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李丽芳,陈露西,贾顺姬,颜光玗.Smad2/ 3a 对斑马鱼神经嵴细胞标记基因crestin 表达的影响[J].中国实验动物学报,2019,27(4):415~422.
Smad2/ 3a 对斑马鱼神经嵴细胞标记基因crestin 表达的影响
Effect of Smad2/ 3a on the expression of the neural crest cell marker crestin in zebrafish
投稿时间:2019-03-04  
DOI:10. 3969 / j.issn.1005-4847. 2019. 04. 001
中文关键词:  Smad2/3a  斑马鱼  神经嵴细胞  crestin
英文关键词:Smad2/3a  zebrafish  neural crest cell  crestin
基金项目:
作者单位E-mail
李丽芳 南方医科大学基础医学院,发育生物学教研室,广州 510515 lilf_16@ 163.com 
陈露西 清华大学生命科学学院,膜生物学国家重点实验室,北京 100084 lucychen1234@ hotmail.com 
贾顺姬 清华大学生命科学学院,膜生物学国家重点实验室,北京 100084 jiasj@ mail.tsinghua.edu.cn 
颜光玗 南方医科大学基础医学院,发育生物学教研室,广州 510515 kuangyuyen@ smu.edu.cn 
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中文摘要:
      目的 探讨Smad2/3a 对脊椎动物神经嵴细胞发育的影响。方法 通过在斑马鱼胚胎单细胞时期显微注射smad2/ 3 吗啉环修饰的反义寡核苷酸的方法,特异性敲降smad2/ 3 基因的表达,至胚胎发育至6 体节,利用整胚原位杂交检测神经嵴细胞特异性标记基因snail1b,sox10,foxd3 和crestin 的表达情况;通过casmad2 mRNA 和smad3a mRNA 显微注射的方法过表达smad2 和smad3a,同样利用整胚原位杂交检测神经嵴细胞特异性标记基因crestin 的表达情况;通过过表达casmad2 及smad3a 对下调smad2 和smad3a 的胚胎进行挽救。结果 smad2/ 3a 被敲低后,crestin 的表达量显著降低,而snail1b,sox10 和foxd3 的表达量无明显变化。smad3b 被敲低后,crestin,snail1b,sox10 和foxd3 的表达量均无明显变化;过表达casmad2 和smad3a 均可导致crestin 的表达量增高;过表达casmad2 和smad3a 可挽救由于smad2/ 3a 敲降所造成crestin 的低表达量。结论 Smad2 和Smad3a 对神经嵴细胞标记基因crestin 的表达具有重要作用。
英文摘要:
      Objective  To investigate the function of Smad2/3a on vertebrate neural crest cell development.Methods Knock-down of smad2/ 3 and overexpression of casmad2 and smad3a were achieved by microinjection of antisensemorpholino (MO) and mRNA into one-cell stage embryos, respectively. Then, the expression of snail1b, sox10, foxd3, andcrestin in MO-injected embryos and crestin in mRNA-injected embryos at the 6-somite stage were detected using whole-mountin situ hybridization. casmad2 mRNA and smad3a mRNA were used to rescue smad2 and smad3a morphants. Results Knockdown of smad2 and smad3a resulted in a remarkable downregulation of crestin, while there were no obvious changes inthe expression of snail1b, sox10, or foxd3 in the smad2/ 3a morphants. Knockdown of smad3b did not inhibit the expression ofcrestin, snail1b, sox10, or foxd3. Overexpression of casmad2 and smad3a led to an upregulation of crestin. Overexpression ofsmad2 and smad3a restored the reduction of crestin expression caused by smad2 and smad3a depletion. Conclusions Smad2 and Smad3a play key roles in the regulation of expression levels of crestin during neural crest cell development.
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