摘要: 目的 构建免疫系统人源化的小鼠模型,并移植入人前列腺癌细胞系,以期用于前列腺癌免疫治疗药物研究。 方法 利用 Ficoll 密度梯度离心法, 从新鲜的人外周血中分离出单个核细胞 ( peripheral blood mononucear cells,PBMC),经尾静脉注射 NPG 小鼠,构建具有人免疫系统的小鼠模型。注射后第 3、4、5、6 周分别采用断尾法采集小鼠外周血,并用流式细胞仪监测小鼠外周血中人 CD45 + CD3 + T 细胞的动态变化水平。在注射后 第 3 周给予小鼠皮下移植 1 × 107 个前列腺癌 22Rv1 细胞,每周两次监测肿瘤生长情况。当肿瘤生长至 1000 mmP>3P> 左右,对小鼠施行安乐死;利用流式细胞术、免疫组化、HE 染色等方法分析人源化小鼠外周血、脾及肿瘤组织中人免疫细胞的浸润情况。 结果 模型小鼠在移植人 PBMC 后 3 ~ 6 周期间,外周血中检测到较高水平的 CD45 + CD3 + T 细胞。第 6 周时处死小鼠,HE 染色和免疫组化染色结果表明,模型小鼠的脾和肿瘤组织中具有人 CD4 +、CD8 + T 细胞的浸润。 结论 成功构建了前列腺癌免疫人源化小鼠模型,其外周血、脾及前列腺癌肿瘤组织中均有高水平的人源性 T 细胞浸润,为下一步构建良好的前列腺癌免疫治疗临床前模型奠定了基础。