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陈衍,高江梅,赵世坤,李比海,饶军华,杨世华.无卵黄冷冻液冷冻食蟹猴精液方法的优化[J].中国实验动物学报,2022,30(1):70~76.
无卵黄冷冻液冷冻食蟹猴精液方法的优化
Optimization of cryopreservation of cynomolgus monkey semen with yolk-free solution
投稿时间:2021-08-13  
DOI:10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2022. 01. 009
中文关键词:  无卵黄冷冻液  精子冻存  食蟹猴
英文关键词:yolk-free cryopreservation solution  sperm cryopreservation  cynomolgus monkey
基金项目:
作者单位E-mail
陈衍 华南农业大学兽医学院,岭南现代农业广东实验室,广州 510260 292800880@ qq.com 
高江梅 广东省科学院动物研究所,广东省动物保护与资源利用重点实验室,广东省野生动物保护与利用公共实验室,广州 510260 gaojm@ giz.gd.cn 
赵世坤 华南农业大学兽医学院,岭南现代农业广东实验室,广州 510260  
李比海 广东省科学院动物研究所,广东省动物保护与资源利用重点实验室,广东省野生动物保护与利用公共实验室,广州 510260  
饶军华 广东省科学院动物研究所,广东省动物保护与资源利用重点实验室,广东省野生动物保护与利用公共实验室,广州 510260 junhuar919@ 163.com 
杨世华 华南农业大学兽医学院,岭南现代农业广东实验室,广州 510260 yangsh@ scau.edu.cn 
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中文摘要:
       目的 由于传统的精子冷冻液存在卵黄等不确定成分,具有生物污染的风险。 因此,本研究旨在利用 Origio 及 Quinn’s 两种商品化无卵黄冻存液保存食蟹猴种质资源并确定食蟹猴精子最佳冻存条件。 方法 利用阴茎电刺激收集雄猴精液,使用两种冻存液按不同体积比与精液混合后悬挂于液氮表面不同高度冻存食蟹猴精子。 复苏后,统计精子存活率、复苏率及顶体完整率确定冻存液最佳条件,并在最佳条件下使用 Quinn’ s 冻存液证实精浆对精子冷冻的影响。 结果 使用 Origio 和 Quinn’s 精子冻存液冻存食蟹猴精子的最优条件为:悬挂高度距液氮面 5 cm,精液冻存液体积比为 1 ∶0. 5,在最优条件下,Quinn’ s 组精子复苏率为 38. 02% ± 14. 98%,显著高于 Origio 组精子复苏率 15. 11% ± 14. 49%。 顶体完整率无组间差异。 保留精浆可提高无卵黄冻存液的冷冻效果。 保留精浆后的精子复苏率、顶体完整率分别为 37. 57% ± 13. 22%、84. 64% ± 8. 82%;不保留精浆的精子复苏率、顶体完整率分别为:21. 46% ± 7. 25%、75. 50% ± 9. 62%。 结论 无卵黄冻存液可成功保存食蟹猴精子,为食蟹猴生育力的保护及种质资源保存提供了一种安全可靠的方式。
英文摘要:
       Objective There is a risk of biological contamination from egg yolk and unidentified components in traditional sperm cryopreservation solution. Therefore, this study aimed to use two commercial yolk-free cryopreservation solutions, Origio and Quinn’s, to preserve the semen of cynomolgus monkey and to determine the optimal cryopreservation conditions for this species. Methods Semen from male monkeys was collected by penile electrical stimulation. The two kinds of cryopreservation solution were used to freeze sperm under conditions of different freezing suspension heights above the surface of liquid nitrogen and different cryopreservation liquid volume ratios. The optimal conditions of cryopreservation solution were determined from sperm viability, recovery and acrosomal integrity rates after cryopreservation, and the effect of seminal plasma on sperm cryopreservation was confirmed using optimal conditions with Quinn’s cryopreservation solution. Results The optimal conditions for cryopreservation of cynomolgus monkey sperm with Origio and Quinn’ s solution were suspended at 5 cm above liquid nitrogen, and a volume ratio of semen to cryopreservation solution of 1 ∶0. 5. Under these optimal conditions, the recovery rate using Quinn’ s solution 38. 02% ± 14. 98% was significantly higher than that using Origio solution 15. 11% ± 14. 49%. There was no significant difference in acrosomal integrity between the two solutions. Preservation using seminal plasma can improve the freezing effect of yolk-free cryopreservation solution. The recovery and acrosomal integrity rates with seminal plasma were 37. 57% ± 13. 22% and 84. 64% ± 8. 82%, respectively, compared with recovery and acrosomal integrity rates without seminal plasma of 21. 46% ± 7. 25% and 75. 50% ± 9. 62%, respectively. Conclusions Yolk-free cryopreservation solution successfully preserved cynomolgus monkey sperm, and provides a safe and reliable way for conserving the fertility of male cynomolgus monkeys.
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