. The dehydration by tert-butanol was slightly better than that of ethanol. For Bouin’ s solution-fixed zebrafish larva, brain tissue dehydrated for 1 minute and muscle tissue dehydrated for 4 minutes can obtain a standard paraffin section which has no folds, no cracks and clearly dyed. Conclusions Under optimized conditions, the prepared sections met the standard for paraffin-embedded sections: a complete, uniform thickness, no folds, no knife marks or cracks, a clearly dyed nucleus, moderately red and blue, transparent, and clean. This method can be used as a reference for researchers who need to prepare paraffin-embedded sections of zebrafish larva.
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